Perguntas malaria / Take home message Qual forma infecta naturalmente o hospedeiro intermediário e por qual via? espor

1. Perguntas malaria / Take home message Qual forma infecta naturalmente o hospedeiro intermediário e por qual via? esporozoita Como o parasita (merozoita) consegue sair da célula hepática infectada sem ser fagocitado por células Kupffer (macrófagos)? Formação de merossomos (vesiculas de membrana da célula hepática com merozoitas dentro) Por que não podemos ver formas maduras do parasita sanguíneo em sangue de pessoas infectadas com P. falciparum ? Porque eles estão citoaderidas em vasos profundos Por que é necessário tomar primaquina ou tafenoquina quando infectado com P. vivax ? Para matar os hipnozoitas para não ter recaida O que é necessário para desencadear uma epidemia de malaria? Anopheles, fonte de gametócitos (ex.:assintomáticos), pessoas não imunes

2. Perguntas Amebas etc / Take home message O que é uma Zoonose, e o que seria então uma antroponose? Zoonose é infecção do homem como hospedeiro quando o principal hospedeiro seria um outro animal. Antroponose é uma infecção que ocorre predominantemente entre seres humanos Qual é a forma infecciosa de Entamoeba histolítica? Cisto Qual seria uma forma diagnóstica de Entamoeba histolítica? Cisto com 4 nucleos (microscopista!) ou trofozoita com hemácia ingerida Em qual pequeno detalhe importante no ciclo de vida se distinguem Isospora belli e Cryptosporidium parvum? Cryptosporidium infecta qq célula epitelial e possui cisto que autoinfecta no intestino Em qual forma sobrevive Trichomonas vaginalis fora do corpo humano? E Giardia? T.v. não sobrevive e Giardia em forma de cisto

3. Tripanossomíase americana ou Doença de Chagas (Trypanosoma cruzi )

5. Histórico Oswaldo Cruz InstitutoSoroterápico Federal, 1900 Carlos Justiniano Ribeiro Chagas

6. Estrada de Ferro Central do Brasil

7. Hospital em Lassance Carlos Chagas atendendo pacientes

8. Formas do parasita e o inseto vetor encontrados por Chagas, denominado “Schizotrypanum cruzi“ Panstrongylus megistus Epimastigota Tripomastigota

10. Filogenia do gêneroTrypanosoma FiloSarcomastigophora, subfilo Mastigophora Classe Zoomastigophora OrdemKinetoplastida FamíliaTrypanosomatidae GêneroTrypanosoma Trypanosomasde mamíferos Secção Stercoraria Salivaria Desenvolvimento vetor tubo digestivo tubo digestivoe glândula salivária Transmissão contaminativa inoculativa pelo vetor fezes saliva subgêneroSchizotrypanum - T. cruziTrypanozoon - T. brucei Herpetosoma - T. rangeli Dutonella - T. vivax Megatrypanum - T. theileri Nannomonas - T.congolense Picnomonas - T. suis

11. Detalhes notáveis de T. cruzi Kinetoplastídeo Acidocalcissomo Superfície da célula: Mucinas Genoma do parasita: 6 “distinct type units (DTUs)“, ~50 MB, em 35 pares de cromossomos, “pseudodiploidia“ Genoma sequenciado em 2005, altamente rico em sequências repetitivas. Tritryp.org

12. Ciclo de vida

13. Rhodnius prolixus 1. Passo: a infecção Dipetalogastermaximus: repasto sanguíneo

14. Transmissão

15. Transmissão natural

16. Sinal de Romaña

17. Aguda - Sintomática - Sinais de entrada Sinal de Romaña

18. Vetores de T. cruzi : Hemíptera • espécies hematófagas: • Reduviidae - Triatominae (barbeiros) • hemimetábolos • Diferente dos pernilongos: todos os estágios e ambos os sexos são hematófagos

19. Triatomíneos mais importantes natransmissão da doença de Chagas Triatoma infestans Panstrongylus megistus Rhodnius prolixus Triatoma dimidiata Triatoma pallidipennis Triatoma sordida Triatoma brasiliensis

20. Discriminação morfológica de Triatomíneos hematófago fitófago predador

22. 2. Passo: A invasão de células (inicialmente macrófagos) • Fatores importantes: • Parasita: • gp82, fosforilação de p175, Ca2+ via IP3 • pH baixo • hemolisina para escape do lisossomo • Célula hospedeira: • Remodelamento do citoesqueleto, “sequestro” de lisossomos para superfície • Dynamina, Rab5, Rab7 célula fagocítica célula não fagocítica

23. http://www.hindawi.com/journals/ijcb/2010/295394.fig.0010.jpghttp://www.hindawi.com/journals/ijcb/2010/295394.fig.0010.jpg

24. TGF (M não se ativa via TLR4 e tGPI-Mucina) Ca2+ TcTox, Trans-sialidase

25. Nódulos linfáticos Sistema nervoso central Coração Aparelho digestivo 3. Passo: a disseminação no hospedeiro vertebrado Infecção local

26. 4. Passo: a contaminação do vetor invertebrado Tripomastigota sangüíneo

27. Outras vias de infecção • - transfusional! • congênita (0,5-3,5% risco) • acidentes de laboratório

28. - Oral (ingestão de fezes frescas de Triatomineos infectados ou Triatomineos macerados)

30. Patogenia e sintomas da infecção com T. cruzi • período de incubação: 5 a 60 dias • Fase aguda • - Maior parte assintomática ou inaparente • infecção local (sintomas: Chagoma/Sinal de Romaña) • - infecção disseminada, alvos preferenciais: Células Kupffer, • macrófagos do baço e células do miocârdio (sintomas: febre, • astenia, cefaléia, mialgia, adenite, morte em 10% dos casos • por meningoencefalite ou miocardite aguda)

31. Fase crônica (sintomas em 30% dos casos, 70% sem sintomas): • Infecção crônica com baixas parasitemias • Aumento do coração, dilatação dos ventrículos, e/ou miosite no esôfago, côlon ou intestino delgado • - destruição dos gânglios é compensado por aumento da massa muscular levando a megaesôfago, megacôlon (sintomas: inabilidade física, disfagia, constipação, morte) • Cura espontânea é possivel em cada estágio • Pacientes em muitos casos estão incapacitados de exercer atividades profissionais

32. Frequência e natureza de patologias observadas em pacientes crônicos da doença de Chagas: As “megas“

33. Fase crônica: Cardiomegalia e aneurisma de ponta

34. Fase crônica: Miocardite chagasica

35. Fase crônica: Megacôlon

36. Aspectos da relação patógeno-hospedeiro • Porque a patologia em um paciente é tão diferente de um paciente ao outro (assintomático/cura/crônico/patologia de orgãos diferentes)? • Como é causada uma patologia extensa com muito pouco parasita?

37. Qual motivo pela diferença no desenvolvimento da doença? • fatores genéticos do hospedeiro? (subclasses HLA, responsividade da produção de citocinas, etc.?) • Virulência diferente entre várias cepas de T. cruzi em circulação? • Cepas com diferente tropismo

38. Células T reativas contra auto-antígenos podem atacar células não infectadas Doença autoimune versus ativação “bystander“

39. Autoantígenos são liberados por lise da célula infectada e promovem a expansão de celulas T efetores contra outras células apresentando Prot.A do hospedeiro T MHC1 M Prot.A Prot.A Prot.A Prot.A Prot.A célula infectada Tolerização contra antigenos do miocârdio previne miocardite in infecções crônicos experimentais de camundongos

40. Antígenos de T. cruzi causam a formação de anticorpos que reagem cruzado contra proteínas do hospedeiro Exemplo: anticorpos contra proteinas ribossomais de T. cruzi reconhecem o receptor beta-adrenêrgico, antígeno Cha do miocârdio é outro candidato importante

41. Células infectadas (cardiomiócitos) e macrófagos após fagocitose secretam quimocinas que recrutam leucócitos para o tecido infectado

42. Quimiocinas e patologia da doença de Chagas • GPI-Mucinas estimulam macrófago a produzir CC e CXC quimiocinas, cardiomiócitos também produzem estas quimiocinas • Quimiocinas (RANTES, MIG, IP10, MIP) recrutam linfocitos para o lugar de produção, produção depende de níveis de IFNgama • Linfocitos são predominantemente do tipo CD8+ (effector cells) • Sem IFNgama (camundongos knockout) não há produção de quimiocinas, já na ausência de TNFalpha receptor (camundongos knockout): aumento de linfócitos recrutados e quimiocinas

43. Dutra & Gollob, 2008, Current Op. Inf Dis

44. Marin-Neto, J. A. et al. Circulation 2007;115:1109-1123

45. Diagnóstico Imprescindível: Detecção de formas do parasita • - Esfregaços de sangue na fase aguda (dificil em adultos) • Métodos imunológicos: Elisa, detecção de anticorpos • Xenodiagnóstico • PCR (permite também a discriminação de cepas e exclusão de infecção com T. rangeli )

46. Xenodiagnóstico

47. Epidemiologia • T. cruzi é transmitido em ciclos domésticos • ou paradomésticos

48. Existem poucos estudos sobre a capacidade vetorial de triatomineos nesta área A distribuição de vetores de T. cruzi

49. Área de risco de infecção com T . cruzi Onde há presença de vetores existe a possibilidade de infecção - Área endêmica Brasil: 1/4 território - 8 milhões de pessoas infectadas (MG,RS,GO,SE,BA) - 25 milhões de pessoas expostas ao risco de infecção Região amazônica: enzootia emergente?

50. Programas de controle da Doença de Chagas