AGENTES VIRAIS CAUSADORES DE GASTROENTERITES

1. AGENTES VIRAIS CAUSADORES DE GASTROENTERITES

2. AGENTES VIRAIS CAUSADORES DE GASTROENTERITES Rotavirus Adenovirus Entéricos Calicivírus Astrovírus

3. ROTAVIRUS Família:Reoviridae Gênero: Rotavirus

4. ROTAVIRUS • Isolado primeiramente em 1973 de crianças com diarréia • Identificados por ME de biópsias de duodeno • Linhagens humanas e animais

5. Rotavirus (formato de “roda”)- Estrutura por ME

6. IntroduçãoRotavírus – Características gerais • Capsídeo icosaédrico de 65-75nm • Capsídeo formado por três camadas de proteínas • Não-envelopado • Genoma RNA dupla fita segmentado (11 segmentos) – 16,5-21kb • Extremidade 5’ do genoma com cap • Não envelopados Fonte: Arias et al., 2002

7. ROTAVIRUS- ESTRUTURA 3D

8. Proteínas estruturais do Capsídeo Externo VP7 e VP4 VP7=glicoproteina VP4= proteina P, clivada por protease (tripsina), hemaglutinina viral e formadora de espículas de superfície Proteínas estruturais internas (core) VP1, 2, 3, 6 VP6 é um importante determinante antigênico e responsável pelos grupos Proteínas de Estrutura Viral (VP)

9. Rotavírus – Taxonomia • Grupos, subgupos e sorotipos baseados nas proteinas de capsídeo viral (interno e externo) • 7 Grupos (A a G), sendo o A mais comum e com 2 subgrupos • Grupos A, B, C (Humanos e Animais) • Grupos D, E, F e G (Animais) • Grupo A • 10 Sorotipos (G) – VP7 • 8 Sorotipos (P) e Genotipos [P] – VP4 Ushida et al., 2006

10. EPIDEMIOLOGIADiferenças nos grupos • Grupo A As infecções são as mais comuns • Grupo B Associado com algumas epidemias na China • Grupo C Responsável por diarréias esporádicas em crianças no mundo todo

11. Eletroferotipos baseado na mobilidade dos segmentos de RNA por PAGE Usados em estudos epidemiológicos Classificação(cont.)

12. Rotavirus - Propriedades • Virus é estável no meio ambiente • Relativamente resistente à detergentes • Susceptível à desinfecção com 95% ethanol, ‘Lysoform’ e formalina

13. Patogênese • Célula-alvo são os enterócitos maduros dos vilos intestinais • Penetra na célula via endocitose • Replica-se no citoplasma da célula hospedeira • Dose infecciosa varia de 10 a 100 pfu

14. Rotavírus – Patogênese e Transmissão • Período de incubação: 4-7 dias • Eliminação: 109 por grama de fezes • Transmissão fecal-oral • Sintomas mais freqüentes: • Vômito • Diarréia • Desidratação • Duração dos sintomas: 7 dias • Indivíduos imunocomprometidos • Infecção sistêmica Fonte: Ramig, 2004

15. Replicação • A transcrição do mRNA ocorre via RNA polimerase. • As proteínas do capsídeo são traduzidas. • Os segmentos de mRNA replicados são empacotados no nucleocapsídeo imaturo. • O mRNA é replicado para formar o genoma de RNA dupla fita.

16. Epidemiologia no Mundo • Milhões de afetados • 600.000-850.000 mortes/ano • A principal causa de hospitalizações infantis associadas a diarréias • Estudos de soroprevalência mostram que há a presença de anticorpos a partir dos 3 anos de idade.

17. Mecanismos da diarréia • Diarréia aquosa devido a alta excreção de fluidos nos intestinos • Ativação de nervos entéricos com possível papel de enterotoxinas

18. Aspectos clínicos • Desidratação: Contribui para a alta taxa de mortalidade. • Mal-absorção secundária de lactose e gorduras sendo que a diarréia crônica pode se estabelecer.

19. Diagnóstico • Detecção do antígenos nas fezes: ELISA (para o Grupo A); • Microscopia eletrônica para os rotavírus do grupo não –A; • Sorologia e eletroferotipos para estudos epidemiológicos

20. Tratamento e Prevenção • Tratamento- Reidratação oral ou venosa de suporte • Prevenção- Lavagem de mãos e desinfecção de superfícies.

21. Primeira Vacina • Vacina viva tetravalente de um rearranjo viral símio-humano (Rotashield) • Licenciada para uso em Agosto de 1998 • Retirada do mercado em outubro de 1999 devidos a riscos de intussuspeção

22. VACINA ATUAL • RotaRix (GlaxoSmithKline), Licenciada no Brasil em 2005. • Vacina monovalente, de origem humana, com a combinação P[8]G1. • Confere proteção de 88% para os casos graves de gastroenterite por rotavírus G1. • Também apresentou elevados níveis de proteção contra os demais sorotipos circulantes, de aproximadamente 83%, inclusive contra o sorotipo G9, emergente em escala global

23. CALICIVÍRUS HUMANOS

24. Família:Caliciviridae Genoma: RNA simples fita + Não envelopados 27-35 nm de diâmetro Contém um único capsídeo proteico CALICIVIRUS HUMANOS(HuCV)

25. CALICIVIRUS HUMANOS • Análise gênica divide-os em 4 grupos • Os calicivírus humanos pertencem a 2 gêneros: Norovírus e Sapovírus

26. Gênero NV (Norovirus) Norovírus Desert Storm Virus Southampton Virus Snow Mountain Agent Hawaii Virus Toronto Virus Bristol Virus Jena Virus Gênero SLV (Sapovírus) VirusSapporo Virus Manchester Houston/86 London/92 CLASSIFICAÇÃO DOS HuCV

27. 32 depressões em forma de cálice Aparência de “Estrela de Davi” em microscopia eletrônica Exemplo: Vírus Sapporo Morfologia típica de um HuCV

28. Superfície lisa “Small Round Structured viruses” Ex:- Norovírus Morfologia atípica de um HuCV (SRSV)

29. SRSV- NOROVÍRUS

30. Genoma • (+) ss RNA, 7900 nt • 3 “Open Reading Frames”: • ORF1= proteínas não estruturais- RdRp + helicase • ORF2= proteína estrutural de capsídeo • ORF3= proteína pequena de função não conhecida ORF1 ORF2 ORF3 hel cap ? 5’ RdRp 3’

31. Sintomas clínicos • Diarréia não sanguinolenta (mais em adultos) • Náusea • Vômito (mais em crianças) • Cólicas abdominais • Mal estar • Mialgia • Dor de cabeça • Febre baixa • Sintomas duram de 12 a 60 horas.

32. Transmissão • Fecal-Oral • Tipicamente águas contaminadas • Principais fontes de contaminação : • água de consumopobrementetratadas • poços artesianos • lagoas recreacionais • piscinas • Água servida em cruzeiros marítimos • Alimentos manipulados por pessoas infectadas ou labados em água contaminada • Frutos do mar

33. Prevenção e Controle • Altamente estável no ambiente- • resistente a: • Congelamento • Aquecimento até 60ºC • Desinfecção com cloro • Condições acídicas • Vinagre • Alcool • Altas concentrações de açúcar

34. Outros dados • A infecção leva à produção de IgG, IgA e IgM, mas os anticorpos não são protetivos. • A imunidade não é duradoura e nem protege contra reinfecções. Uma imunidade transiente dura uns 3-4 meses. • Não há vacina disponível. • Não há fármacos antivirais no mercado. • Prevenível por lavagem de mãos, boa higiene, uso adequado das fontes de águas, cuidado no preparo de alimentos.

35. Diagnóstico- Calicivírus em geral • Espécimens clínicos fezes, vômito, swabs ambientais • Imunomicroscopia eletrônica • RT-PCR • Sorologia para fins epidemiológicos

36. ASTROVÍRUS HUMANOS

37. Astrovírus • Família Astroviridae • 1975: primeiro registro em humanos • 28 nm ∅ • Não-envelopado • Genoma: molécula única de • RNA fita simples de 7kb, • com polaridade positiva, • extremidade 3’ com poli(A) • Oito sorotipos • Aparência em ME de uma estrela de 5 ou 6 pontas com bordas lisas

38. Astrovírus • Replicação viral ocorre no citoplasma da célula infectada • ORF1a: protease • ORF1b: RNA polimerase • ORF2: proteínas do capsídeo, cuja maturação é dependente de tripsina e uma outra protease da célula hospedeira

39. ASTROVIRUS – Epidemiologia e Sintomas • Mundo todo • Maioria são crianças <7 anos. • Transmissão pessoa-pessoa pela via fecal-oral • Epidemias ocorrem devido a contaminação de águas, alimentos e rutos do mar. • Período de incubação de 1-4 dias • Náusea, vômito, cólicas abdominais e diarréia aquosa • Sintomas gerais como febre, mal-estar e dor de cabeça

40. ASTROVIRUS - Diagnóstico • Microscopia eletrônica • ELISA • RT-PCR