150 likes | 768 Views
PEMBUATAN MEDIA DAN STERILISASI. LIA HIDAYATI 125100301111030 KELOMPOK 7. Pengertian. Sterilisasi adalah cara untuk mendapatkan suatu kondisi bebas mikroba atau proses yang dilakukan baik secara fisika, kimia,dan mekanik untuk membunuh semua bentuk kehidupan terutama mikroorganisme
E N D
PEMBUATAN MEDIA DAN STERILISASI LIA HIDAYATI 125100301111030 KELOMPOK 7
Pengertian • Sterilisasi adalah cara untuk mendapatkan suatu kondisi bebas mikroba atau proses yang dilakukan baik secara fisika, kimia,dan mekanik untuk membunuh semua bentuk kehidupan terutama mikroorganisme • Medium (media) adalah substansi yang terdiri atas campuran zat-zat makanan (nutrien) yang dipergunakan untuk pemeliharaan dan pertumbuhan mikroorganisme
Medium berdasarkanfungsinya • Medium umum: Medium yang ditambahkanbahan-bahan yang bertujuanmenstimulasipertumbuhanmikrobasecaraumum. • Medium khusus: Medium untukmenentukantipepertumbuahnmikrobadankemampuannyauntukkemampuannyauntukmengadakanperubahan-perubahankimiatertentumisalnya medium tetestebu. • Media diperkaya: Media yang ditambahkanbahan-bahantertentuuntukmenstimulasipertumbuhanmikroba yang diinginkan. • Media selektif: Media yang ditambahkanbahan-bahantertentu yang akanmenghambatpertumbuhanmikroba yang tidakdiinginkan yang adadalamsuatuspesimen
Media (lanjutkan) • Media diferensial: Media yang ditambahkanbahan-bahankimiaataureagensiatertentu yang menyebabkanmikroba yang tumbuhmemperlihatkanperubahan-perubahanspesifiksehinggadapatdibedakandenganjenislainnya • Medium penguji: Medium dengansusunantertentu yang digunakanuntukpengujiansenyawa-senyawatertentudenganbantuanbakteri. • Medium perhitunganjumlahmikroba: Medium spesifik yang digunakanuntukmenghitungjumlahmikrobadalamsuatubahan.
Alat dan Bahan Alat • Cawan petri • Plastik petromax • Kertas coklat • Karet • Autoklaf • Kompor • Tabung reaksi • Kapas Bahan • Alkohol • Aquades • Agar bacteriological
Sterilisasi Alat • Alatnya dibersihkan terlebih dahulu dengan alkohol • Lalu dilap dengan tisu/kapas • Dibungkus dengan kertas coklat • Di masukkan dalam plastik petromax • Diikat dengan karet • Disiapkan autoklaf dan isi air • Dipanaskan dengan kompor ditunggu hingga suhu 121,10C,
Sterilisasi Alat (Lanjutan) • Disiapkan autoklaf dan isi air • Dipanaskan dengan kompor ditunggu hingga suhu 121,10C, • Ditunggu 15 menit dengan suhu konstan. • Di dinginkan sampai suhu 00C
Pembuatan media agar • Ditimbang dengan berat 0,672 gram • Diberi Aquades mendidih 42ml • Dimasukkan gelas ukur lalu diaduk • Dipanaskan dengan hotplate • Di masukkan tabung reaksi 7ml • Ditutup dengan kapas • Di bungkus kertas cokelat • Di masukkan plastik petromax
Pembuatan media agar (lanjutan) • Diikat dengan karet • Di masukkan Autoclave • Dipanaskan dengan kompor • Ditunggu sampai suhu 121,10C • Ditunggu 15 menit • Dicatat Hasil
MetodologiPembuatan Media Agar • Siapkanalatdanbahan, lalupenimbangan agar bacterial, agar tersebutdimasukkangelas beaker danditambahkan air mendididh (aquades) 42ml. penambahan air mendidihiniberfungsiuntukmelarutkan agar. Kemudianpanaskan di atas hotplate. Pemanasaniniberfungsiuntukmenghomogenkanantara agar danaquades yang ditambahkan. • Padapembuatan media agar, setelahdiprosessterilisasididiamkanselama 24 jam dengantujuan agar bakteridapattumbuhpada medium yang cocok.
MetodologiSterilisasiAlat • Sebelummelakukanpraktikum, alat yang akandigunakanharusdilakukansterilisasiterlebihdahuludengantujuan agar mikroba-mikroba yang menempelpadaalattersebuthilang/mati, sehinggaalattersebutsterildantidakterkontaminasiolehmikroba-mikrobaketikadigunakan. • Suhusterilisasi yang konstanadalah 121,10C dikarenakansuhutersebutmembuatsemuamikrobamati, akantetepimasihadabeberapamikroba yang masihtahanpanas. Gunakansuhu yang telahditentukantersebutgunabahan/peralatanjauhatautidakadabakterinya yang tinggal di tempattersebut. • Padasterilisasicawan petri dantabungreaksi, alattersebutdibungkusdenganmenggunakankertascokelat, disinifungsikertascokelattersebutsebagaipenahan UAP air yang memungkinkanterjadiakibatpemanasanudaraselama proses sterilisasi. Letakpenggunaaanketascokelatinibagianhaluskertascokelatberadadiluar, sedangkan yang kasarberadadidalam, halinimenyebabkan air sukarmasukpadapada media (tetapterjagatanpaterjadipenambahan air dariluar).
Metodologi (lanjutan) • Penyemprotan alcohol pada media pun perludilakukandengantujuanuntukmembersihkanalatdanmenjadikanalatapseptik, dengan kata lain menghilangkanmikrobadarialat. • Pembilasan/dilapmenggunakan tissue yaitudengantujuanmembersihkanbekascairan alcohol danmengangkatbakteri/mikroba yang ada. Cara melakukannyapembilasannya pun harusdengansatuarah, tidakbolehbolak-balikarah, agar meminimkanterkontaminasibakteri yang telahdiakut.
KESIMPULAN Padapraktikumpembuatan media digunakan agar bakteorogical yang dilarutkandalamaquadessertadipanaskanuntukmemperolehpelarutnya. Selanjutnya media disterilkandandiamkanselama 24 untukmemperolehpertumbuhanbakteri, namunsebelumpembuatan media agar alat yang digunakanseperticawan petri dantabungreaksiharuslebihdahulu di sterilkan. Hal inibertujuan agar dalampenumbuhanbekteridalam media agar tidakterkontaminasiolehmikroorganisme lain yang diinginkan. Suhu yang digunakandalamsterilisasiadalah 121,10C padatekanan 1atm supayabakterimatihinggaspora-sporanya.