Download
1 / 19
190 likes | 336 Views
Halak korai életszakaszára vonatkozó toxicitási teszt (OECD teszt: 210). Készítette: Sovány Márta. Tartalomjegyzék. A teszt célja A teszt alapelvei Validálás A tesztmódszer Az eljárás Statisztikai elemzésekhez felhasznált adatok Az eredmények kiértékelése
E N D
Halak korai életszakaszára vonatkozó toxicitási teszt(OECD teszt: 210) Készítette: Sovány Márta
Tartalomjegyzék • A teszt célja • A teszt alapelvei • Validálás • A tesztmódszer • Az eljárás • Statisztikai elemzésekhez felhasznált adatok • Az eredmények kiértékelése • A vizsgálati jelentés tartalmi követelményei
A teszt célja • A toxikus anyagok letális hatásainak vizsgálata az egyes fejlődési szakaszokban. • A vegyi anyagok egyéb halfajokra kifejtett hatásainak becslése. • A teszt alkalmas a vizsgálandó toxikus anyag kiértékelésére. • Az irányelv az Egyesült Királyság által lett előterjesztve és az OECD szakértői fogadták el.
A teszt alapelvei • A halak a korai életszakaszaikban különböző toxikus anyagok eltérő koncentrációinak vannak kitéve. • A letális hatások kiértékelése után az eredményeket összevetik a kontrollcsoport adataival. • Cél: NOEC, LOEC meghatározása NOEC: az a legnagyobb koncentráció amelynek még nincsen hatása LOEC: az a legkisebb koncentráció amelynek már van hatása
A teszt kivitelezését megelőző hasznos információk • Akut toxicitási teszt eredményei • A toxikus anyag vízoldahatósága, gőznyomása • Megbízható analitikai módszer a mennyiségi vizsgálatokhoz (pontosság, kimutatási határ) • A toxikus anyag szerkezeti képlete, stabilitása • pKa, Pow • Biológiai bonthatósági teszt eredményei
Validálás A teszt ideje alatt: • megfelelő oldott oxigén koncentráció (60-100% a levegő telítettségéhez képest) • megfelelő vízhőmérséklet • toxikus anyag koncentrációjának megfelelő értéken tartása (mérésekkel kell alátámasztani) • kontroll mintában teljes túlélés • diszpergálószer hatásának elhanyagolhatósága
A tesztmódszer (1) • Tesztkamra:anyaga-üveg, rozsdamentes acél vagy kémiailag semleges anyag, betelepítési arány megtartása, a tesztközegben véletlenszerű elhelyezés • Kezelés: vizsgált oldat átfolyásának biztosítása, áthelyezést levegővel való érintkezés nélkül kell megoldani
A teszt elvégzéséhez ajánlott édesvízi halfajok: • Szivárványos pisztráng • Zebradánió • Cselle • Medaka Tengeri faj: Tarka fogasponty A listától való eltéréseket minden esetben meg kell indokolni.
A tesztmódszer (3) • Tesztoldat: kívánt koncentráció értékek megtartása • Víz: vizsgálat ideje alatt állandó minőségű legyen és ne gyakoroljon hatást a teszt eredményeire (nehézfémek, anionok, kationok, peszticidek, összes szerves szén, szuszpendált szilárd anyag tartalom)
Az teszt követelményeinek megfelelő víz tulajdonságai az egyes kémiai anyagokra vonatkozóan
Az eljárás (1) • Expozíció: az alkalmazott hal fajtájával együtt változik a teszt időtartama • Betelepítés: véletlenszerű megoszlás, legalább két párhuzamos mérés, megfelelő betelepítési arány • Hőmérséklet: fajokhoz egyedileg alakított • Etetés: megfelelő minőség, mennyiség többlettakarmány eltávolítása
Az eljárás (2) • Vizsgált koncentrációk: öt különböző koncentráció tesztelése, kivéve határértékek meghatározásánál (diszpergáló szer<0,1 ml/l) • Kontroll: diszpergálószer hatásainak felmérése • Észrevételek: elpusztult egyedek eltávolítása, halál kritériumai különböznek az egyes szakaszokban, rendellenességek feljegyzése, tömeg, méret
Tesztkörülmények, időtartam és túlélési kritérium az ajánlott halfajokra
Statisztikai elemzésekhez felhasznált adatok • kumulált mortalitás • a vizsgálat végén az egészséges halak száma • a keltetés eleje és vége • a napokhoz tartozó kikelt egyedek száma • a túlélő állatok hossza és tömege • torz egyedek száma • rendellenes viselkedést mutató egyedek száma
Az eredmények kiértékelése Statisztikai összefüggések alkalmazása mind a : • kísérlettervezéshez • kísérletek kiértékeléséhez pl. a párhuzamos mérések varianciaanalízise A teszt nem tartalmaz konkrét útmutatót az alkalmazandó statisztikai módszerekre vonatkozóan.
A vizsgálati jelentés tartalmi követelményei (1) A toxikus anyag: fizikai jellege, fizikai-kémiai tulajdonságai Teszt fajok: • tudományos név, törzs, származás, a gyűjtés módja valamint az ezt követő kezelés • vizsgálati eljárás/módszer • nappali periódusok • párhuzamos tesztedények száma
A vizsgálati jelentés tartalmi követelményei (2) • a törzsoldatok készítésének módja, a vízcsere gyakorisága (ha van oldószert annak neve és koncentrációja) • a kísérleti koncentrációk, eszközök, a mért értékek és azok szórása • víz jellemzői (pH, keménység, oldott O2 koncentráció, összes szerves szén, sótartalom) • etetési információk
A vizsgálati jelentés tartalmi követelményei (3) Eredmények: • bizonyíték arra, hogy a kontroll mintában lévő egyedek megfeleltek a túlélési előírásoknak • a kísérlet napjainak száma, egyedek száma • az egyedek hossza, tömege • egyedek előfordulási valószínűsége • koncentráció-válasz görbék • NOEC, LOEC értékek
Források Teszt: http://lysander.sourceoecd.org/vl=11982194/cl=14/nw=1/rpsv/cgi-bin/fulltextew.pl?prpsv=/ij/oecdjournals/1607310x/v1n2/s11/p1.idx Képek forrásai: http://bss.sfsu.edu/holzman/courses/fall01%20projects/rainbow%20trout.htm (Szivárványos pisztráng) http://diszhal.info/english/cyprinds/en_Brachydanio_rerio.php (Zebradánió) http://denr.sd.gov/des/sw/wet.aspx (Cselle) http://hu.wikipedia.org/wiki/Makrahalalak%C3%BAak (Medaka)
