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Universidade Católica de Goiás

Universidade Católica de Goiás. Bandeamento cromossômico. Cláudio C. Silva, M.Sc. Estudo Cromossômico Coloração Convencional. Coloração Convencional. Incorporação de corante DNA-específico (Aceto-orceína, Giemsa, etc). Rápido, fácil e baixo custo

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Presentation Transcript

  1. Universidade Católica de Goiás Bandeamento cromossômico Cláudio C. Silva, M.Sc.

  2. Estudo CromossômicoColoração Convencional Coloração Convencional Incorporação de corante DNA-específico (Aceto-orceína, Giemsa, etc). • Rápido, fácil e baixo custo • Permite a contagem do número de cromossomos • Permite avaliar a qualidade dos preparados cromossômicos • Muito utilizado em dosimetria biológica

  3. Estudo CromossômicoPadrões de Bandeamento Bandeamento Cromossômico Tratamentos cromossômicos envolvendo desidratação, envelhecimento, desnaturação ou digestão enzimática seguida da incorporação de corante DNA-específico Formação de bandas claras e escuras ou coloridas, evidenciando estruturas de 1-10Mb

  4. Estudo CromossômicoPadrões de Bandeamento Importância do bandeamento • Pareamento cromossômico (cada par cromossômico apresenta um padrão distinto e bem característico de bandas). • Identificar alterações cromossômicas, permitindo detectar pequenas variações estruturais, como deleções, inversões, translocações, etc. • Localizar a região do cromossomo diretamente afetada. • Compreensão da evolução cariotípica entre as espécies. Cláudio C. Silva, M.Sc. UCG/BIO

  5. Estudo CromossômicoPadrões de Bandeamento Método GTG – Bandeamento G combinado com Tripsina e Giemsa (Dretz & Shaw, 1971) • Obtido após diversos pré-tratamentos (soluções salinas, aquecimentos 60oC, digestão proteolítica – tripsina) seguido de coloração com Giemsa • Promove a formação de bandas claras (Bandas G negativas) e bandas escuras (Bandas G positivas) • Utilização de microscopia de luz convencional • Preparações permanentes

  6. Estudo CromossômicoPadrões de Bandeamento Método GTG – Bandeamento G combinado com Tripsina e Giemsa (Dretz & Shaw, 1971)

  7. Estudo CromossômicoPadrões de Bandeamento

  8. Estudo CromossômicoPadrões de Bandeamento Padrão de Bandeamento G Baixa Resolução – 400 bandas (regiões e bandas) Alta resolução – 850 bandas (regiões, bandas e sub-bandas) Altíssima resolução – 2.000 bandas (regiões, bandas, sub-bandas e sub-sub-bandas)

  9. Bandas G negativas (Claras) Bandas G positivas (Escuras) Proporção AT/GC baixa Proporção AT/GC alta Rica em seqüências repetitivas (500.000 – 1.000.000 de cópias por núcleo) Rica em seqüências repetitivas (100.000 cópias por núcleo) Regiões ricas em genes transcritos, sujeitos a quebras Regiões com menos genes importantes Regiões mais sensíveis a ação da DNAase I Regiões menos sensíveis a ação da DNAase I Alta acetilação de H4 Baixa acetilação de H4 Alta freqüência de quiasmas Baixa freqüência de quiasmas Estudo CromossômicoPadrões de Bandeamento

  10. Estudo CromossômicoPadrões de Bandeamento

  11. Cromossomos do grupo A (1, 2 e 3) 1 3 2 2 3 1 Cláudio C. Silva, M.Sc. BIO2040

  12. Cromossomos do grupo B (4 e 5) 1 B4 3 2 2 B5 3 B4 1 B5 Cláudio C. Silva, M.Sc. BIO2040

  13. Cromossomos do grupo D (13, 14 e 15) D14 D13 D13 D15 D14 Cláudio C. Silva, M.Sc. BIO2040 D15

  14. Cromossomos do grupo E (16, 17 e 18) D14 D13 E17 D13 E16 E18 E17 E18 D15 D14 E16 Cláudio C. Silva, M.Sc. BIO2040 D15

  15. Cromossomos do grupo F (19 e 20) F20 F20 F19 F19 Cláudio C. Silva, M.Sc. BIO2040

  16. Cromossomos do grupo G (21, 22 e Y) F20 F20 G21 G21 G22 F19 F19 Y G22 Cláudio C. Silva, M.Sc. BIO2040

  17. Cromossomos do grupo C (6, 7, 8 e 9) C8 C7 C6 C8 C6 C9 C7 Cláudio C. Silva, M.Sc. BIO2040 C9

  18. Cromossomos do grupo C (10, 11, 12 e X) C11 X C11 C10 C12 C12 C10 Cláudio C. Silva, M.Sc. BIO2040

  19. F20 F20 1 C11 X 3 B4 C8 2 C11 D14 G21 C10 G21 2 C12 G22 E17 C12 C7 F19 D13 B5 D13 C8 C6 C6 C10 F19 C9 E16 Y E18 3 D15 E18 E17 1 B4 C7 B5 G22 E16 D14 C9 D15 Cláudio C. Silva, M.Sc. BIO2040

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