沈珏 2013-9-13

1. 沈珏2013-9-13 DNA调控荧光金属纳米团簇及其在癌细胞检测上的应用

2. 摘要 以DNA为模板合成荧光银纳米团簇，并将其用于癌症细胞的体内外检测。体外检测以检测癌细胞中过量表达的miRNA或者其他标志性小分子；体内检测用Aptamer作为识别标记特异性识别癌症细胞并用于细胞成像。

3. 用巯基修饰的识别序列识别miRNA • 以C3序列（5’-CCCCAAAACCC-3’）为模板，以AgNO3为前驱体，NaBH4为还原剂，合成荧光银纳米团簇。DNA： AgNO3：NaBH4=1:6:6（DNA浓度为20 μM ，反应环境为20 mM，pH7.0，PBS）。激发波长为547 nm，发射波长为~617 nm。 • 方案一：设计与miR21互补的序列5’端巯基修饰的SH-MC22，并且通过巯基与银的共价作用，淬灭银纳米团簇的荧光来识别miRNA • 方案二：设计与MC22部分互补的序列5’端巯基修饰SH-MC10，由于miR21与MC22的互补序列更长，因此可以将MC10取代下来，使得SH-MC10的巯基变成自由巯基，淬灭银纳米团簇的荧光来识别miRNA 表1.实验中用到的序列

4. 方案一实验结果 （a） （b） （c） （d） 图1.（a）用SH-MC22（ssDNA）滴定AgNCs，在激发波长为547 nm时得到的发射波谱 （b）用SH-MC22滴定（ssDNA）AgNCs，发射波长在约618 nm处的荧光强度线性回归线 （c）用SH-MC22/miR21（DNA-RNA双链）滴定AgNCs，在激发波长为547 nm时得到的发射波谱 （d）用SH-MC22/miR21（DNA-RNA双链）滴定AgNCs，发射波长在约618 nm处的荧光强度线性回归线

5. 下一步工作计划 • 设计合适的序列，让荧光银纳米团簇能够进行细胞识别和检测 RET2probe 设计序列 Aptamer [1] Zhu G, Zheng J, Song E, et al. Self-assembled, aptamer-tethered DNA nanotrains for targeted transport of molecular drugs in cancer theranostics[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences, 2013, 110(20): 7998-8003. [2]Zhang P, Beck T, Tan W. Design of a molecular beacon DNA probe with two fluorophores[J]. Angewandte Chemie, 2001, 113(2): 416-419.

6. 下一步工作计划 • 用RCA（滚环复制）的方法延长链，使得荧光信号增强 [3]Wang Z G, Wilner O I, Willner I. Self-Assembly of Aptamer− Circular DNA Nanostructures for Controlled Biocatalysis[J]. Nano letters, 2009, 9(12): 4098-4102.

7. 下一步工作计划 [4] Deng Z, Tian Y, Lee S H, et al. DNA‐Encoded Self‐Assembly of Gold Nanoparticles into One‐Dimensional Arrays[J]. Angewandte Chemie, 2005, 117(23): 3648-3651.

8. Thank you！