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Pathophysiologie. WS09/10 Maria Krügle Peter Moor. Inhalt. Modelorganismus COG Genom- und Proteomuntersuchungen Phylogenetische Bäume Ussing-Kammer Zwei-Wege-Impendanzspekroskopie Protamin Ussing-Kammer 4°C 37°C Claudinnachweis Western Blot. Modelorganismus.
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Pathophysiologie WS09/10 Maria Krügle Peter Moor
Inhalt • Modelorganismus • COG • Genom- und Proteomuntersuchungen • Phylogenetische Bäume • Ussing-Kammer • Zwei-Wege-Impendanzspekroskopie • Protamin • Ussing-Kammer • 4°C • 37°C • Claudinnachweis • Western Blot
Modelorganismus Phylogenetischer Baum von Darmbakterien (Ermittlung über 16s rRNA)
Untersuchung • Bakterien gezüchtet • Lactobacillus casei (LC1) • Bifidobacterium animalis (BB12) • Ussing-Kammer • Cl-Sekretion, Induktion durch Forskolin • -> BB12 verursacht Inhibition des Cl-Stroms • Messung des para- und transzellulären Widerstandes mittels Zwei-Wege-Impendanzspekroskopie
2PI-Messungen:HT-29/B6 n = 8 2 6 6
Nachweis von Claudinen in transgenen Mäusen • Entnahme von Gewebe aus dem Darm • Probenaufschluss • Nachweis mit Western Blot • Auftrennung des Proteingemisches mit SDS-PAGE • Immundetektion (Antigen-Antikörper-Prinzip)