BIO1540 Lab 5 Méiose

1. BIO1540 Lab 5 Méiose

2. Objectifs • Observer et identifier les phases de la méiose chez différentes espèces animales et végétales: • Méiose chez Ascaris • Microsporogenèse du Lys sur des lames préparées • Spermatogenèse dans les testicules de rat et ovogenèse dans l’ovaire de lapin. • Capturer des images numériques des échantillons et produire un dessin biologique à partir de ces photos

3. Méiose Division cellulaire réductrice Cellule diploïde (2n) Interphase préméiotique Duplication des chromosomes Cellule tétraploïde(4n) Séparation des chromosomeshomologues Prémière division (2n) Séparation des chromatides Seconde division cellules haploïdes (n)

4. I- Méiose chez les plantes Microsporogenèse chez Lilium (lys): • Formation des gamètes males (pollen) dans les anthères • Identifier les phases de la méiose en utilisant des lames préparées • Pour revue, visitez le site : http://www.iasprr.org/old/iasprr-pix/lily/male.shtml

5. La méiose chez les plantes pa f anthère pc e tapetum Méiosedans les anthères de Lillium (early prophase): e: epiderme; f: filament; pa: parenchyme; pc: précurseur de cellule pollénique Sacs pollénique(microsporangia)

6. II- Méiose chez les animaux Méiose chez ascaris:

7. Ascaris: Exemples de stades Entrée du spermatozoïde Ovocyte primaire arrêté en prophase 1 (pas de chorion) L’entrée du spermatozoïde (sp) induit la reprise de la méiose dans le noyau (n) de l’ovocyte sp n

8. Ascaris: Exemples de stades Métaphase I Présence d’un chorion (C) Chromosomes sont alignés sur la plaque équatoriale. Pas de globule polaire Pronucléus mâle (p) est visible s p C ch

9. Ascaris: Exemples de stades Anaphase I Les Chromosomes homologues se séparent et se déplacent vers les pôles opposés du fuseau

10. Ascaris: Exemples de stades Metaphase II Semblable à la métaphase I mais présence d’un globule polaire (gp) dans l’espace périvitellin (ep) ps pb

11. Ascaris: Exemples de stades Anaphase II Les centromères se divisent et les chromatides se séparent, puis se déplacent vers les pôles opposés du fuseau.

12. Ascaris: Exemples de stades Interphase Suit la télophase II. Les pronucléus mâle et femelle (pn) sont en interphase avant la fusion (fécondation). 2ème globule polaire expulsé (pas visible ici) Le zygote (2n) qui en résulte continuera à se diviser par la mitose. pn

13. Ascaris: Exemples de stades Divisions mitotiques de l’embryon

14. Méiose chez les mammifères • Gamétogenèse dans le testicule de rat et ovaire de lapin. • Une de ces deux espèces vous sera assignée pour votre rapport • Observez les deux espèces (matériel pour l’examen de laboratoire) BIO1140 Introduction to Cell Biology

15. Spermatogenèse chez le rat (Rattusnorvegicus) • Se déroule à l’intérieur des tubules séminifères. • La position des cellules reflète leur état de maturation (cellules immatures près de l’extérieur du tubule, matures près de la lumière). • Visitez http://w3.ouhsc.edu/histology/ pour plus de détails (en anglais, appelez votre démonstrateur si vous avez des problèmes dus à la langue)

16. sc bl ps st sg ss sp L bl: membrane basale, L: lumière du tube, sc: noyau des cellules de sertoli, sg: spermatogonie, ps:spermatocyte de premier ordre, ss: spermatocyte de second ordre, sp: spermatozoides; st: spermatides

17. Ovogenèse chez le lapin (Sylvilagusfloridanus) Reconnaissez les follicules selon leur position dans l’ovaire, le nombre de couches de cellules folliculaires entourant l’ovocyte, la présence de cavité(s) remplie(s) de liquide à l’intérieur du follicule. Visitezhttp://w3.ouhsc.edu/histology pour plus de détails (en anglaisuniquement)

18. Follicules primordiaux Follicules primordiaux (fp) situés juste sous l’épithélium ovarien (ep). L’ovocyte est entouré d’une seule couche de cellules folliculaires squameuses (plates). ic: cellules interstitielles. pf ic ep

19. Follicule primaire unilaminaire Situé plus profondément dans l’ovaire Entouré d’une seule couche de cellules folliculaires cuboïdes (fc) Contient un ovocyte primaire (po) n: pronucléus de l’ovocyte po n fc

20. Follicule en croissance (primaire multilaminaire) Retrouvé un peu plus en profondeur dans l’ovaire Entouré de plus d’une couche de cellules folliculaires (cf) Contient un ovocyte de premier ordre (pointillés) n: pronucléus de l’ovocyte fc n

21. Follicule mature (« de Graaf ») Les plus grands follicules Nombreuses couches de cellules folliculaires (cf) Présence d’une ou plusieurs cavité(s) remplie(s) de liquide (cfa) Contient un ovocyte de deuxième ordre (ov) arrêté en métaphase II (appelé ovocyte mature) Se rapproche de l’épithélium ovarien avant l’ovulation so fc fca

22. Rapport: 3 pages Page 1: Page de titre Page 2: Photo imprimée annotée Page 3: Dessin biologique Les pages 2+3 doivent contenir des annotations, une légende ET une barre d’échelle

23. Ovaire de lapin (Sylvilagusfloridanus) • Photo 1: Vue globale à l’objectif 10x montrant des follicules à différents stades de maturation (p.ex. Primordial et primaire) plus, si possible, l’epithélium ovarien. • Photo 2: Vue de détail à 40xde la photo à 10x qui montre un follicule unilaminaire ou multilaminaire.

24. Testicules de rat (Rattusnorvegicus) • Photo 1: Vue globale à 10x montrant plusieurs tubules séminifères. • Photo 2: Vue de détail à 40x de la photo ci-dessus montrant les différents types cellulaires situés entre la périphérie de la tubule et la lumière.

25. Rapport Lab5 Impression de la photo 1: Utilisez le modèle ‘template.ppt’ (disponible sur le site web) pour imprimer votre photo en niveau de gris. Ensuite, ajouter les annotations et la légende à l’ordinateur ou à la main. Dessin biologique (photo 2): Suivez les instructions du manuel de laboratoire. Souvenez-vous: Pas de hachures ni d’ombres. Tous les traits doivent être de même épaisseur.

26. Rapport Lab5 • Prenez les photos montrant les structures requises pour le rapport, puis appelez vos démonstrateurs pour qu’ils contrôlent le contenu des images et leur qualité • Ne quittez pas le laboratoire sans vous assurer que vous avez bien sauvegardé / envoyé par courriel les images nécessaires au rapport • La photo annotée ainsi que le dessin biologique doivent comporter des annotations, une légende et une barre d’échelle. • Les structures visibles sur les lames sont dans le fichier ‘Structures.pdf’ disponible sur le site web des labs.

27. Evaluation Lab5 Documents à votre disposition: • Liste des structures observables sur les échantillons (utiliser pour mettre les annotations sur votre dessin). • Fichier d’instructions pour le Lab 5. • Manuel de laboratoire (+annexe V) N’oubliez pas: • Note technique (15% du lab), inclut la qualité de vos photos. BIO1140 Introduction to Cell Biology

28. Examen final: Samedi29mars 2014 13-14h30 • Contactez le coordinateur immédiatement si vous avez un conflit d’horaire. • Les salles d’examen seront affichées sur le site web sous peu. • Matériel couvert: Contenu du manuel de laboratoire, expériences faites dans les laboratoires, spécimens observés, contenu des rapport de laboratoire. • Format: choix multiples et courtes réponse + identification de structures sur photos -similaire au questionnaires prélab.

29. Notes du lab5 et notes finales • Les rapports corrigés du lab5 seront disponibles dans environ 3 semaines (voir annonce sur site web). • Les heures de bureau des correcteurs sont affichées sur le site web (page contact) • Les notes finales des lab BIO1540 seront affichées sur le site web vers mi-avril. Contactez le coordonateur immédiatement si une de vos notes est incorrecte ou manquante.