乙型肝炎病毒 Hepatitis B Virus

乙型肝炎病毒 Hepatitis B Virus

Geographic Distribution of Chronic HBV Infection HBsAg Prevalence 8% - High 2-7% - Intermediate <2% - Low

乙型病毒性肝炎（hepatitis B，HB) 是一种世界性的传染性疾病；我国是HBV感染的高发区：约有8%-12%的人群是乙型肝炎病毒HBsAg 携带者。

The discovery of the human HBV 1943 Krugman: infection of human volunteer 1963 Blumberg: identification of AuAg 1968 Prince: isolation of virus-like particles for EM 1970 Dane: describing Dane particles 1973 WHO: AuAg=HBsAg, Dane particles=virion 1973 Magnius: HBeAg and anti-HBe 1986 ICVC: Hepadnaviridae

一、生物学性状 • 形态与结构 • 基因结构与复制方式 • 抗原组成 • 动物模型与细胞培养 • 抵抗力

（一）HBV 形态与结构 • 大球形颗粒： Dane颗粒，具有感染性的HBV完整颗粒，双层衣壳，内含有病毒DNA和DNA多聚酶 • 小球形颗粒：HBsAg，由过剩的病毒外壳HBsAg组成 • 管型颗粒：由小球形颗粒串联而成

患者血清中的三种颗粒

Dane 颗粒(完整的病毒颗粒) 衣壳：外衣壳: HBsAg 内衣壳: HBcAg 核心：ds DNA DNA pol.

（二）基因结构与复制方式 HBV核酸 dsDNA 1、长链（long strain): 又称负链，长度固定，约含3200个核苷酸，有4个开放阅读框架(S、C、P、X区)； 2、短链（short strain): 又称正链，长度可变，约为长链长度50%~100%。

HBV基因组与蛋白表达 S 区：S基因编码HBsAg 前S1基因编码PreS1抗原前S2基因编码PreS2抗原 C区: C基因编码HBcAg 前C基因编码HBeAg P 区：DNA多聚酶 X 区：HBxAg

Reverse transcription P protein Capsid protein ER/IC e Golgi cap RNA pregenome RNA ccc-DNA Precore, L, M, S + X proteins HBV复制周期 ( ( (

生物合成 以负链DNA为模板，形成完整的环状双链，继而超螺旋化。 • 以负链DNA为模板，转录形成2种RNA (2.1kb， 3.5kb)。　 2.1kb RNA作为mRNA转译出外衣壳蛋白；3.5kb RNA转译出内衣壳蛋白，并作为HBV-DNA复制的模板，称为前基因组。 • 前基因组、蛋白引物、DNApol.进入组装好的病毒内衣壳。

以前基因组为模板，在DNApol.的作用下，逆转录出全长的HBV-DNA负链。前基因组被RNA酶水解，以新合成的负链DNA为模板，合成互补的正链DNA。由于病毒在装配并从感染细胞中释放时，病毒DNA分子的复制尚未完成，导致长短不一的正链形成。

（1）S区基因编码3种分子量不同的产物 Small protein： HBsAg Middle protein ： HBsAg+PreS2 Large protein： HBsAg+ PreS2 +PreS1 （三）基因编码产物和抗原组成 1、S区及其编码产物

（2） Small protein、 Middle protein、 Large protein共同装配成HBV的外衣壳，S区的编码产物过量产生，过剩的部分组装成小球形颗粒及管形颗粒。

（3）S区编码产物HBsAg，可以刺激机体产生保护性抗体（3）S区编码产物HBsAg，可以刺激机体产生保护性抗体抗-HBs，血清中出现抗-HBs意味着机体已产生了特异免疫力。

（4）S区编码产物在临床诊断、预防中的意义 HBsAgHBV感染的特异性标志。 PreS2蛋白具有比HBsAg更强的免疫原性。

2、C区基因及编码蛋白 （1）C区基因编码2种蛋白 HBcAg 和 HBeAg

（2）C区基因编码蛋白在临床诊断、防治中的意义（2）C区基因编码蛋白在临床诊断、防治中的意义 • HBeAg：可溶性蛋白，从受染细胞分泌入血，可作为 HBV复制及具有强感染性的指标。 • 抗-HBe: 有一定的保护作用，抗-HBe的出现是预后良好的征象。

HBcAg：病毒的内衣壳，与血清中蛋白相结合的形式存在，因此用血清学方法无法直接检 测。 • 抗-HBc：抗-HBc IgG在血中存在时间长，不是保护性抗体，抗-HBc IgM是HBV感染的重要指标。

（3）C区基因可发生点突变 • 对病毒而言：HBV可以逃逸机体针对HBeAg 的免疫杀伤作用； • 对抗HBV治疗而言：血清中HBeAg由阳性转为阴性并不意味着HBV复制的停止及致病作用减弱。

3．P区基因及编码蛋白 (1) P 基因编码 HBV DNA多聚酶（DNA pol.）， DNA多聚酶具有强大的逆转录酶（reverse transcriptase）活性，在HBV复制中起关键作用。 (2) 研究P基因的结构和功能，寻找抗DNA多聚酶的途径，可作为探索抗HBV治疗的新方法。

4．X区基因及编码蛋白 X基因编码X抗原（HBxAg ）：HBxAg 是一种有重要调控作用的蛋白，它与肝细胞癌的发生有密切关系。

（四）动物模型与细胞培养 • 黑猩猩是对HBV最敏感的动物，细胞培养尚未成功。 • 其他动物的肝炎病毒模型。如：鸭、土拨鼠和地松鼠。

Animal Models for Hepadnaviruses

（五）抵抗力 • 强，对低温、干燥、紫外线均有耐受性。 • 不能被70%乙醇灭活。

二、致病性与免疫性 • 传染源：患者或无症状HBsAg携带者，潜伏期为30-160天 • 传播途径：（1）血液、血制品传播（2）母婴传播（3）性接触传播

致病机制：直接损伤与免疫病理损害 • 病毒致机体免疫应答低下 • 病毒发生变异 • 细胞介导的免疫病理损伤 • 免疫复合物引起的病理损伤 • 自身免疫反应引起的病理损伤

三、病原生物学检查 1、乙型肝炎抗原和抗体检测：HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc 即（两对半）。

Symptoms anti-HBe HBeAg Total anti-HBc Titer anti-HBs IgM anti-HBc HBsAg 0 4 8 12 16 24 28 32 52 100 20 36 Acute Hepatitis B Virus Infection with Recovery Typical Serologic Course Weeks after Exposure

Progression to Chronic Hepatitis B Virus Infection Typical Serologic Course Acute (6 months) Chronic (Years) HBeAg anti-HBe HBsAg Total anti-HBc Titer IgM anti-HBc Years 0 4 8 16 20 24 28 36 12 32 52 Weeks after Exposure

HBV抗原抗体检测结果分析

2、血清HBV-DNA检测：核酸杂交法或PCR法，可考核药物疗效。2、血清HBV-DNA检测：核酸杂交法或PCR法，可考核药物疗效。 3、血清DNA多聚酶检测：判断体内是否有病毒复制。

四、防治 • 主动免疫： 1、第一代疫苗：乙肝HBsAg血源疫苗 2、第二代疫苗：基因工程疫苗 3、第三代疫苗： HBsAg多肽疫苗或HBV DNA核酸疫苗 • 被动免疫： • 严格筛选献血员

丙型肝炎病毒 Hepatitis C Virus HCV主要经血液或血制品传播，占输血后肝炎的80-90%，演变为慢性者多见，部分可发展为肝癌。

有包膜的+ss RNA病毒； • 基因组为一条单正链线状RNA，由9个基因区组成； • 细胞培养尚未成功。

C区和E1区编码结构蛋白； • 5’NCR序列保守性强，可用于基因检测诊断； • E1、E2/NS1区基因易发生变异，是HCV引起慢性肝炎的原因之一。

微生物学检查法 检查病毒RNA 检查抗体防治目前无疫苗，无有效治疗方法。

丁型肝炎病毒 hepatitis D virus • 缺陷病毒，必须在HBV或其他嗜肝DNA病毒辅助下才能复制； • 球形病毒，基因组为单负链环状RNA； • 由HBsAg构成外壳，内含HDV RNA、HDAg； • HDV感染常导致乙肝病毒感染者症状加重。

Geographic Distribution of HDV Infection Taiwan Pacific Islands HDV Prevalence High Intermediate Low Very Low No Data

The morphology of hepatitis D virus

乙型肝炎病毒 Hepatitis B Virus