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H7N9的实验室检查与防护. 任超杰 2014.2.20. 主 要 内 容. H7N9的病原学特点 H7N9标本的采集、运送 H7N9实验室检查 H7N9的预防. 病原学特点. H7N9 型禽流感是一种新型禽流感,属正粘病毒科,甲型流感病毒属 。. 病原学特点.
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H7N9的实验室检查与防护 任超杰 2014.2.20
主 要 内 容 • H7N9的病原学特点 • H7N9标本的采集、运送 • H7N9实验室检查 • H7N9的预防
病原学特点 H7N9型禽流感是一种新型禽流感,属正粘病毒科,甲型流感病毒属。
病原学特点 H7N9是禽流感的一种亚型。流感病毒颗粒外膜由两型表面糖蛋白覆盖,一型为血细胞凝集素(即H),一型为神经氨酸酶(即N),H又分15个亚型,N分9个亚型。所有人类的流感病毒都可以引起禽类流感,但不是所有的禽流感病毒都可以引起人类流感,禽流感病毒中,H5、H7、H9可以传染给人,其中H5为高致病性。依据流感病毒特征可分为HxNx共135种亚型,H7N9亚型禽流感病毒是其中的一种,既往仅在禽间发现,未发现过人的感染情况。
抵抗力 H7N9病毒不耐热65℃,30分钟可被灭活。在室温下很快丧失传染性。0℃~4℃可存活数周,-70℃以下或冻干后可长期存活。在水中可存活1个月。 H7N9病毒对干燥、紫外线敏感。病毒在直射阳光下2天即可灭活,如果用紫外线可迅速将其灭活。因此,平时多晒太阳是预防禽流感最简单、有效的办法。 H7N9病毒对消毒剂也很敏感。如甲醛、乙醚、乙酸及其他常用消毒剂都能迅速迷惑其传染性。
标本的采集 采集的临床标本包括: 1、病人的上呼吸道标本(包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液) 2、下呼吸道标本(如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本) 3、血清标本等。 应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本,以前3天为佳(尤其是下呼吸道标本)和发病7天内急性期血清以及间隔2-4 周的恢复期血清。
标本的采集 鼻咽拭子采样方法 1、鼻拭子:将带有聚丙烯纤维头的鼻咽拭子轻轻插入鼻道内,轻轻转动鼻咽拭子,并向鼻腔内部推进至鼻腭处,停留片刻后缓慢转动退出,将拭子头浸入采样液中,尾部折断弃去。 2、咽拭子:用带有聚丙烯纤维头的鼻咽拭子用力擦拭双侧咽扁桃体及咽后壁,将拭子头浸入采样液中,尾部折断弃去。
标本的采集 采样时用干拭子采,不能蘸采样液,因为采样液中有抗菌素,防止过敏 采样液平时保存在-20℃或-70℃,采样前融化到4℃。 采样液颜色呈紫色时失效不能用了
标本的运送 新鲜的临床采集标本应在4℃条件下随样品送检单24小时内运送至市CDC流感检测实验室或有条件检测的实验室。未能24小时内送至实验室的,应置-70℃或以下保存;冻存的标本应在冻存条件下,低温送至实验室。
样本采集的防护 采样时应带口罩,穿隔离衣,带一次性手套及帽子。若在现场进行快速检测,应将现场用过的所有废物带回销毁。
实验室检查 一般检查 1.血常规。白细胞总数一般不高或降低。重症患者多有白细胞总数及淋巴细胞减少,并有血小板降低。 2.血生化检查。多有肌酸激酶、乳酸脱氢酶、天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶升高,C反应蛋白升高,肌红蛋白可升高。
实验室检查 显微镜的检查 电镜观察是快速诊断方法 用特异性抗体与标本或细胞培养物相互作用, 用离心沉渣进行免疫电镜观察,可提高检出率。 敏感性达50% 鼻咽拭子可制成图片固定与特异性抗体同孵育,然后用荧光标记的抗抗体在荧光显微镜下观察 敏感性大50%-90%。
实验室检查 抗原检测 直接检测临床标本或细胞培养物中的流感病毒抗原。 方法:IF EIA 动态连续免疫荧光法 抗原检测灵敏度好、特异性高,能在30分钟内完成,适合在各级医疗机构开展。
实验室检查 病原学检测 (1)核酸检测。对患者呼吸道标本(如鼻咽分泌物、口腔含漱液、气管吸出物或呼吸道上皮细胞)采用real time PCR检测到H7N9禽流感病毒核酸。
实验室检查 (2)病毒分离(诊断的黄金标准)。从患者呼吸道标本中分离H7N9禽流感病毒,可选用传代狗肾细胞、人胚肾或猴肾细胞,培养7-10天,进行鉴定与分型。
H7N9的预防 (一)尽量不去人多拥挤、空气不流通场所
H7N9的预防 (二)注意个人卫生,勤洗手,打喷嚏时注意遮掩口鼻,不随地吐痰 (三)不要自行宰杀家禽,避免接触和食用病死家禽。 (四)注意饮食卫生,加工。保存食品注意生熟分开,不吃生或半熟肉、蛋等食品,不购买未经检疫禽肉、猪肉品。
H7N9的预防 (五)保证充足睡眠,避免过度劳累,增强抵抗力