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EVALUACIÓN DE LA CALIDAD DE LA LECHE MEDIANTE CITOMETRÍA DE FLUJO, PROVENIENTE DE BOVINOS DE LA PARROQUIA MACHACHI, PROVINCIA DE PICHINCHA. Departamento de Ciencias de la Vida Ingeniería en Biotecnología. Alison Mera R. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA.
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EVALUACIÓN DE LA CALIDAD DE LA LECHE MEDIANTE CITOMETRÍA DE FLUJO, PROVENIENTE DE BOVINOS DE LA PARROQUIA MACHACHI, PROVINCIA DE PICHINCHA. Departamento de Ciencias de la Vida Ingeniería en Biotecnología Alison Mera R.
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA • Proyecto de Evaluación Nacional de Lechería en Novillos (NAHMS, 1991) • Unión Europea en 1992, Directiva 92/46 (Giangiacomo, 2000).
OBJETIVO GENERAL • Evaluar la calidad de la leche mediante citometría de flujo, proveniente de bovinos de la parroquia Machachi, Provincia de Pichincha. OBJETIVOS ESPECÍFICOS • Evaluar la calidad de la leche recolectada por animal y en tanque de enfriamiento a través de la determinación de parámetros como: número de células somáticas, concentración bacteriana, grasa, proteína total, sólidos totales y sólidos no grasos. • Estimar la prevalencia de Brucella spp., mediante la técnica de Milk Ring Test y relacionar los resultados con el cultivo microbiano. • Evaluar los posibles factores de riesgo que influyen en la calidad de la leche mediante la aplicación de encuestas epidemiológicas.
Situación a nivel mundial y Ecuador INTRODUCCIÓN Criollo 43.48% Mestizo sin registro 31.23% Mestizo con registro 14.31% Holstein Freissan 7.83% Brown Swiss 1.73% Normando 0.84% Jersey 0.57% • Cantón Mejía con 220 666 L (Jánosi & Baltay, 2004). (O’Grady & Doherty, 2011)
Parámetros de calidad INTRODUCCIÓN (Pantoja et al., 2009) (Jánosi & Baltay, 2004).
INTRODUCCIÓN Brucelosis B. abortus: ganado y/o bisonte En América del Sur: prevalencia 0.1 y 20.3% (Lucero et al., 2008)- Argentina 25% en el ganado lechero (Samartino, 2002) Ecuador 4-10.62% (MAG-SESA, 2009) Problemas reproductivos, Abortos Disminución producción (Sutra et al., 1986) (Ibarra, 2008)
MATERIALES Y MÉTODOS Zona de Estudio N= 518 predios n = 34 haciendas 20% H. Grandes = 7 10% H. Medianas = 4 70% H. pequeñas = 23 Bovinos: 409 T. Enfriamiento: 12 Parroquia Machachi-Provincia de Pichincha
MATERIALES Y MÉTODOS Trabajo de Laboratorio Grasas, proteínas, ST, SNF Resultados TSI Citrato Fenilalanina Positivos Urea
MATERIALES Y MÉTODOS ANALISIS ESTADISTICO
RESULTADOS Y DISCUSIÓN PARÁMETROS: CÉLULAS SOMÁTICAS Descripción y categorización de los resultados de laboratorio, Machachi-Ecuador 2013. Análisis descriptivo de los resultados de las muestras tomadas en Machachi-Ecuador 2013. Jánosi & Baltay, (2004) SCC< 400 000 cel./mL Pavel & Gavan, (2011) SCC<100 000 cel./mL Fell et al., (2003) SCC >500 000 cel./mL mastitis bovina Bytyqi et al., (2010) Infecciones bacterianas hasta 1 000 000 cel./mL Rajčevičet al., (2003) 499 200 cél/mL Eslovenia Savadogo et al., (2004) SCC = 5 385 000 cel./mL, bovinos con problemas de higiene y salud
RESULTADOS Y DISCUSIÓN FACTORES DETERMINANTES DE CÉLULAS SOMÁTICAS 88.64% (378/409) >3 años 0.98% (4/409) 9.54% (39/409) 8.31% (35/421) Resultados del análisis de los factores de riesgo de las haciendas de Machachi-Ecuador 2013. Reichmuth, (1975) Presencia de más infecciones Dang & Anand, (2007) Falta de conocimiento de prácticas de higiene y calidad
RESULTADOS Y DISCUSIÓN PARÁMETROS: MATERIA GRASA Descripción y categorización de los resultados de laboratorio, Machachi-Ecuador 2013. Análisis descriptivo de los resultados de las muestras tomadas en Machachi-Ecuador 2013. Dang & Anand, (2007) 3.82-5.12% sistemas de ordeño en la India Rajčevič et al., (2003) estaciones del año, 4.16%, variabilidad menor
RESULTADOS Y DISCUSIÓN FACTORES DETERMINANTES DE LA MATERIA GRASA 36.92% (151/409): 19-27L/día 90.46% (370/409) 80.20% (375/421) Resultados del análisis de los factores de riesgo de las haciendas de Machachi-Ecuador 2013. Alvarez et al., (2009) composición y manejo nutricional Barbosa et al., (2013) fibra: y porcentaje de proteína suministrada
RESULTADOS Y DISCUSIÓN PARÁMETROS: PROTEÍNA Análisis descriptivo de los resultados de las muestras tomadas en Machachi-Ecuador 2013. Descripción y categorización de los resultados de laboratorio, Machachi-Ecuador 2013. FACTORES DETERMINANTES DE PROTEÍNAS Resultados del análisis de los factores de riesgo de las haciendas de Machachi-Ecuador 2013. Dang & Anand, (2007) sistemas de ordeño, 3.02-3.99% Rajčevič et al., (2003) condiciones climáticas, 3.41%, CV=12.02% Alvarezet al., (2009) Incremento proporcional de sus componentes producción disminuye Sharma et al., (2011) asociación con las células somáticas
RESULTADOS Y DISCUSIÓN PARÁMETRO: SÓLIDOS TOTALES Descripción y categorización de los resultados de laboratorio, Machachi-Ecuador 2013. Análisis descriptivo de los resultados de las muestras tomadas en Machachi-Ecuador 2013. Barbosa et al., (2013) IMI, promedio de 12.15% Alvarez et al., (2009) Calostro
FACTORES DETERMINANTES DE SÓLIDOS TOTALES RESULTADOS Y DISCUSIÓN 88.75% (363/409) 36.92% (151/409): 19-27 L/día 90.46% (370/409) 80.20% (335/421) Resultados del análisis de los factores de riesgo de las haciendas de Machachi-Ecuador 2013. Alvarez et al., 2009 períodos de preñez: progesterona y la prolactina (octava semana) Tamime, (2009): Disminuye los niveles de Na y Cl; Aumenta la síntesis de proteína, lactosa y la secreción de grasas; Cambios en el de transporte de Ig y otras proteínas no sintetizadas en la glándula
RESULTADOS Y DISCUSIÓN Análisis descriptivo de los resultados de las muestras tomadas en Machachi-Ecuador 2013. PARÁMETRO: SÓLIDOS NO GRASOS Descripción y categorización de los resultados de laboratorio, Machachi-Ecuador 2013. FACTORES DETERMINANTES DE SÓLIDOS NO GRASOS Resultados del análisis de los factores de riesgo de las haciendas de Machachi-Ecuador 2013. Barbosa et al., (2013) IMI de 9.13%
PARÁMETRO: BACTERIAS RESULTADOS Y DISCUSIÓN Descripción y categorización de los resultados de laboratorio, Machachi-Ecuador 2013. Análisis descriptivo de los resultados de las muestras tomadas en Machachi-Ecuador 2013. FACTORES DETERMINANTES DE BACTERIAS 9.54% (39/409) 8.31% (35/421) Resultados del análisis de los factores de riesgo de las haciendas de Machachi-Ecuador 2013. Tamine et al., (2009) Vehículo de transmisión de agentes patógenos Barbano et al., (2006) Bacterias psicrotrófas (Pseudomonas spp., Escherichia spp., Lactobacillus spp.)
RESULTADOS Y DISCUSIÓN PARÁMETROS DE CALIDAD SEGÚN TAMAÑO DE HACIENDA Resultados de los parámetros de calidad de la leche según el tamaño de la hacienda, Machachi-Ecuador, 2013.
TANQUES DE ENFRIAMIENTO RESULTADOS Y DISCUSIÓN Descripción general según la categorización de las muestras de los tanques de enfriamiento tomados en las haciendas de Machachi-Ecuador 2013. Barbosa et al., (2013) Sharma et al., (2011)
RESULTADOS Y DISCUSIÓN ANÁLISIS DE CORRESPONDENCIA MÚLTIPLE 1 2 3 4 Gráfico de correspondencia múltiple entre las variables de las muestras de las haciendas de Machachi-Ecuador 2013.
RESULTADOS Y DISCUSIÓN Prevalencia de Brucelosis Olmedo, (2010) Cultivo en el Cantón Mejía = 15% (9/60) Ibarra, (2008) MRT en las provincias Carchi/Imbabura/Sucumbios = 16.48% (15/91) Emmerzaal et al., (2002): Pasteurella multocida, Campilobacter spp., Salmonella urbana, Yersinia enterocolítica, Escherichia coli.
CONCLUSIONES • Al usar citometría de flujo y análisis por infrarrojo se pudo evaluar los parámetros de calidad de la leche, de los resultados se observa que dentro de la Norma INEN se encuentran el 87.04% SCC, 15.16% grasa, 90.22% proteína, 21.76% sólidos totales, 77.75% sólidos no grasos y 98.77% bacterias. • Al realizar las pruebas en las muestras de los tanques de enfriamiento se encontró dentro de la Norma INEN el 83.34% SCC, 83.33% grasas, 91.67% proteína, sólidos totales, sólidos no grasos y 100% bacterias. • El uso del MRT permitió calcular una prevalencia aparente de 16.62% (67/403), que no se pudo confirmar brucelosis mediante aislamiento, sólo se identificó mediante pruebas bioquímicas Escherichia coli y Pseudomona vulgaris.
CONCLUSIONES • Los factores de riesgo que influyen en la calidad de la leche sobre los parámetros: a) células somáticas: edad, el número de partos, suplemento y tamaño de la hacienda b) grasa: producción, suplemento y tamaño de la hacienda c) proteína: etapa de lactancia d) sólidos totales: presencia de abortos, producción, suplemento y tamaño de la hacienda e) sólidos no grasos: edad y número de partos f) bacterias: suplemento y tamaño de hacienda. • Mediante el análisis de correspondencia múltiple se encontró cuatro grupos de variables que presentaron mayor asociación entre ellas, lo que permite observar factores que pueden manipularse que se van a presentar juntos, determinando la calidad de la leche.
RECOMENDACIONES • Realizar un estudio en las zonas lecheras de la sierra, costa y oriente, aumentando el número de muestras, diferenciando a nivel de ubres, cuartos mamarios y tanques de enfriamiento, para poder implementar programas de control de calidad y enfermedades. • Se recomienda analizar los actuales parámetros de calidad, bajo los cuales se rige el Ecuador, y establecer una legislación para que los productos lácteos tengan mejores estándares de calidad. • Para confirmar la presencia de Brucellaspp., se deben utilizar otras técnicas de diagnóstico de alta sensibilidad y especificidad.