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Aplicacciones tecnológicas de las Bacterias del Ácido Láctico

Aplicacciones tecnológicas de las Bacterias del Ácido Láctico. PLANO DA APRESENTAÇÃO. Bactérias Lácticas Utilização tradicional Novas utilizações das BL L. lactis. Clonagem e Expressão Sistemas de expressão Sistemas de endereçamento . USINA CELULAR.

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Presentation Transcript

  1. Aplicacciones tecnológicas de las Bacterias del Ácido Láctico

  2. PLANO DA APRESENTAÇÃO • Bactérias Lácticas • Utilização tradicional • Novas utilizações das BL • L. lactis • Clonagem e Expressão • Sistemas de expressão • Sistemas de endereçamento USINA CELULAR

  3. Tecnología del ADN recombinante Microbiologia Bioquímica INTEGRACIÓN Fisiologia Genética

  4. Nuevas utilización de BAL Producción de proteínas heterologas de interes biotecnológico USINA • ENZIMAS • Tecnológica • Terapuetica • (Probióticos GM) ANTÍGENOS - Veículos vacunales (vacunas orales)

  5. Orden de la membrana Lactococcus lactis Expresión de capa S de L. brevis Capítulo VI Lactococcus lactis: BAL MODELO • Bacteria ampliamente utilizada en la industria alimentaría • De fácil manipulación dentro de las LAB • Sólo la proteína USP45 es secretada en cantidades suficientes para observarse mediante tinción de Coomassieblue • Información genética disponible

  6. PnisA pCYT:Nuc nuc Nuc Medio extra-celular Parede celular PnisA Membrana spUsp45 pSEC:Nuc nuc Citoplasma Medio extra-celular Parede celular Nuc Medio extra-celular Membrana PnisA pANC:Nuc spUsp45 Citoplasma nuc cwaM6 Parede celular Nuc Membrana Citoplasma MOTIVOS DE DIRECCIONAMIENTO PROTÉICO Sistema NICE de direccionamiento protéico (Le Loir et al., 2001)

  7. CWA SP precursor MOTIVOS DE ENDEREÇAMENTO PROTÉICO sobrenadante Ancla LPXT parede celular membrana citoplasma Proteína secretada Proteína anclada

  8. Expresión direccionada Secretada Citoplasmática Anclada

  9. Sistema de expresión NICE

  10. T spusp45 Cmr PxylT rbsusp45 Slp Nuc Medio extra-celular Pared celular Membrana Citoplasma Sistema de expresión XIES • Cmr : Resistencia a Cloranfenicol • PXyl T: Promotor de la Xilosa permeasa • rbsusp45: Sitio de Unión al Ribosoma del gen usp45 • SP usp45: Péptido señal de la proteína USP45

  11. BAL como vehículos vacunales • L. Lactis • Se encuentra en números productos lácteos fermentados • Hay una lisis parcial en el intestino • No coloniza el epitelio intestinal • Tiempo de transito es discreto • Efecto se produce en un tiempo limitado

  12. BAL como vehículos vacunales 1. Expresión de antígenos en forma citoplasmática Al ocurrir la lisis parcial en el intestino los antígenos son liberados

  13. BAL como vehículos vacunales 2. Expresión de antígenos en forma secretada Los antígenos interactúan directamente formando parte de la partícula completa o de los fragmentos luego de la lisis parcial

  14. BAL como vehículos vacunales 1. Expresión de antígenos en forma secretada Los antígenos se van liberando para interactuar con el sistema inmune en todo el proceso

  15. BAL como vehículos vacunales Antígeno en forma secretada

  16. BAL como vehículos vacunales Antígeno en forma secretada

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