Contrôle de la croissance microbienne

1. Contrôle de la croissance microbienne

2. Classes d’Antimicrobiens • Les désinfectants • Produits visant à réduire d'au moins 5 puissances de 10 (99,999 %) les microorganismes et/ou virus présents sur des milieux inertes • Les antiseptiques • Produits visant à réduire d'au moins 5 puissances de 10 (99,999 %) les microorganismes et/ou virus présents sur les tissus vivants

3. Classes d’Antimicrobiens (suite) • Les drogues • Antibiotique ou Antibactérien • Contre les bactéries • Antifongique • Contre les champignons • Antiviraux • Contre les virus

4. Désinfectants et Antiseptiques • Caractéristiques idéales • Spectre d’action étendu • Puissant, faible quantité requise pour une efficacité élevée • Faible niveau de toxicité chez les humains • Pas corrosif • Stable • Hydrophilique et hydrophobique • Faible tension de surface • Sans odeur ou une odeur agréable

5. Savons/Détergents  • Antiseptique/Désinfectant • Hydrocarbones de sulfate ou de sodium • Amphipathiques • Émulsifiant/surfactant • Dissout membranes lipidiques

6. Les Drogues: Les Antibiotiques Définitions: • Littérale: Anti (contre) biotique (la vie ) • Ancienne déf.: Tout composé fabriqué par un microorganisme qui inhibe ou tue les bactéries • Nouvelle déf.: Tout composé qui inhibe ou tue les bactéries

7. Caractéristiques Désirées 1. Toxicité sélective élevée • Doit tuer ou inhiber l’organisme ciblé avec un minimum d’effets dérisoires sur l’hôte • Pénicilline: • Cible la parois cellulaire • Cyanure: • Cible transport d’e- des eucaryotes/procaryotes

8. Caractéristiques Désirées (suite) 2. Dose toxique élevée (DL50) • Concentration de l’agent auquel il est toxique pour l’hôte • Pénicilline • Cyanure 3. Dose thérapeutique faible (CMI ou CMB) • Concentration de l’agent nécessaire pour le traitement clinique d’une infection • Pénicilline • Sel de table

9. L’Indice Thérapeutique • Dose toxique/Dose thérapeutique • Désire un indice thérapeutique?

10. Spectre d’Action • Étroit: • Efficacité restreinte à certains types de microorganismes • Ex. Agit seulement contre les Gram - • Large: • Efficace contre une grande diversité de microorganismes • Ex. Agit sur les Gram + et -

11. Synthèse de la paroi Les ß-lactamines Synthèse d’ADN Les quinolones Synthèse d’ARN Les macrolides Synthèse des protéines Les aminoglycosides Les macrolides Les tétracyclines Chloramphénicol Cibles des Antibactériens Transcription Métabolisme A B Traduction

12. Compte viable # Compte direct Temps • Bactériostatique: • Inhibe croissance • Non-létale • Réversible • Bactériocide • Tue • Irréversible • Bactériolytique • Tue • Lyse cellulaire • Irréversible Mode d’Action

13. Les Bêta-Lactamines • Bactériolytiques • Inhibent synthèse de la paroi cellulaire • Agissent sur bactéries en croissance seulement! Pénicillines Monobactames Touspossèdentl’anneau de Bêta-lactamine Céphalosporines Carbapenems

14. Les Quinolones • Bactéricide • Inhibe la synthèse de l’ADN • Spectre large • Effets secondaires: • Troubles sévères gastro-intestinaux • Ex. Ciprofloxacin

15. Les Tétracyclines • Bactériostatique • Inhibe synthèse protéique • Spectre large • Effets secondaires: • Toxicité hépatique • Toxicité rénale • Déficience vitaminique

16. Les Macrolides • Bactériostatique • Inhibe synthèse protéique • Spectre étroit • Effets secondaires • Diarrhées • Dommages hépatiques • Ex. Érythromycine & Clarithromycine

17. Les Aminoglycosides • Bactéricide • Spectre étroit • Inhibe synthèse protéique • Haut niveau de toxicité • Effets secondaires: • Allergies • Dommages rénaux • Surdité • Ex. Gentamycine, streptomycine

18. Thérapies Antimicrobiennes • Empirique • L’organisme infectieux est inconnu • Antibiotique a spectre large préconisé • Définitive • L’organisme infectieux a été identifié • Une thérapie spécifique est choisie • Antibiotique à spectre étroit préconisé • Prophylactique ou préventive • Prévenir une infection initiale ou la réinfection

19. Essai de Diffusion de Disques de Kirby-Bauer • Gélose est inoculé avec la bactérie test • Disques imprégnés d’antibiotique sont placé sur la gélose • L’antibiotique diffuse dans le milieu créant un gradient • Suite à l’incubation les zones d’inhibitions sont mesurées • Les tailles des zones sont comparées à celles établies pour déterminer si l’organisme est susceptible ou résistant

20. Culture avec différentes concentrations d’antibiotique 100 50 25 12 6 3 0 Sous culture sans d’antibiotique • Concentration Minimale Bactéricide Détermination de l’EfficacitéCMI/CMB • Concentration Minimale Inhibitrice CMI=12μg/ml CMB=50μg/ml

21. + Gradient de concentration - Diamètres d’Inhibitions Vs Conc. 27mm = au CMI < 27mm = Conc. > CMI > 27mm = Conc. < CMI

22. E-test

23. La Susceptibilité In Vivo • La concentration in vivo n’est pas constante! • Influencer par la physiologie humaine • Une étendue de concentration est maintenue • (C1-C2) • La concentration au site d’infection doit être supérieure au CMI • Si <CMI = résistance

24. La Susceptibilité In Vivo • Pathogène sensible • CMI est plus bas que la plus faible conc. maintenue in vivo • Pathogène résistant • CMI est plus élevé que la conc. la plus élevée maintenue in vivo • Pathogène de sensibilité intermédiaire • CMI se situe entre la conc. la plus faible et la plus élevée maintenue in vivo • Combinaison d’antibiotiques préconisée

25. Exemple • Conc. in vivo d’antibiotique “A” = 5-40µg/ml • Donc: • CMI ≤ 5 µg/ml = sensible • CMI ≥ 40µg/ml = résistant • CMI entre 5 -40 µg/ml = susceptibilité intermédiaire

26. Temps de Réduction Décimal • Valeur D • Temps requis pour tuer 90% des microorganismes à une température donnée • Temps requis pour réduire la population d’un facteur 10 à une température donnée • Temps requis pour réduire la population d’un log10 à une température donnée

27. 1 log D 100 =12min 1 X 106 D 120 1 X 105 # Bactéries 1 X 104 1 X 103 5 10 15 20 25 30 35 40 Temps (min.)

28. Problème • À 75oC cela prend 18 min. pour réduire une population de microorganismes de 109 à 106 • qu’elle est la valeur D75 ? • 18 minutes pour passer de 109 à 106 • 3 log • 3 log = 3D75 • Donc 3D75 = 18minutes D75=6minutes