Grampozitivní koky

2. Grampozitivní koky • Č. Micrococcaceae • R: Micrococcus (M.luteus) • Kocuria (K.rosea) • Dermacoccus • R: Staphylococcus

3. Staphylococcus • Koaguláza pozitivní stafylokoky (KPS) • S.aureus, S.intermedius, S.hyicus • Koaguláza negativní stafylokoky (KNS) • S.epidermidis, S.warneri,S.chromogenes, S.sciurii,S.gallinarum, S.equorum

4. Rod Staphylococcus • Koaguláza pozitivní stafylokoky (KPS) koaguláza mění fibrinogen na fibrin Faktory virulence: • toxiny: hemolyziny, enterotoxiny, exfoliativní toxiny- stratum corneum, toxiny syndromu toxického šoku (TSST)-ničí endotel • pouzdro • Protein A • Hyaluronidáza- • Kys. Teichová- vazba fibronektinu • Lipázy • nukleázy • Koaguláza negativní stafylokoky (KNS)

5. Vysoká - peniciliny Častá – makrolidy a linkosamidy MRSA- methicilin rezistentní kmeny S.aureus Kmeny tvoří přidatné PBP (které nahrazují normální PBP) s nízkou afinitou k betalaktamovým antibiotikům gen je chromozomálně kódován Rezistence kmenů S.aureus a S.intermedius

6. Rod Streptococcus • Pyogenní hemolytické streptokoky nebo beta streptokoky • Ostatní streptokoky: S.suis, S.uberis, S.parauberis, S.equinus, S.pneumoniae

7. Definice nového druhu S.suis • S.suis byl popsán v r.1987 a validován v r. 1992 • S.suis se zřetelně odlišuje od pyogenních streptokoků • Hlavní hostitel: prase domácí • Příležitostní hostitelé: domácí zvířata • Habitat: tonzily, sliznice horních dýchadel • Zahrnuje kmeny patogenní i nepatogenní

8. Antigenní struktura S.suis: polysacharidy jako součást kapsuly • Původní označení odpovídalo skupinovým antigenům pyogenních streptokoků (R,S,T) a také enterokoků ( D ) • Později se označily jako typy 1 a 2, 1/2 • Nyní je známo 33 sérovarů (1-32) • Významné jsou však jen některé

9. Původní značení : R S T Nové značení: typ 2 typ 1 typ 15 Identita kapsulárních antigenů

10. Prase Sérovar 1 Sérovar1/2 Sérovar 2 Sévovar 3 Sérovar 4 Sérovar 7 Sérovar 8 Sérovar 9 Sérovar 16 Člověk Sérovar 2 Kapsula S.suis - klasické pouzdro: přehled patogenních sérovarů

11. Habitat (bydliště) kmenů S.suis v organismu prasete • Tonzily • Sliznice nosu • Sliznice genitálního ústrojí • Nosičství je běžné • Sající selata se kolonizují od matek • Ke kolonizaci kmeny sérovaru 2 dochází až ve 4 týdnů .

12. Etiologický význam S.suis: původce infekcí prasat a člověka • Patogenní kmeny vyvolávají streptokokovou infekci prasat: a) před odstavem b) po odstavu • Patogenní kmeny vyvolávají meningitidy nebo sepse člověka

13. Patogenní DNA homogenní Sérovary:1,2,7 Nepatogenní DNA nehomogenní Sérovary:ostatní Patogenní versus nepatogenní kmeny

14. Faktory patogenity a virulence • Kapsula • Adherence • Receptory pro vazbu na IgG a albuminy • Hemolyziny (suilysin) • Virulentní proteiny (MRP, EF, MRP*,EF*,) • Další proteiny (heat shock protein)

15. Diferenciace kmenů S.suis typ 2

16. Patogeneze meningitidy prasat • Získání infekce: přímý kontakt, inhalace • Kolonizace**: nasopharynx, oropharynx, tonzily a sliznice dýchadel • Průnik bariérami: mechanismus není znám • Šíření: krví - bakteriémie (obrana) • Cílový orgán: pleny mozkové (poškozením integrity kapilár), klouby

17. Anamnestické údaje • Náhlé úhyny • Příznaky postižení CNS • Endokarditidy • Artritidy • Historie infekcí S.suis v chovu • Nové stavební uspořádání haly

18. Kde je původce ? • Lokalizace: subarachnoidální prostor nebo leptomeningy, cerebrospinální mok • Krev • Dynamika výskytu mikroorganismu není jasná, počty bakterií jsou nízké • Post mortem přežívá krátkou dobu

19. Rod Enterococcus • Nové druhy popsány v posledních 10 letech • Výskyt vankomycinové rezistence u izolátů E.faecium a E.faecalis z drůbeže a prasat • VRE (vanokonycin rezistetntní enterococcus) - nozokomiální infekce člověka

20. Rod Lactococcus • Zahrnuje kulturní druhy • L.lactis • L.cremoris • L.rafinolactis

21. Další nově popsané rody. • Helococcus • H.ovis (ovce,skot, koně) Mastitis,endokarditis, abscesy • Gemella • G.cuniculi (abscesy králíka) • Globicatella • G.sanguinis (tele, ovce,

22. Grampozitivní tyčinky a koky tvořící endospóry • Aerobní : Bacillus • Anaerobní: Clostridium • Sporulace a germinace souvisí vždy s typem dýchání bakterie • Produkce toxinů u klostridií je optimální při sporulaci ve střevě

23. Endospóry bakterií • Struktura • Zajišťují extrémní rezistenci k teplotě, chemickým látkám, radiaci • Poskytují strategickou výhodu pro přežití a šíření • Toxinogenní endospóry tvořící bakterie : Bacillus spp. Clostridium spp.

24. Faktory odpovídající za sporulaci • Genetické vybavení (několik desítek genů) existuje množství mutant • Vlivy prostředí • Z jedné vegetativní buňky vzniká jedna spóra

25. Spící spóra • musí mít veškeré materiálové vybavení pro klíčení a růst • postrádá měřitelnou metabolickou aktivitu (kryptobióza)

26. Klíčící spóra - zvláštní stádium mezi spórou a vegetativní buňkou • aktivace ze spící spóry je reverzibilní proces (v laboratoři zahřátí na 60-65 C/10 minut) • aktivovaná spóra je stále rezistentní • klíčení je ireverzibilní - rezistence je ztracena ke stimulaci dochází (mechanicky - třepáním, chemicky: L -alanin, inhibice D-alaninem, glukóza, voda)

27. Klíčení spór • za příhodných podmínek prostředí je proces klíčení dokončen • syntéza RNA je zahájena za 2 minuty • v nevhodných podmínkách (absence nutričních faktorů) se proces zastaví nebo se mění na mikrocyklus

28. Hlavní problémy • Endospóry tvořící bakterie jsou velmi rozšířené v prostředí i potravinách • Snížení výskytu lze dosáhnout pouze tlumením přirozeného sporulačního cyklu

29. Desinfekční a sterilizační účinky na endospóry • Tekuté prostředky- chlorové preparáty, aldehydy • Plyny - ethylen oxid, formaldehyd • Záření: UV, gama

30. Rod Bacillus • Skupina B.cereus: • B.anthracis • B.cereus* • B.thuringiensis* • B.mycoides • B.pseudomycoides • Skupina B.subtilis

31. Bacillus anthracis • Léčba infekce: • 1. Antibiotiky: • člověk: ciprofloxacin( fluorochinolon) • zvířata: peniciliny (riziko rezistence) • 2. Specifickými antisérem: • člověk: omezeno • zvířata : běžné

32. Toxin B.anthracis

33. pXO1 tvorba složek toxinu léčba kmene při 42,5 C výsledkem je (kap+, tox-) *Pasteur bez imunitní ochrany pXO2 tvorba kapsuly novobiocin po 3 dny/37 C (kap-, tox+) ***Sternova vakcína produkce PA - protekční imunita Úloha plazmidů B.anthracis

34. Pouzdro - kapsula Toxin Jeho účinek: 1.vazba PA na membránu EB 2. PA je receptorem pro další dvě složky LF a EF Faktory virulence kmenů B.anthracis

35. Antrax u člověka • Formy onemocnění: • kožní • střevní • plicní • meningitida

36. Faktory patogenity a virulence B.cereus

37. Enterotoxigenní kmeny B.cereus jako možný původce průjmů zvířat • K infekci dochází kontaminovaným krmivem • Tvorba ET v tenkém střevě • Poškození enterocytů • Klinicky efektivní léčba antibiotiky volby • Bez léčby průjmy přetrvávájí • Jedná se o alimentární intoxikaci

38. Rod Clostridium -patogenní druhy jako původci onemocnění • Neurotoxigenní druhy: • C.botulinum - botulismus • C.tetani - tetanus • Histotoxické druhy: C.perfringens, C.chauvoei, C.novyi, C.septicum, C.sordelii…. • Enterotoxemické druhy: • C.perfringens - nekrotická enteritida • C.difficile - kolitis (člověk, kůň, pes) • C.pilliforme (Tyzerova choroba), C.colinum, C.spiriforme (Cu)

39. C.difficile • Výskyt v prostředí, střevo zvířat • Hostitel - mládě, dospělí během antibiotické léčby • Pes chronický průjem • Prase - selat 1- 7 den průjmy, vodnatý průjem, krvavý průjem • Kůň - hem. enteritis

40. C.difiicile- faktory virulence • Toxin A- enterotoix (letální pro křečka) • Toxin B –cytotoxin (letální) • Pili, pouzdro

41. Neurotoxiny

42. C.botulinum je špatně definovaný druh • Botulotoxin tvoří další druhy: C.baratii, C. butyricum • skutečné C. botulinum jsou asi proteolytické kmeny typu A,B, a F

43. C.perfingens je nejrozšířenějším anaerobním mikroorganismem • Habitat: půda, střevní trakt zvířat, faeces • Může pronikat do tkání rychle po úhynu a dát tak vznik chybným diagnózám • Organismus roste nejlépe v alkalickém prostředí (pH 8,0)

45. Výskyt C.perfringens u prasnic a v prostředí • Vyšší počty jsou obvykle na podlážkách než ve střevním obsahu prasnic • Bacilonosičství ve stádě je velmi individuální • Kontaminace prostředí souvisí s nízkou úrovní hygieny, ... • Prevence: čištění a desinfekce jalováren a poroden mezi skupinami prasnic a individuální mytí prasnic

46. C.perfringens produkuje edospóry • Primární funkce spor: přežití a rozšíření mikrobiálního druhu • Mikrobiální cirkulace Proces proces tvorby bakteriálních endospor a jejich návrat do vegetativní formy

47. Optimální podmínky pro sporulaci C.perfringens • Střevní obsah (anaerobiósa) • ** Současně dochází k produkci toxinů • Vysrážené sérum • Tvorbu spor inhibuje pH nižší než 6,6 • V případě průjmu jsou spory vylučovány ve velkých počtech • Spory jsou termorezistentní a mohou perzistovat nejméně rok v kontaminované stáji

48. Přirozená resistance k: aminoglycosidům (apramycin, neomycin, streptomycin, gentamicin) kolistinu fluorochinolonům (flumechin, enrofloxacin) Citlivost k: penicillinům makrolidům linkosamidům pleuromutilinům tetracyklinům bacitracin* virginiamycin* salinomycin* C.perfringens a antibiotika

49. Odpovědnost toxinotypů C.perfringens za enteritídy selat • Typ C hemoragická enteritis • Typ A nekrotická enteritis • Nový typ AX?.. Odpovídá za nekrotickou enteritis ??

50. C.perfringens typ C(etiologické agens známé velmi dobře) Beta1 toxin -trypsin sensitivní, letální a nekrotizující toxin -tvoří póry v buněčných membránách, které jsou selektivní pro kationty Na+, K+ : to je a typická funkce neurotoxinů beta2 toxin popsaný v r. 1997 alfa toxin lecitinása C (PLC), hemolysin delta toxin hemolysin