Laboratórna diagnostika chrípky

1. Laboratórna diagnostika chrípky Mgr. Edita Staroňová PhD.

2. Národné referenčné centrum • zriadené v roku 1990 MZ SR • vykonáva  nadstavbovú diagnostiku vírusu chrípky • izolačné metódy akreditované od roku 2007 • molekulárno-biologické metódy akreditované od roku 2010 • laboratórium akceptované WHO • člen siete EISN (European Influenza Surveillance Network) • zúčastňuje sa medzinárodných kontrol kvality práce

3. Čo je chrípka • akútne infekčné ochorenie vyvolané vírusmi chrípky typu A,B a C • vírus napáda respiračný systém • prenos kvapôčkovou infekciou • najrozšírenejším a najviac študovaným je vírus typu A • vírusy chrípky typu A sú rozdelené do viacerých podskupín – 2 povrchové antigény • hemaglutinín (HA) a neuraminidáza (NA) • A/H1N1, A/H3N2

4. Mutácie • vďaka charakteru svojej genetickej informácie je vírus chrípky nestabilný • pravidelne sa objavujú jeho nové varianty • výsledkom sú každoročné epidémie chrípky • 1. bodové mutácie HA a NA • 2. výmena segmentov genómu

5. Životný cyklus • naviazanie HA na bunkové receptory • uvoľnenie genetickej informácie vírusu do bunky • kopírovanie genetickej informácie vírusu • pučanie vírusu

6. Diagnostika Ideálnym materiálom na izoláciu alebo detekciu vírusu je výplach rôznych častí respiračného traktu, ale vhodný je aj nazofaryngeálny výter, ktorý sa robí na začiatku akútneho respiračného ochorenia (24-48 hodín po nastúpení prvých klinických prejavov). Na sérologické vyšetrenie sú potrebné 2 vzorky krvi, resp. 2 vzorky séra odobratév správnom časovom odstupe. Prvá počas akútneho štádia ochorenia a druhá v štádiu rekonvalescencie (2-3 týždne po odobratí prvej vzorky).

7. príjem vzorky ↓ delenie materiálu ↓ ↓ izolácia na bunkových kultúrach izolácia RNA ↓ ↓ hemaglutinácia 2-7 dní konvenčná RT-PCR + real-time RT-PCR ↓ ↓ ↓ ↓ pozit negat pozit negat ↓ ↓ UKONČENIE DO 1-2 DNÍ identifikácia II.pasáž ↓ hemaglutinácia 2-7 dní ↓ ↓ pozit negat ↓ identifikácia UKONČENIE DO 2-14 DNÍ

8. Situácia v SR, sezóna 2010-2011

9. Situácia v SR, sezóna 2010-2011

10. Nazofaryngeálne výtery • Celkový počet prijatých materiálov za SR: 2038 • Celkový počet pozitívnych materiálov za SR: 709 • vírus chrípky typu A/H1N1 (2009): 478 • vírus chrípky typu A (bližšie neurčené): 175 • vírus chrípky typu B: 56

11. Sérologia • Celkový počet prijatých dvojíc sér za SR: 1131 • Celkový počet pozitívnych materiálov za SR: 31 • vírus chrípky typu A/H1N1 (2009): 14 • vírus chrípky typu A (bližšie neurčené): 14 • vírus chrípky typu B: 2 • vírus chrípky typu A/H3 1

12. Ďakujem • vám • za pozornosť