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La verifica dei Claims funzionali: casistica e metodologie. Marina Elli a & Lorenzo Morelli a,b. a AAT-Advanced Analytical Technologies S.r.l. b Istituto di Microbiologia, UCSC. 1. La verifica dei Claims funzionali: casistica e metodologie. Introduzione e definizione di Claim
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La verifica dei Claims funzionali:casistica e metodologie Marina Elli a& Lorenzo Morelli a,b a AAT-Advanced Analytical Technologies S.r.l. b Istituto di Microbiologia, UCSC QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 1
La verifica dei Claims funzionali: casistica e metodologie • Introduzione e definizione di Claim • Health Claims e Unione Europea • Attuali riferimenti normativi per i probiotici • Tappe e metodi per supportare scientificamente i Claims funzionali • Informazioni funzionali in etichetta • Messaggi da ricordare e Conclusioni Struttura della presentazione QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 2
Definizione di Claim Riduzione del tasso di colesterolo “Alto contenuto in fibre” “Basso contenuto in grassi QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 3
Health Claims e Unione Europea QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 3
Health Claims e Unione Europea European Food Safety Authority Nutrition and Health Claims conference in Bologna, Italy, November 8-10 “….. to explain EFSA’s scientific role within the context of future EU legislation on nutrition and health claims. The emphasis of the conference will be on scientific substantiation of claims……” www.efsa.europa.eu/en/science/conferences/nhc_conference.html QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 6
La verifica dei Claims funzionali: casistica e metodologie • Definizione di Claim • Health Claims e Unione Europea • Attuali riferimenti normativi per i probiotici • Tappe e metodi per supportare scientificamente i Claims funzionali • Informazioni funzionali in etichetta • Messaggi da ricordare e Conclusioni Struttura della presentazione QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 7
Attuali riferimenti normativi per i probiotici Non esiste una legislazione specifica ma esistono linee guida internazionali e nazionali QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 9
Attuali riferimenti normativi per i probiotici Linee guida 2001 WHO FAO 2002 QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 10
Attuali riferimenti normativi per i probiotici LINEE GUIDA DEL MINISTERO DELLA SALUTE www.ministerosalute.it/alimenti/nutrizione CITTADINI NUTRIZIONE LINEE GUIDA PROBIOTICI QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 12
Come supportare i Claims funzionali A IDENTIFICAZIONE TASSONOMICA B DEPOSITO IN COLLEZIONE C BIOSICUREZZA D CARATTERIZZAZIONE IN VITRO E CARATTERIZZAZIONE IN VIVO SULL’ANIMALE F CARATTERIZZAZIONE IN VIVO SULL’UOMO VALIDAZIONE DEI CLAIMS FUNZIONALI QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
Come supportare i Claims funzionali – Identificazione tassonomica IDENTIFICAZIONE A LIVELLO DI SPECIE Sau 3A Hinf I ARDRA - Amplified Ribosomal Digestion Restriction Analysis Sau 3A Hinf I Sequenziamento del gene 16S rRNA A Probiotics, prebiotics & new foods - Rome, September 2/4, 2001 QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 16
Come supportare i Claims funzionali – Identificazione tassonomica IDENTIFICAZIONE A LIVELLO DI CEPPOPFGE - Pulsed Field Gel Electrophoresis Un esempio Identificazione di Streptococcus thermophilus nelle feci di individui alimentati con 2 yoghurt al giorno per 7 giorni (Elli et al. 2006, AEM) A Probiotics, prebiotics & new foods - Rome, September 2/4, 2001 QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 17
Come supportare i Claims funzionali – Identificazione tassonomica Un esempio Identificazione di un determinato ceppo batterico nelle feci di bambini sani alimentati con latte fermentato probiotico A IDENTIFICAZIONE A LIVELLO DI CEPPOREP-PCR – Repetitive Extragenic Palindromic Sequence Probiotics, prebiotics & new foods - Rome, September 2/4, 2001 QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 18
Come supportare i Claims funzionali – Deposito in collezione SAFE DEPOSIT Confidenzialità PATENT DEPOSITConfidenzialitàSicurezza B PUBLIC DEPOSITCatalogazioneDistribuzione Deposito presso una Collezione riconosciuta come IDA QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 20
Come supportare i Claims funzionali - Biosicurezza Determinazione dei livelli di antibiotico-resistenza dei ceppi probiotici e comparazione con i valori medi della specie www.aceart.net C QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 22
Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vitro Caratterizzazione funzionale in vitro Physico-chemical properties SURFACE CHARGE HYDROPHOBICITY SELF-AGGREGATIVE PHENOTYPE In-vitro resistanceGASTRIC JUICE PANCREATIC JUICE BILE In-vitro adhesion MUCUS GUT TISSUES D QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 24
Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vivo Caratterizzazione funzionale in vivo su modello animale E QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vivo • Beneficial effect of autoaggregating Lactobacillus crispatus on experimental induced colitis in mice • Castagliuolo et al. 2004 • FEMS Immunol Med Microbiol 43(2): 197-204 E QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vivo DISEGNO DELLO STUDIO • L. crispatus M247108 CFU • L. crispatus MU5 108 CFU 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 faeces faeces faeces E colonic tissue QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
E Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vivo Tracciabilità del singolo ceppo batterico mediante multiplex-PCR Probiotics, prebiotics & new foods - Rome, September 2/4, 2001 QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vivo E Total lactobacilli M247/mu5 from plates QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vivo Lactobacillus crispatus con capacità di revertire il danno istologico conseguente all’induzione della colite da DSS in modello murino QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vivo E QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 18
Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vivo Caratterizzazione funzionale in vivo sull’uomo F QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 17
Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vivo Lactobacillus crispatus and its non aggregating mutant in human colonization trials Cesena et al. 2001 J Dairy Sci 84, 1001-1010 F QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vivo Valutazione della capacità di L. crispatus di aderire alle linee cellulari coloniche Caco2 ed alla mucosa intestinale umana F QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vivo Le variazioni della microflora intestinale possono essere monitorate mediante Denaturing Gradient Gel Electrophoresis DGGE Valutazione degli effetti del trattamento prebiotico o probiotico sulla composizione della microflora fecale, vaginale, gastrica, orale, ecc. Profili individuo-specifici della microflora ottenuti a partire dal DNA batterico estratto dalle feci Satokari et al, 2001 F Probiotics, prebiotics & new foods - Rome, September 2/4, 2001 QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
Come supportare i Claims funzionali - Funzionalità in vivo ANALISI DEL PROFILO DELLA MICROFLORA INTESTINALEDGGE – Denaturing Gradient Gel Electrophoresis Controlli Trattati Un esempio Analisi della microflora fecale di suini dopo trattamento con prebiotico F QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
F “Design and evaluation of oligonucleotide-microarray method for the detection of human intestinal bacteria in fecal samples” FEMS Microbiology Letters. 2002. 213:175-182 • Impiego di sonde oligonuclotidiche disegnate sul 16S rDNA • - Marcatura con Cy-5 del 16S rDNA isolato dalle feci • - Ibridazione e detection degli ibridi QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
Informazioni funzionali in etichetta Linee guida del Ministero della Salute QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 2
La verifica dei Claims funzionali: casistica e metodologie Struttura della presentazione • Definizione di Claim • Health Claims e Unione Europea • Attuali riferimenti normativi per i probiotici • Tappe e metodi per supportare scientificamente i Claims funzionali • Informazioni funzionali in etichetta • Messaggi da ricordare e Conclusioni QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 2
Informazioni funzionali in etichetta FAO/WHO – 2001 • Indicazione chiara dell’identità del microorganismo: specie e/o ceppo • Indicazione della concentrazione di cellule batteriche vive alla fine della shelf-life • Dose consigliata per ottenere l’effetto probiotico • Chiara indicazione del Claim salutistico • Condizioni di conservazione • Contatti informativi per i consumatori FAO/WHO – 2002 • Indicazione chiara dell’identità del microorganismo: genere, specie e/o ceppo • Indicazione della concentrazione di cellule batteriche vive alla fine della shelf-life Altroconsumo n. 64 Ottobre 2006 QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
Messaggi da ricordare Scelta di un ceppo capace di stimolare il sistema immunitario intestinale Scelta di un ceppo capace di influenzare positivamente la microflora dell’intestino Selezione di un ceppo facile da produrre e da conservare, capace di persistere nell’intestino e di aderire al muco Come sviluppare un prodotto probiotico QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici
Messaggi da ricordare QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 21
Messaggi da ricordare www.gutimpact.net Specific Support Action Innovation and Impact of Gut Health Foods (GUTIMPACT ) QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 20
Grazie per l'attenzione!! QUALYFOOD 2°Dairy.it, non solo latte: i prodotti funzionali & pre/probiotici 19