AGENDA PRESENTASI

2. Metabolism of polychlorinateddibenzo-p-dioxins by cytochrome P450BM-3 and it’s mutantWoro Triarsi Sulistyaningdyah1, Jun Ogawa1, Qing-Shan Li1, Raku Shinkyo2, ToshiyukiSakaki2,**, Kuniyo Inouye2, Rolf D. Schmid3 & Sakayu Shimizu1,*oleh :10507034 Martalia W. S10507037 Rini Hapsari 10507080 Emy Indriastuti Received 29 July 2004; Revisions requested 26 August 2004; Revisions received 15 October 2004; Accepted 15 October 2004

3. AGENDA PRESENTASI Pendahuluan Tujuan Hipotesis Metodologi Hasil Kesimpulan Implikasi

4. PENDAHULUAN Sitokrom P450 adalahenzim yang dapatlarutdalam air danterlibatpadaprosesmetabolis. Beberapacontohsitokrom P450 sebagaiberikut: Sitokrom P450cam (CYP101) dariPseudomonas putida Sitokrom P450 eryF (CYP107A1) dariactinomycete bacterium Saccharopolysporaerythraea Sitokrom P450 BM3 (CYP102A1) daribakteritanahBacillus megaterium

5. Pseudomonas putida Saccharopoldsdsysporaerythraea

6. Bacillus megaterium

7. Penggunaan CYP

8. PENDAHULUAN BIOREMEDIASI adalah penggunaan mikroorganisme untuk mengurangi polutan di lingkungan. JENIS-JENIS BIOREMEDIASI • Biostimulasi • Bioaugmentasi • Bioremediasiintrinsik

9. JURNAL

10. JURNAL Dilakukan bioremediasi pada PCDD (polychlorinated dibenzo-p-dioxins) oleh cytochrome P450 BM-3 dari Bacillus megaterium dan mutasinya, yaitu AL4V. EKSPERIMEN Produk yang dihasilkan terhidroksilasi pada posisi rantai yang tak bersubstituen, dan berkurangnya toksisitas 10% dari senyawa aslinya.

11. PCDD (polychlorinated dibenzo-p-dioxins)

12. TUJUAN EKSPERIMEN Membandingkan aktivitas cytochrome P450 BM-3 dengan AL4V sebagai dekompositor pada bioremediasi PCDD (polychlorinated dibenzo-p-dioxins)

13. HIPOTESIS Mutasi / rekombinan dari P-450 seharusnya menunjukkan aktivitas bioremediasi yang lebih tinggi dibanding senyawa aslinya

14. METODOLOGI 1.Preparasiwild-type sitokrom P450 BM-3 danmutanAL4V 2. Pengukuranaktivitaskatalitik wild-type sitokrom P450 BM-3 danmutan AL4V

15. Preparasi wild-type sitokrom P450 BM-3 danmutan AL4V

16. Pengukuranaktivitaskatalitik wild-type sitokrom P450 BM-3 danmutan AL4V • Larutan • 1-MCDD • Larutan • 2,3-DCDD • 2,3,7-triCDD • Larutan • 2,3,7,8-tetraCDD

17. Pengukuranaktivitaskatalitik wild-type sitokrom P450 BM-3 danmutan AL4V

18. Pengukuranaktivitaskatalitik wild-type sitokrom P450 BM-3 danmutan AL4V Sampeldielusikandengangradien linier 20-100% (v/v) asetonitrildalamlarutan yang terdiridari 0,01%TFA selama 25 menit, diikuti 100% aseonitrilselama 10 menit, dan 20% (v/v) asetonitrilselama 8 menit FR=1mL/menit λ = 227 nm Temperaturkolom = 40oC Konsentrasiakhir PCDDs

19. HASIL

20. HASIL

21. HASIL

22. KESIMPULAN Subtituen Klorida berbanding terbalik dengan aktivitas P450 Bakteri yang telah dimutasi (Al 4 V) dapat menjadi katalis dalam mendetoksifikasi tanah yang terkontaminasi PCDD. Aktivitas AL4V 2-12 kali lebih tinggi daripada WT sitokrom P450 BM-3 dalam hal mendekomposisi berbagai substrat yakni 1-MCDD, 2,3-DCDD, dan 2,3,7-triCDD

23. IMPLIKASI Bioremediasi Sebagaiaktivatorpadaclopidogrel

24. DAFTAR PUSTAKA http://www.springerlink.com/content/g24t81p273352646/ http://www.sciencedirect.com/science?_ob=ArticleURL&_udi=B6T21-4299Y2J-F&_user=3278845&_coverDate=02/09/2001&_rdoc=1&_fmt=high&_orig=search&_origin=search&_sort=d&_docanchor=&view=c&_acct=C000060167&_version=1&_urlVersion=0&_userid=3278845&md5=3d0d363ba6 http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/(SICI)1521-3765(20000502)6:9%3C1531::AID-CHEM1531%3E3.0.CO;2-D/pdf http://www.mdidea.com/products/herbextract/echinacea/data.html

25. Terimakasih..