1 / 14

INTERAÇÕES ANTÍGENO-ANTICORPO

INTERAÇÕES ANTÍGENO-ANTICORPO. Detecção, quantificação e caracterização dos anticorpos e seu uso como ferramenta para pesquisa e diagnóstico. INTERAÇÕES. Reações reversíveis . Ligações não covalentes: Pontes de hidrogênio Interações hidrofóbicas Interações de Van der Waals

berny
Download Presentation

INTERAÇÕES ANTÍGENO-ANTICORPO

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. INTERAÇÕES ANTÍGENO-ANTICORPO Detecção, quantificação e caracterização dos anticorpos e seu uso como ferramenta para pesquisa e diagnóstico

  2. INTERAÇÕES • Reações reversíveis. • Ligações não covalentes: • Pontes de hidrogênio • Interações hidrofóbicas • Interações de Van der Waals • Ligações iônicas

  3. MÉTODOS • Reagentes não marcados • Reação de precipitação • Reação de aglutinação • 2)Reagentes marcados • RIA • ELISA • Imunofluorescência • Western Blotting

  4. MÉTODOS • PRECIPITAÇÃO - Imunodifusão • AGLUTINAÇÃO - Aglutinação direta e indireta - Inibição da aglutinação - Teste de Coombs • IMUNOENSAIOS - RIA - ELISA - Imunofluorescência e Citometria de Fluxo • Western Blotting APLICAÇÕES - Pesquisa - Diagnóstico - Soroepidemiologia

  5. PRECIPITAÇÃO X AGLUTINAÇÃO • Precipitação: Formação de complexos Ag/Ac. • Aglutinação: É o agrupamento de partículas, usualmente por moléculas de Ac que se ligam a Ag na superfície de partículas adjacentes. • As reações de precipitação e de aglutinação decorrem, respectivamente da ligação entre o Ac e Ag solúvel e particulado.

  6. REAÇÕES DE AGLUTINAÇÃO • Ac + Ag multivalente particulado • Título: maior diluição que ainda causa aglutinação (semi-quantitativo) • Agregação visível de partículas = Eritrócitos, bactérias, fungos e látex

  7. Células ou partículas insolúveis + Ac = Aglutinação Exemplo: tipagem sanguínea em lâminas (sistema ABO) AGLUTINAÇÃO DIRETA 1) Amostra de sangue na placa teste: 2) Reagente (anticorpo anti A, B): 7

  8. AGLUTINAÇÃO DIRETA 4) Mistura-se: 3) Controle negativo: 8

  9. Um resultado positivo é indicado por uma aglutinação visível (aglomeração dos eritrócitos na placa teste), como ilustrado acima. negativo positivo AGLUTINAÇÃO DIRETA 5) Leitura do resultado: 9

  10. + Resultado negativo: (ausência de hCG na urina). Ocorre aglutinação, pois os anticorpos anti-hCG não são bloqueados na incubação inicial, porque não havia o hormônio na urina. Livres, podem aglutinar as partículas revestidas de hCG. Urina Soro anti - hCG Partículas revestidas com hCG Adicionam-se São incubados e colocados numa placa Resultado positivo: (presença de hCG na urina): não ocorre aglutinação. Ac se ligaram no hCG da urina, (ficando bloqueados), na incubação inicial INIBIÇÃO DA AGLUTINAÇÃO Exemplo: presença de hCG na urina (gravidez) 11

  11. TESTE DE COOMBS • Ac antiimunoglobulinas (Robert Coombs); • DHRN – mãe produz IgG anti-Rh; • Não aglutinam os eritrócitos; • Direto: Ac ligados aos eritrócitos fetais; • Indireto: Ac anti-Rh não aglutinantes no soro materno. • Permite detectar incompatibilidades Rh, prevenindo contra DHRN.

  12. IMUNOENSAIOS • Reagentes marcados (enzimas, fluorocromos, isótopos) • Tipos: • RIA • ELISA • IFA / CITOMETRIA DE FLUXO • WESTERN BLOTTING

  13. IMAGENS

More Related