Epithélium olfactif

1. Cortex orbitofrontal Bulbe olfactif Tractus olfactif latéral Cortex olfactif Epithélium olfactif 1. PRESENTATION DU MODELE Organisation générale du système olfactif (D’après A. Holley) Cellule mitrale Neurone sensoriel Vers les centres olfactifs secondaires Epithélium Olfactif Bulbe Olfactif Système nerveux central Système nerveux périphérique

2. Organisation anatomique et synaptique du bulbe olfactif Le bulbe olfactif (BO) • Paléocortex laminaire • Cellules relais: cellules mitrales • 2 niveaux de modulation de l’activité des cellules mitrales • Cellules périglomérulaires (CGl) • Cellules granulaires (CGr) BO Couche du nerf olfactif Couche glomérulaire Couche plexiforme externe Couche des cellules mitrales Couche plexiforme interne Couche granulaire

3. Flux rostral migratoire Gr ZSV Gl Neurogenèse bulbaire: Prolifération, Migration, Différentiation: de la ZSV au BO BO Néocortex Corps Calleux ZSV Cervelet Ventricule Latéral Deux couches du bulbe olfactif concernées par la neurogenèse: -la couche glomérulaire - la couche granulaire ZSV: Zone sous ventriculaire Gl: couche glomérulaire Gr: couche granulaire A Observer: coupes histologiques colorées en Crésyl Violet du bulbe olfactif

4. BO NC CC CV VL Localisation de la zone sous ventriculaire Ventricule Latéral A observer: marquage BrdU dans la zone sous ventriculaire, Lames 27 AV

5. Injection du marqueur de prolifération 6 heures 12 jours et plus 6 jours 2.MESURE DE LA NEUROGENESE: METHODES Evaluation de neurogenèse dans le bulbe olfactif par la méthode de la BrdU Prolifération Migration Différenciation Survie Cellules BrdU-positive dans la couche granulaire du BO

6. Méthode de comptage des cellules marquées par la BrdU Elaboration d’une maquette à partir des coupes histologiques ANIMAL 10 Coupe 1 Coupe 3 Coupe 2

7. 1 2 3 4 5 6 7 8 1 et 5: couche glomérulaire 2 et 6: couche plexiforme externe 3 et 7: couche granulaire 4 et 8: Zone sous ventriculaire Sur certaines maquettes, toutes les couches n’ont pas été tracées

8. 1 2 3 15 30 45 60 180jours post BrdU 3. EXPERIENCES ET OBSERVATIONS 3.1 Evaluation de la survie à long terme des cellules néoformées dans le bulbe olfactif et rôle des entrées sensorielles: principe de l’expérience Occ unilatérale BrdU Vérification de l’efficacité de l’occlusion de la narine par immunocytochimie de la Tyrosine Hydroxylase, enzyme de synthèse de la dopamine, qui ne s’exprime plus dans le bulbe olfactif en absence d’entrées sensorielles. occlus contrôle Observer -coupes histologiques portant révélation immunocytochmique du BrdU -maquettes correspondantes pour une série d’animaux sacrifiés à différents temps après l’administration de BrdU: 10 et 27: 15 jours 65et 72: 45 jours 48: 6 mois Utiliser les tableaux fournis qui indiquent pour chaque maquette le nombre de cellules comptées et la surface de la couche granulaire pour calculer la densité de cellules marquées et tracer la courbe de survie des cellules. Les régions grisées correspondent au côté du bulbe olfactif qui a été privé d’information sensorielle.

9. 18000 16000 14000 12000 * 10000 Number of BrdU positive cells * 8000 contrôles 6000 obturés 4000 2000 0 15 30 45 60 180 Evaluation de la survie à long terme des cellules néoformées dans le bulbe olfactif et rôle des entrées sensorielles Durée de vie limitée de la majorité des neurones néoformés Existence d’une période critique pendant laquelle la survie des cellules néoformées est sensible à l’entrée sensorielle