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K-Cell 尿液標準化系統. 銳誠企業有限公司. 尿沈渣中所含之固形物質. 泌尿道上表皮剝落細胞 ---Epi. Cell, Renal Tubular Cell, etc. 循環血液細胞 ---WBC, RBC 圓柱體 (Cast) 微生物 (Microbial) 結晶體 (Crystal). 造成尿沈渣檢查發生誤差可能原因. 1. 檢體量不一致或不足 2. 尿太稀 ( 低張尿 ) 3. 尿不新鮮 4. 尿檢體混合不均 5. 離心後倒去上清液 , 上清液的殘留量不一致。 6. 沈澱物混合不均. 操作流程.
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K-Cell 尿液標準化系統 銳誠企業有限公司
尿沈渣中所含之固形物質 • 泌尿道上表皮剝落細胞---Epi. Cell, Renal Tubular Cell, etc. • 循環血液細胞---WBC, RBC • 圓柱體(Cast) • 微生物(Microbial) • 結晶體(Crystal)
造成尿沈渣檢查發生誤差可能原因 1.檢體量不一致或不足 2.尿太稀(低張尿) 3.尿不新鮮 4.尿檢體混合不均 5.離心後倒去上清液,上清液的殘留量不一致。 6.沈澱物混合不均
操作流程 • 將尿液垂直倒入離心管至10C.C.或12c.c.刻度,離心1500rpm,5分鐘。 • 將上清液垂直倒掉,切勿用甩。 • 用1C.C.吸管混合沉渣後,吸取少許,滴入計算盤,當擴充滿後,多餘之混合液直接會順著旁邊的凹槽被吸入。 • 在400/100倍的顯微鏡下觀察計數 • 發報告 Hpf (High Power Field) ml
定量沈渣離心管 • 原理:利用液體皆有表面張力之特性, 當尿液離心後垂直倒掉上清液,殘留底部小圓球之定量尿沈渣0.25ml,因表面張力之關係,不會隨上清液流出,而達到定量目的。 • 特點: 操作簡單,不須另加dropper。 定量精準。 透明度高,可直接看尿液顏色。
K-Cell 10格細胞計數盤 • 原理:利用氣擴式原理設計 • 盤面面積:63mm² • 盤面深度:0.1mm • 定量設計:6.3ul • 特點:擴散迅速 透光度高、 導流設計、不留殘尿,避免沾污顯微鏡 絕不會滲透至別格,報告正確。
規格 • 正方形體積 3mm x3mm x 0.1mm =0.9ul • 9個中正方形體積(雙分隔線) 0.9/9=0.1ul • 81個小正方形體積(單分隔線) 0.1/9=0.0111ul
參考範圍 RBC : 0~3 / Hpf WBC : 0~5 / Hpf Epithelial cell : Negative Cast : 0~2 / LPF Crystal : 0~3 / Hpf Fat : Negative Bacteria : 0~5 / Hpf Yeast : Negative
ml 發報告方法 • Tμl (1 μl尿液所含細胞數) =n / ( k * N * 40) • Tml (1 ml尿液所含細胞數) =n * 1000 / ( k * N * 40) n = 所有計數細胞總數 k = 0.01111 (小正方形體積) N = 所判讀小正方形總和 40 = 從10 C.C. 濃縮成0.25 C.C. 例: 在5個小正方形視野下得到之紅血球數目總數為20顆 • Tμl= 20 / ( 0.01111 * 5 * 40) = 9顆 • Tml = 20 * 1000 / (0.01111 *5 * 40 ) = 9000顆
Hpf(High Power Field)發報告方法 • 高倍鏡視野體積為0.0159μl 每一小正方形體積為0.0111 μl 約為1.6倍,因此若只計算小正方形數量 需乘以1.6才是真正Hpf報告 • 若將畫格當做Focus 而計算顯微鏡下視野細胞數,則不會影響Hpf結果 • 將五個視野所看到細胞總數除以五,即得Hpf報告
計數體液方法 • μl報告計算公式 小正方形下所得平均細胞數 X 90=細胞數/μl 90: n / ( k * N) = 1/(0.0111*1) 由於計算體液係採原液 不濃縮 故不需乘上濃縮倍數 例1: 在5個小正方形下計數細胞總和為6顆 1 μl=(6/5)*90=108顆 例2: 在9個小正方形下計數細胞總和為2顆 1 μl=(2/9)*90=20顆
當細胞濃度達到(++)~Numerous時,會有Overlapping之狀況,應如何判讀?當細胞濃度達到(++)~Numerous時,會有Overlapping之狀況,應如何判讀? • 等二分鐘後,讓細胞自然沈澱再判讀 • 加入醋酸Lysine • 加入Normal Saline稀釋
WBC • Correlation=0.965 • Positive No./Rate K-Cell = 26 (22%) KOVA = 21 (17.8%) *依醫檢會報88.6.15 14卷第二期 尿液沉渣標準化系統 KOVA與 K-Cell比較
RBC • Correlation=99.2 • Positive No. /Rate K-Cell=16/13.5% KOVA=12/10.2% *依醫檢會報88.6.15 14卷第二期 尿液沉渣標準化系統 KOVA與 K-Cell比較
RBC尿試紙假陰性發生原因 1.Vit.C 濃度太高(BM試紙不受影響)。 2. Nitrite太高(>10mg/dl 或 2.2mmol / L) 3.尿蛋白太高(>500mg/ dl) 4.PH<5.0 5.比重太高 6.尿防腐劑,如formalin
Hypochlorite solutions(漂白水) 強氧化劑 細菌的 peroxidases RBC尿試紙假陽性發生原因
WBC尿試紙假陽性發生原因 1.oxidizing detergents 2.Formalin 問:當試紙呈陽性,而沈渣看不到WBC? 最可能的原因是WBC已破裂崩解,因為試紙 測的是esterases,WBC雖破,該酵素仍留尿中,試紙可以檢測出來,但顯微鏡就看不到。
WBC尿試紙偽陰性發生原因 1.太早判讀(通常要2分鐘再判讀) 2.高濃度尿蛋白(>500mg/ dl) 3.高濃度尿糖(>3g/ dl) 4.高比重尿 5.尿防腐劑,如ascorbic acid 6.Oxalic acid 7.藥物干擾:如gentamicin,tetracycline,cephalexin,cephalothin