Dr. José Víctor Calderón Salinas

1. Dr. José Víctor Calderón Salinas Departamento de Bioquímica Centro de Investigación y de Estudios Avanzados IPN (CINVESTAV)

2. Instituciones: Departamento de Bioquímica, CINVESTAV Facultad de Medicina, UAC-Torreón Coah. Departamento de Psicología, ISCYTAC Facultad de Medicina, UNAM Instituto de Fisiología Celular, UNAM Instituto de Investigaciones Biomédicas, UNAM Centro Médico Nacional Siglo XXI, IMSS Centro Médico la Raza, IMSS Instituto Nacional de Pediatría, SSA Instituto Nacional de Nutrición, SSA CyATEC, León Gto. Profesionales en: Médicos, Químicos, Biólogos, Psicólogos, Investigadores en diversas áreas., estudiantes de licenciatura y posgrado. Gobiernos de los Estados y Diferentes empresas de la asociación de industrias procesadoras de plomo AC

3. Medicina Bioquímica Exposición a plomo en Torreón, Coah. Membranas Transporte Metabolismo Interacción metal-macromolécula Transporte de plomo Respuesta antioxidante Resolución de problemas de importancia social y laboral Tratamientos alternativos Búsqueda de indicadores de daño y de susceptibilidad Mecanismos bioquímicos de daño Mecanismos bioquímicos de defensa

4. Ocupacional Ambiental Industrias Primarias Metalúrgicas Población de riesgo Cercanía Familiares Población abierta Ambiente abierto Utensilios Industrias Secundarias Pinturas Acumuladores Metal-mecánicas Refinadoras Exposición a plomo

5. Grupos de estudio Niños expuestos cronicamente a plomo Torreón, Coah. Queretaro, Qro. Pachuca, Hgo. Ciudad de México. Edad 7 – 12 años (27.2 ug Pb/dl) Adultos expuestos ocupacionalmente a plomo Torreón, Coah. Leon, Gto. Pachuca, Hgo. Oaxaca, Oax. Ciudad de México. Edad 20 – 45 años (65.3 ug Pb/dl)

6. Reversible Irreversible Con alteración funcional Sin alteración funcional Covalente Electrostática Estereoespecífica Competitiva No competitiva Interacción de plomo con macromoléculas

7. Metabolitos nocivos Oxidantes ALA Hierro libre Hemo libre Zinc libre Aductos Proteínas DNA Modificación del metabolismo Dependiente de calcio Dependiente de zinc Otros divalentes

8. Riñón Nervioso central Nervioso periférico Hematológico Digestivo Hepático Daño a órganos y sistemas

9. Metabolitos nocivos Oxidantes ALA Hierro libre Hemo libre Zinc libre Aductos Proteínas DNA Modificación del metabolismo Dependiente de calcio Dependiente de zinc Otros divalentes

11. Tejido amortiguador Tejido de acumulación Pb en sangre Absorción Distribución y Redistribución Daño Excreción

12. Absorción de plomo Unidades relativas * * Daño fisiológico 5- 4- 3- 2- 1- 0- Neuromotor y neurológico * * * Niños no expuestos PbS PEL CMI CMII CIE Niños en la zona de exposición n=98, *P<0.05 Daño bioquímico

14. * * * 5- 4- 3- 2- 1- 0- * * * No expuestos Pb PEL CMI Pb PEL CMI SUSCEPTIBLES RESISTENTES Niños expuestos ambientalmente a plomo Menor daño bioquímico y fisiológico

15. Secuestro del Toxico en moléculas resistentes Entrada y Salida del Toxico Cambio en la concentracion de moléculas dañadas M M-T T T Metabolismo del Toxico M-Dañada T2 Aumento de la función o cambio de la función Daño a la función Corrección de la función o función alterna Función alterada

16. Hemoglobina Proteína de 10 kDa Hay proteínas que unen plomo

17. 1.0 - 0.5 - 0 - * ACTIVIDAD DE G6P-D No hay plomo libre + Pb +Pb +Prot 10 kDa

18. * Aumento de la proteína 2- 1- 0- * Hb Prot-10 kDa Hb Prot-10 kDa No expuestos SUSCEPTIBLES RESISTENTES Niños expuestos ambientalmente a plomo

19. PbS PbS PEL PEL Prot. 10 kDa Prot. 10 kDa Susceptible Resistente n = 15, P>0.05 Concentración de proteína de 10 kDa en el diagnóstico de la susceptibilidad

20. Evaluación de la evolución del tratamiento en pacientes expuestos ocupacionalmente a plomo

21. Valores de no expuestos * * * * * * * * Valores de no expuestos Calcio 1g/día Vit C 1g/día, Vit E 400U/día Valores de no expuestos n>43 *P<0.05 El tratamiento con antioxidantes resulta en menor oxidación y menor daño a proteínas, aun sin reducir la concentración de plomo en sangre Medidas higiénico dietéticas

22. Tratamiento quelante solo en pacientes con daño neurológico severo Reducción de mas del 50% de los coeficientes motores Reducción de mas del 50 % de potenciales evocados Convulsiones Franca alteración de la personalidad Txquelante administrado en el IMSS Penicilamina 150 mg/kg/día/5 días, cada 15 días/3 secuencias

23. Valores de no expuestos * * * * * * Valores de expuestos Valores de expuestos * * * * Valores de no expuestos * * Vit C 1g/día, Vit E 400U/día Quelante Valores de expuestos * * * * * Valores de no expuestos n>41 *P<0.05 El tratamiento con antioxidantes y quelantes resulta en menor oxidación y una disminución transitoria de la concentración de plomo en sangre y de la actividad de las enzimas

24. * * Tratamiento n = 41; n = 27, n = 23 *p < 0.05 Pacientes que no continuaron expuestos a plomo (No Cont Exp); pacientes que continuaron expuestos a plomo (Cont Exp) Tratamiento quelante con penicilamina 150 mg/kg/día/5 días, cada 15 días/3 secuencias Los pacientes continúan con el esquema de vitaminas

25. Valores de no expuestos * * * * * Con Antioxidantes Sin Antioxidantes Valores de expuestos Vit. C 1g/d + Vit D 400 U/d n = 41 n = 15 *p < 0.05 Quelante Tratamiento quelante con penicilamina 150 mg/kg/dia/5 dias, cada 15 dias/3 ciclos El tratamiento con antioxidantes y quelantes resulta en una recuperación de las actividades neuromotoras

26. Pb4 µM, 5 días Pb 4 µM, 5 días y trolox µM Control 5 días La incubación con plomo previene los cambios morfólogicos de los eritrocitos expuestos a plomo en condiciones in vitro

27. Tejido amortiguador Tejido de acumulación Pb en sangre Absorción Antioxidantes Distribución y Redistribución Daño Excreción

28. Valores de expuestos Las repeticiones del tratamiento quelante genera reducciones transitorias de la concentración de plomo en sangre Valores de no expuestos Vit C 1g/día, Vit E 400U/día Quelante Valores de expuestos 1 2 3 * 4 Valores de no expuestos n>6 *P<0.05

29. Diagnostico de Daño Renal Crónico Microalbuminuria (3 tomas independientes, con margen de una semana) Orina de 24 horas >30 mg/día Diagnóstico de Enfermedad Renal Crónica Albuminuria (3 tomas independientes, con margen de una semana) Orina de 24 horas >300 mg/día

30. Proteinuria y albuminuria en pacientes expuestos a plomo Proteínas en orina (mg/día) Albumina en orina (mg/día) La exposición a plomo incrementa el daño renal * * 600 - 300 - 0 - • 60 • - 30 • - 0 No expuestos No expuestos Expuestos Expuestos n>16 *P<0.05

31. Incidencia de enfermedad renal crónica (ERC) y de Daño Renal Crónico (DRC) en pacientes expuestos a plomo La exposición a plomo incrementa la incidencia de daño renal n>325

32. Proteinuria en pacientes expuestos a plomo Proteínas en orina (mg/día) El tratamiento quelante incrementa el daño renal * ** 600 - 300 - 0 - *** No expuestos Expuestos con Tx quelante Expuestos con Tx quelante y Antioxidantes Expuestos sin Tx quelante y con Antioxidantes n>16 *P<0.05

33. Microalbuminuria en pacientes expuestos a plomo Albumina en orina (mg/día) El tratamiento quelante incrementa el daño renal * ** *** 60 - 30 - 0 - No expuestos Expuestos con Tx quelante Expuestos con Tx quelante y Antioxidantes Expuestos sin Tx quelante y con Antioxidantes n>16 *P<0.05

34. Microalbuminuria en pacientes expuestos a plomo Albumina en orina (mg/día) El tratamiento antioxidante reduce el daño renal * 60 - 30 - 0 - ** No expuestos Expuestos antes del Tx antioxidante Expuestos después del Tx antioxidante n>16 *P<0.05

35. Cuerpo de inclusión Núcleo Proteínas asociadas en los cuerpos de inclusión Cuerpos de inclusión en células de corteza renal de ratas intoxicadas con plomo. Microscopía electrónica de transmisión.

36. inmunodetección Sin Plomo a b c d e f g Con Plomo Proteínas renales de los cuerpos de inclusión que unen plomo 28.8 kDa 16.8 kDa 9.1 kDa Las muestras de riñón se homogenizaron (a) y se trataron con EDTA 0.5% 2.5 horas a 37ºC. Posteriormente se dializaron (b) y se incubaron con 0.339 (c), 0.678 (d), 1.356 (e), 3.39 (f) y 6.78 (g) µM de plomo.

37. Concentración relativa de PCI en trabajadores intoxicados con plomo * 2- 1- 0- * Orina No expuestos Expuestos a plomo Suero No expuestos Expuestos a plomo n>52 *P<0.05

38. Presencia de proteína de cuerpos de inclusión PCI en la orina de pacientes expuestos a plomo La exposición a plomo incrementa la presencia de PCI en orina n>79 *P<0.05

39. Concentración relativa de PCI en pacientes con Daño Renal Crónico (DRC) ** ** * Mayor concentración * 2- 1- 0- Orina No expuestos s/DRC c/DRC Suero No expuestos s/DRC c/DRC Expuestos a plomo Expuestos a plomo n>9 *P<0.05

40. Presencia de proteínas de cuerpos de inclusión (PCI) en Pacientes con daño renal crónico La presencia de PCI se asocia con daño renal

41. Concentración de albumina en orina de pacientes intoxicados con plomo y con altas concentraciones de PCI

42. Medicina Bioquímica Mecanismos bioquímicos de daño Mecanismos bioquímicos de defensa Resolución de problemas de importancia social y laboral Tratamientos alternativos Búsqueda de indicadores de daño y de susceptibilidad

43. jcalder@cinvestav.mx Laboratorio de Bioquímica Médica Departamento de Bioquímica Centro de Investigación y de Estudios Avanzados (CINVESTAV)