110 likes | 250 Views
Uus bakteriliik. “Actinobaculum massiliae”. Taavi Võsumaa, GT-II, 2004. Allikas. Journal of Clinical Microbiology “ Actinobaculum massiliae ,” a New Species Causing Chronic Urinary Tract Infection (Nov. 2002) Gilbert Greub, Didier Raoult http://jcm.asm.org/cgi/content/full/40/11/3938.
E N D
Uus bakteriliik “Actinobaculum massiliae” Taavi Võsumaa, GT-II, 2004
Allikas Journal of Clinical Microbiology • “Actinobaculum massiliae,” a New Species Causing Chronic Urinary Tract Infection (Nov. 2002) • Gilbert Greub, Didier Raoult • http://jcm.asm.org/cgi/content/full/40/11/3938
Perekonna ajalugu • Actinobaculum suis, mida algselt nimetati Eubacteriumsuis’ks, klassifitseeriti 1992 ümber Actinomycessuis’ks. 1997 pakkus Lawson et al. välja uue perekonna – Actinobaculum, kuhu hakkasid kuuluma A. suis ja A. schaalii; nüüd ka A. massiliae.
Avastamine I • Uus Actinobaculumi liik isoleeriti korduva põiepõletikuga kõrgealise naise uriinist. • Kuuluvusele Actinobaculumi perekonda viitas fenotüübiline ning patoloogiline sarnasus A. suis’i ning A. schaalii’ga, mis põhjustavad tsüstiiti, aborti ning kroonilist püeliiti, nakatades erituselundkonda. • Kuuluvust kinnitas 16S rRNA 95% homoloogia A.suis’ga, 93% homoloogia A.schaalii’ga, mis koos geno- ja fenotüübilise sarnasusega viitab Actinobaculumi perekonnale, kuid samas eraldab perekonna teistest liikidest.
Isoleerimine • Bakter isoleeriti inokuleerides 10 mikronit keskvoolu uriini lamba vere agarile. • Inkubeeriti 72 tundi 5% CO2 atmosfääris 37 kraadi Celsiuse juures. • 5 päeva möödudes olid ilmnenud kaht erinevat kolooniatüüpi väiksed hallikad kolooniad.
Analüüs • Kasvutingimusi ja koloonia morfoloogiat uuriti Columbia lamba vere agaril ja shokolaadi agaril, eelpool mainitud tingimustes. • Lisaks katsetati kasvu anaeroobsetes tingimustes lamba vere agaril; anaeroobsust kontrolliti AnaerIndicator’i ribaga. • Liikuvust uuriti ripp-tilga meetodil. • Oksidaasne ja katalaasne aktiivsus tuvastati tavaprotseduuridega.
Analüüs II • Ülejäänuteks biokeemilisteks testideks kasutati tööstuslikke süsteeme: API 20Strep ja Api Coryone. • Rakukesta rasvhappelist koostis analüüsiti gaasikromatograafia abil. • DNA FastDNA kiti ja FastPrep “jahvataja” abil. • DNA amplifitseeriti Taq polümeraasi ja primerite fD1 ja rP2 abil. Tulemust kontrolliti geelelektroforeesiga 1% agaroosi geelil, värvituna etiidium bromiidiga. • DNA puhastamine ja sekveneerimine samuti kittidega.
Bakteri omadused • Kolooniad on kaht liiki, hallikad, mittehemolüütilised. • Bakter on liikumatu. • Ei ole happekindel. • Ei moodusta spoore. • Gram positiivne pulkbakter. • Fakultatiivselt anaeroobne (anaeroobsetes tingimustes kasvas aeglasemalt) • Katalaas puudub. • Ei hüdrolüüsi eskuliini ega zhelatiini.
Bakteri omadused II • Metaboliseerib glükoosi, maltoosi, riboosi, ksüloosi, trehhaloosi ja vähesel määral raffinoosi. • Ei metaboliseeri mannoosi, mannitooli, sorbitooli ja amidooni (keskkond ei muutunud happelisemaks). • Ei redutseeri nitraati nitritiks. • Pürasiinamidaasne ja glükosidaasne aktiivsus. • Inaktiivsused: aluseline fosfataas, B-glükuronidaas, B-galaktosidaas, N-Ac-B-Glükoosamidaas, ureaas, arginiini dihüdrolaas, leutsiini arüülamidaas.
Bakteri omadused III • Bakteri rakk sisaldas 41,5% C16:0; 24,2% C18:1 9Z; ning 8,7% C18:0 rasvhappeid.
Nimetamine • Nimi A. Massiliae tuleneb vanast Kreekas ja Roomas kasutatavast kohanimest Massilia – tänapäeva Marsielles, kus bakter eraldati.