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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS PÓS-GRADUAÇÃO EM MICROBIOLOGIA. Indicadores microbiológicos de Qualidade de água. Luciana Rocha Brandão Mestranda em Microbiologia/ ICB-UFMG. Indicadores de qualidade de água. Bactérias: Escherichia coli
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UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAISINSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICASPÓS-GRADUAÇÃO EM MICROBIOLOGIA Indicadores microbiológicos de Qualidade de água Luciana Rocha Brandão Mestranda em Microbiologia/ ICB-UFMG
Indicadores de qualidade de água • Bactérias: Escherichia coli • Protozoários: Cistos (Giardia) e oocistos (Cryptosporidium) • Algas: cianobactérias • Vírus • Ovos de helmintos
Grupo coliforme: totais e fecais Coliformes termotolerantes:E.coli Klebisiella Coliformes fecais: E.coli Grupo coliforme: coliformes totais e fecais • indicadores de escolha para monitorar qualidade da água; • Presença→ riscos à saúde → Salmonella, Shigella, Vibrio, Mycobacterium, Pasteurella, Leptospira e vírus entéricos • Fermentam lactose→ gás, ácido, aldeído à 35°C em 24-48h • gêneros: Citrobacter,Escherichia, Enterobacter e Klebsiella • Citrobacter, Enterobacter e Klebsiella: vegetação e solo
Coliformes fecais • Sub-grupo: coliformes totais→ Escherichia coli • Contaminação fecal oriundas de animais de sangue quente • Metodologia: temperatura de 44,5 +0.2°C, fator seletivo (termotolerantes) • Enzimas específicas Escherichia coli
Outros indicadores microbiológicos 1-Bactérias Heterotróficas • Bactérias que utilizam nutrientes orgânicos • A contagem de bactérias heterotróficas→ medida empírica; • presença em maior ou menor quantidade → grau de poluição da água → enriquecimento MO.
Outros indicadores microbiológicos 2-Estreptococcus fecais • Bioindicador referenciado na legislação CONAMA 274/2000 • Melhores indicadores para águas marinhas → Tolerância a altas concentrações de sal • Grupo Streptococcus fecais→ Streptococcus faecalis, S. faecium, S. galinarum e S. avium; • contaminação fecal humana X fezes outros animais
3-Pseudomonas aeruginosa • Solo, água, matéria orgânica em decomposição; • Microbiota do intestino e pele de seres humanos; • Patógeno oportunista - infecções auditivas em usuários de águas recreativas contaminadas - surtos de gatroenterites veiculadas por água - imunodeprimidos • capacidade de crescer em ambientes oligotróficos
4 - Staphylococcus aureus • Pele e mucosa (nariz, garganta) do homem: Diversas infecções • Não estão relacionados com contaminação fecal; • Sobrevivem mais tempo na água; • Ambientes aquáticos – intensa utilização para fins recreacionais - contagens de S. aureus
5- Leveduras • Indicadoras de poluição: ambientes de água doce, quanto marinhos; • número e espécie → tipo e pureza da água; • Ocorrência e distribuição→ presença de poluição orgânica; • complemento a contagem de coliformes; • Gêneros comuns: Aureobasidium, Candida, Cryptococcus, Rhodotorula, Saccharomyces e Trichosporon • Maioria associada a plantas, solos ou fontes de poluição orgânica
Lagos não poluídos (<10 UFC/100 ml) • Lagos mesotróficos ( 10 – 50 UFC/100 ml) • Águas – esgoto - seguras para recreação (50 – 100 UFC/100 ml) • Águas eutrofizadas (>100 UFC/100ml) (Hagler & Ahearn,1987)
Legislação Água potável: obedecer ao padrão de potabilidade, não oferecer riscos à saúde humana
Padrões de Balneabilidade determinados pelo CONAMA, através da Resolução nº 357, de 17 de março de 2005.
Metodologia Coleta: • Coletar a amostra em recipiente esterilizado; • Até 4/5 da capacidade do frasco; • Água com cloro: 0,1 ml de tiossulfato a 10%; • Água bruta que contenha metais pesados: 0,3 ml EDTA a 15%.
Contagem de Coliforme – técnica dos tubos múltiplos Amostra de água 1- Caldo lactosado 35/370C/ 24-48 h 2- Caldo Verde Brilhante e Bile 2% 35/370C/ 24-48 h 3- Caldo Ec 44,50C- 24 h 10 ml 0,1 ml 1 ml Água: três séries de cinco tubos
Fermentação: Caldo lactosado Confirmação: Caldo verde brilhante E.coli: fluorecência (UV)
Metodologia da Membrana Filtrante (MF) Filtragem da amostra
Substrato Cromogênico/fluorogênico Teste P/A Incubação por 24h.Resultados: Incolor:Negativo; Amarelo:Coliforme total +; Azul:Coliforme E. coli + Adição do meio com substrato à amostra
Teste Quantitativo 1 5 Mesmas placas amarelas submetidas a luz ultra-violeta (UV) Resultado Azul Ecoli Se (-) e amarelo C. Total 4 2 3 Tabelas de NMP Resultados em numeros/100 ml 6
Contagens de bactérias heterotróficas Ágar padrão para contagem (HPCA). Incubação: aerobiose por 24-48 horas a 350C Quantificação:UFC/ml (Greenberg et al., 1998) Diluições 1,0ml “Pour Plate” HPCA
STANDART METHODS FOR THE EXAMINATION OF WATER AND WASTEWATER.American Public Health Association (APHA) - 20th ed., Baltimore. Maryland. USA. 1998. • PORTARIA 518, de 25 de março de 2004, publicada no Diário Oficial da União. Agência Nacional de Vigilância Sanitária: Ministério da Saúde, Brasil. • RESOLUÇÂO CONAMA n° 357 de 17 de 17 de março de 2005