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DNA FINGERPRINTING

LLC Bologna - 2010. DNA FINGERPRINTING. LLC Bologna - 2014. GENETICA FORENSE. La genetica forense applica tecniche di biologia molecolare al fine di identificare un individuo a partire da una traccia biologica. 2. LLC Bologna - 2010. DNA utilizzato in questo esperimento.

yoshi
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DNA FINGERPRINTING

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Presentation Transcript

  1. LLC Bologna - 2010 DNA FINGERPRINTING

  2. LLC Bologna - 2014 GENETICA FORENSE La genetica forense applica tecniche di biologia molecolare al fine di identificare un individuo a partire da una traccia biologica. 2

  3. LLC Bologna - 2010 DNA utilizzato in questo esperimento

  4. LLC Bologna - 2010 Campioni di DNA da esaminare C DNA del “colpevole” rinvenuto sulla scena del crimine 1 DNA dell’ indiziato n° 1 2 DNA dell’ indiziato n° 2 3 DNA dell’ indiziato n° 3

  5. LLC Bologna - 2010

  6. LLC Bologna - 2010 Tecnica del DNA fingerprinting Digestione Elettroforesi Colorazione

  7. LLC Bologna - 2010 Digestione

  8. Enzimi di restrizione LLC Bologna - 2010

  9. LLC Bologna - 2010 Digestione

  10. LLC Bologna - 2010 Digestione

  11. LLC Bologna - 2010 Digestione

  12. . LLC Bologna - 2010 Preparazione Gel di agarosio

  13. LLC Bologna - 2010 Elettroforesi

  14. LLC Bologna - 2010 LOADING DYE • Glicerolo • Xilen-cianolo • Blu di bromofenolo

  15. LLC Bologna - 2010 Elettroforesi

  16. LLC Bologna - 2010 Caricamento

  17. LLC Bologna - 2010 Corsa elettroforetica

  18. LLC Bologna - 2010 Ordine di caricamento

  19. LLC Bologna - 2010 Colorazione

  20. LLC Bologna - 2010 Colorazione

  21. LLC Bologna - 2010 Osservazione del gel colorato al transilluminatore

  22. LLC Bologna - 2010 Colorazione - C 1 2 3 +

  23. LLC Bologna - 2010 Chi è il colpevole ? C 1 2 3

  24. LLC Bologna - 2010 Chi è il colpevole ? C 1 2 3 4

  25. LLC Bologna - 2010 Chi è il colpevole? C 1 2 3 C 1 2 3 C 1 2 3 C 1 2 3

  26. LLC Bologna - 2010

  27. LLC Bologna - 2014 Fonti di materiale biologico Sangue Liquido seminale Saliva Urina Capelli Denti Ossa Tessuti Sudore Feci Test generici per la valutazione della natura della traccia da eseguire prima di estrarre e quantificare il DNA ottenuto. 27

  28. LLC Bologna - 2014 Assetto cromosomi umani 31

  29. LLC Bologna - 2010 DNA: presente in ogni materiale cellulare che contiene un nucleo

  30. LLC Bologna - 2010 Cos’è la REAZIONE A CATENA DELLA POLIMERASI (PCR) e come funziona? Tecnica che permette di amplificare in modo selettivo SOLO UNA REGIONE del DNA Regione da amplificare Prodotto dell’amplificazione

  31. 4 = AATG LLC Bologna - 2014 Microsatelliti Short Tandem Repeat STR • Disperse in tutto il genoma • Ripetizione: 2-7 bp • Polimorfiche • Regioni non codificanti

  32. AATG AATG AATG AATG AATG AATG AATG AATG LLC Bologna - 2010 Tipizzazione individui CROMOSOMA PATERNO 4 ripetizioni CROMOSOMA MATERNO 4 ripetizioni

  33. LLC Bologna - 2010 Tipizzazione individui Gli amplificati hanno le stesse dimensioni 4

  34. 4 ripetizioni AATG AATG AATG AATG 3 ripetizioni AATG AATG AATG LLC Bologna - 2010 Tipizzazione individui CROMOSOMA PATERNO CROMOSOMA MATERNO

  35. 3 4 LLC Bologna - 2010 Tipizzazione individui Gli amplificati hanno dimensioni diverse

  36. ENFSI CODIS (7 loci) (13 loci) TH01 TH01 D21S11 D21S11 D18S51 D18S51 vWA vWA FGA FGA D8S1179 D8S1179 TPOX CSF1PO D16S539 D7S820 D13S317 D5S818 D3S1358 D3S1358 ENFSI (European Network of Forensic Science Institutes) CODIS (Combinated DNA Index System) della FBI. LLC Bologna - 2014 Marcatori STR utilizzati in ambito forense 39

  37. LLC Bologna - 2010 Esempio di Profilo Genetico

  38. LLC Bologna - 2010 PROFILO GENETICO • Se è completo, serve a IDENTIFICARE in maniera CERTA un individuo. • NON viola la PRIVACY GENETICA.

  39. LLC Bologna - 2012 Identificazioni storiche: Il mistero di Anastasia Romanov e di Anna Anderson L’esecuzione16 luglio 1918. La famiglia Romanov fu arrestata e condotta presso la casa di un mercante di Ekaterinburg dove tutti i suoi componenti furono brutalmente uccisi (insieme al medico, all’infermiera e a due domestici) dai soldati Bolscevichi e i corpi vennero sepolti in una località segreta. Febbraio 1920. Una donna tenta il suicidio lanciandosi nel Landwehr Canal a Berlino. Ricoverata presso l’ospedale psichiatrico Dalldorf, la donna non fu in grado di rivelare la propria identità se non dopo diciotto mesi, quando asserì di essere Anastasia, figlia dello Zar di Russia. In ospedale la donna era nota con il nome di Anna Anderson. Fin dal massacro della famiglia Romanov nel 1918, voci persistenti sostennero che alcuni membri della famiglia imperiale fossero sopravvissuti.

  40. Le prove Anna Anderson aveva lo stesso colore di capelli e occhi, la stessa altezza e caratteristiche particolari come un difetto in un dente, che la principessa Romanov aveva. Anastasia avrebbe potuto scampare alla brutalità dei soldati Bolscevichi? Il tribunale tedesco stabilì che Anna Anderson non fosse in grado di dimostrare di essere Anastasia Romanov. Iniziò quindi una serie di battaglie legali e giornalistiche tra i sostenitori e i detrattori della tesi Anastasia. Non si giunse mai ad una conferma o smentita definitiva sulla reale identità della donna che fu denunciata dai parenti imperiali come imbrogliona. Anna Anderson continuò a dichiararsi Anastasia Romanov fino alla sua morte nel 1984. LLC Bologna - 2012 Nel luglio 1991, furono riesumati, nei pressi di Ekaterinburg, i corpi di nove persone. La recente tecnica basata sull'analisi del DNA mitocondriale provò che si trattava dello zar, della zarina, di tre dei loro cinque figli e di altre quattro persone di servizio che risultavano effettivamente essere state uccise insieme ai membri della famiglia reale. La mancanza di due corpi, presumibilmente proprio quelli della granduchessa Anastasia o della granduchessa Maria e dello zarevič Alessio, riaprì la discussione sull'identità di Anna Anderson.

  41. http://ingredientesegreto.linxedizioni.it/2012/02/23/il-mistero-di-anastasia-romanov/http://ingredientesegreto.linxedizioni.it/2012/02/23/il-mistero-di-anastasia-romanov/ http://it.wikipedia.org/wiki/Anastasija_Nikolaevna_Romanova http://www.lollymagic.it/defaultxhtml/qs_Storie-e-racconti/id_9/Il+mistero+di+Anastasia+Romanov.html LLC Bologna - 2012 Solo nel 1994 fu possibile eseguire le analisi del DNA su un reperto bioptico del 1979, che portarono definitivamente a concludere che Anna Anderson non poteva in alcun modo essere imparentata con la famiglia Romanov, ma si trattava presumibilmente di una certa Franziska Schanzkowski, una malata di mente di origine polacca scomparsa da un ospedale psichiatrico di Berlino nel 1919 Nell‘agosto 2007, nella regione degli Urali furono ritrovati i corpi di due bambini, accanto ai quali vi erano pallottole e boccette di acido solforico (usato per occultare i cadaveri). Gli esami del DNA conclusi un anno dopo, hanno confermato che i resti rinvenuti sono quelli di Maria e di Aleksej. Ciò chiuderebbe così per sempre la possibilità che qualche membro della famiglia reale fosse riuscito a sfuggire al massacro di Ekaterinburg.

  42. LLC Bologna - 2014 45

  43. LLC Bologna - 2014 EFFETTO CSI 46

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