REINO FUNGI

1. REINO FUNGI

2. Los Hongos Imperfectos o Deuteromycota productores de Micotoxinas • Aspergillus • Fusarium • Alternaria • Penicillium

3. MICOTOXINAS Son metabolitos secundarios de origen fúngico, que causan efectos tóxicos en animales y el hombre cuando son incorporados por una vía natural Son CONTAMINANTES INEVITABLES de cereales y oleaginosas

4. Estructuras muy complejas de PM < 700 Gran estabilidad frente a agentes físicos y químicos Mismo hongo puede producir varias micotoxinas Zearalenona Tricotecenos Fusarium graminearum Acido tenuazónico Alternariol AAL toxinas Alternaria alternata Misma micotoxina puede ser producida por distintos géneros/especies fúngicos Ocratoxinas Aspergillus y Penicillium Fumonisinas Fusarium proliferatum y F. verticillioides

5. TENIENDO EN CUENTA:  La gran estabilidad de estos metabolitos  No todas las cepas de una especie reportada toxicogénica lo son  Su síntesis esta condicionada a varios parámetros: pH, Tº, aw, O2 , CO2 , luz/oscuridad LA PRESENCIA DE MOHOS EN UN ALIMENTO NO IMPLICA LA PRESENCIA DE MICOTOXINAS Y VICEVERSA

6. Residuos en tejido Residuos en leche Producto cárnico Producto lácteo Producto agrícola Infección fúngica Formación de Micotoxinas Consumo por animales Almacenamiento Procesamiento Consumo por el hombre MICOTOXICOSIS PRIMARIA Consumo por el hombre MICOTOXICOSIS SECUNDARIA

7. Efectos Tóxicos Dosis Altas : • daño hepático • daño renal • daño neurológico • daño hematológico • daño gastrointestinal LETALIDAD Dosis Bajas: • daño inmunológico • mala absorción de nutrientes • trastornos reproductivos • baja producción (de leche, huevos) • tumores malignos INFECCIONES PRODUCCION DEFICIENTE GRAVE RIESGO EN SALUD HUMANA

8. Aflatoxinas Aspergillus Ocratoxinas Aspergillus y Penicillium Zearalenona Tricotecenos Fumonisinas Fusarium Patulina Aspergillus y Penicillium

9. Toxinas producidas por las especies del Género Aspergillus Aflatoxinas Derivadas del núcleo Furano-Cumarina • Son contaminantes de: • Maiz • Maní • Leche • A.. flavus • A.. parasiticus • A.. nomius

10. Actuan como mutágenos al unirse a la guanina y generar un sitio apurínico (transversión a adenina) • Son hepatotóxicas y cancerígenas • Alrededor del 1% de la aflatoxina B1 consumida con el forraje es excretada en leche como M 1 • Tienen acción sinérgica con el virus de la hepatitis B, por lo que la reducción de la ingesta de estas toxinas disminuye la tasa de cáncer de hígado en individuos portadores del virus

11. Actuales límites sobre micotoxinas en Argentina Aflatoxinas Codigo Alimentario Argentino Mercosur

12. Toxinas producidas por las especies del Género Penicillium y Aspergillus Ocratoxinas Derivadas de Isocumarina y L-Fenilalanina Alimentos contaminados: • café • vino

13. Ocratoxina A *) Producida principalmente por P. verrucosum y P. carbonarius (uvas) y A. ochraceus, A. niger. *) Nefrotóxicas y Hepatotóxicas, Enterotóxicas y Teratógenas para animales. *) Se ha clasificado como posible carcinógeno para humanos. *) Mostos de uva y Vinos (principalmente tintos). *) Codex Alimentarius propone que el vino es la segunda fuente de exposición a las OTA después de los cereales.

14. Patulina Efectos congestivos (pulmones, riñon y bazo) Degeneración neuronas Alimentos contaminados: • manzanas • jugos El Codex alimentarius estableces como límite: 50 μg/kg de patulina en el zumo de manzana,

15. Toxinas producidas por especies del género Fusarium Zearalenona Tricotecenos Fumonisinas • Presentes en cereales pre y pos cosecha: maiz • En frutas durante la refrigeración: manzanas • F. graminearum • F. culmorum

16. Tricotecenos • Inmunosupresores • Inhiben la síntesis de proteínas Existen 45 compuestos de origen natural  DON y NIV son los más importantes Alimentos contaminados: • trigo • maíz

17. Fumonisinas Toxicidad variable según laespecie Ocurrencia natural: FB1- FB2 - FB3 • interfieren en el metabolismo de los esfingolípidos, • asociadas al cáncer esofágico humano y la leucoencefalomalacia equina y el edema pulmonar porcino. Alimentos contaminados: • maíz (a nivel mundial)

18. Zearalenona Estrogénica • Lactona del Acido Resorcílico • produce hiperestrogenismo y problemas reproductivos en el ganado y animales de experimentación. Alimentos contaminados: • trigo • maíz

19. Problematica en Argentina • Trigo y sus productos: Tricotecenos (DON), Zearalenona • Maiz y sus productos: Aflatoxinas, Fumonisinas, Tricotecenos, Zearalenona • Mani y sus productos: Aflatoxinas Leche: Aflatoxina M1 Jugo de manzana: Patulina Vino: Ocratoxina Basilico J.C., CASLAN, 2004

20. Análisis de Micotoxinas  Obtención de una muestra representativa del lote Muestreo  Separar la micotoxina de compuestos insolubles en la sc. de extracción EXTRACCION  Separar la micotoxina de compuestos acompañantes en el extracto CLEAN-UP Extracción líquido- líquido Columnas pre-empacadas con silica gel, Florisil, intrecambio iónico (SPE) Columnas de Inmunoafinidad

21. CONCENTRACION  Concentrar la micotoxina que está en bajas concentraciones SEPARACION DETECCION Y DETERMINACION  Separar los componentes remanentes del extracto. Detección y medida de la respuesta (TLC, HPLC, CG). TLC HPLC

22. ESTADO ACTUAL DE LA METODOLOGÍA DE ANALISIS TLC:TECNICA DE PREFERENCIA EN PAISES EN DESARROLLO ECONÓMICAS, RÁPIDAS Y PRÁCTICAS PERMITE LA MULTIDETECCION NO PERMITE LIMITES DE DETECCION MUY BAJOS HPLC NO SON RAPIDAS Y SON CARAS EN POCOS CASOS PERMITEN LA MULTIDETECCION MUY BUENAS PURIFICACIONES MUY BAJOS LIMITES DE DETECCION ELISA directo e indirecto:existen kits de detección especialmente usados para aflatoxinas y M1 en leche Columnas de inmuno-afinidad: por unión a anticuerpos específicos