400 likes | 1.05k Views
MOLEKULĀRĀ BIOLOĢIJA 2004. TRANSLĀCIJA. DNS. transkripcija. mRNS. mRNS. antikodons. kodons. translācija. aminoskābe. pienākošā tRNS. augošā polipeptīda ķēde. Fenilalanīna transporta RNS (Phe-tRNS) struktūra. Phe. 3’- gals. 5’- gals. T cilpa. D cilpa. Phe-tRNS telpiskā
E N D
MOLEKULĀRĀ BIOLOĢIJA 2004 TRANSLĀCIJA
DNS transkripcija mRNS mRNS antikodons kodons translācija aminoskābe pienākošā tRNS augošā polipeptīda ķēde
Fenilalanīna transporta RNS (Phe-tRNS) struktūra Phe 3’- gals 5’- gals T cilpa D cilpa Phe-tRNS telpiskā struktūra antikodona cilpa antikodons
ĢENĒTISKĀ KODA TABULA kodona otrā bāze kodona trešā bāze kodona pirmā bāze
Ģenētiskā (aminoskābju) koda nolasīšanas trīs rāmji (trpL gēna piemērs)
Prokariotu (a) un eikariotu (b) mRNS struktūra RBS – ribosomu saistības rajons proteīni proteīns
Kodona 3. bāzes iedarbība ar antikodona 1. bāzi ne vienmēr ir komplementāra 1 antikodons mRNS 3 kodons
Alternatīvie (svārstošie – “wobble”) bāžu pāri kodona – antikodona iedarbībā antikodons kodons tRNS antikodona zars antikodons mRNS riboze riboze kodons inozīns – citozīns riboze riboze inozīns – uracils riboze riboze inozīns – adenīns kodons vai antikodons kodons vai antikodons riboze riboze guanīns - uracils
Aminoacil – tRNS struktūra leicīns akceptorzars T zars D zars T cilpa D cilpa antikodona zars aminoacil - tRNS V cilpa antikodona cilpa antikodons mRNS kodons leicīns aminoskābe mRNS
Aminoskābes aktivācija ar aminoacil-tRNS sintetāzi aminoskābe ATF pirofosfāts adenilēta aminoskābe (aminoacil-adenilāts)
Transporta RNS aminoacilēšana ar aminoacil-tRNS sintetāzi adenilēta aminoskābe tRNS makroerģiskā saite aminoacil-tRNS AMF
Kļūdu labošana tRNS aminoacilēšanā un DNS sintēzē korekcijas vieta nepareizo aminoskābi atšķeļ tRNS sintēzes vieta nepareiza aminoskābe aminoacil-tRNS sintetāze SINTĒZE KOREKCIJA polimerizācijas vieta pievieno nepareizu nukleotīdu nepareizo nukleotīdu atšķeļ korekcijas vieta DNS polimerāze SINTĒZE KOREKCIJA &
Prokariotu RNS polimerāze un ribosomas strādā kopā RNS polimerāze ribosoma
Ribosoma un tās sastāvdaļas 5.8S rRNS 160 nukleotīdi 5S rRNS 120 nukleotīdi 28S rRNS 4 700 nukleotīdi 49 proteīni 18S rRNS 1 900 nukleotīdi ~33 proteīni 5S rRNS 120 nukleotīdi 23S rRNS 2 900 nukleotīdi ~34 proteīni 16S rRNS 1 540 nukleotīdi 21 proteīns
Translācijas iniciācijas shēma lielā ribosomas subvienība iniciācijas tRNS mazā ribosomuas subvienība mRNS amino acil-tRNS polipeptīds
Peptidiltransferāzes reakcija polipeptīda ķēde peptidil-tRNS aminoacil-tRNS R
Poliribosomas (jeb polisomas) pabeigtais polipeptīds atbīvojas augošais polipeptīds ribosoma mRNS ribosomas subvienības atbrīvojas
Ribosomas trīs funkcionālie centri saistībai ar tRNS peptidil-tRNS saistības centrs aminoacil-tRNS saistības centrs tRNS izejas centrs mRNS
Iniciācijas tRNS piesaistās ribosomas P centrā iniciācijas fMet-tRNS mRNS
Prokariotu ribosomas saistība ar mRNS translācijas iniciācijā mRNS rajons saistībai ar ribosomu starta kodons 30S subvienība 16S rRNS
metionīns N-formil-metionīns
Translācijas iniciācijas shēma prokariotos mRNS fMet-tRNS 70S iniciācijas komplekss 30S iniciācijas komplekss
Translācijas iniciācijas shēma eikariotos starta kodons AUG iniciācijas Met-tRNS 43S pirmsiniciācijas komplekss
Translācijas iniciācijas shēma eikariotos starta kodons AUG slīdēšana līdz AUG kodonam ATF ADF + PPi
Translācijas elongācija un ribosomu cikls peptīdsaites izveidošanās peptīdsaite aminoacil-tRNS piesaistīšanās ribosonas A cetrā ribosomas translokācija peptidiltransferāzes reakcija ribosomā
Aminoacil-tRNS piesaistīšanās un elongācijas faktors EF-Tu polipeptīda ķēde EF-Tu saistības vieta aminoacil-tRNS
Translokācija un elongācijas faktors EF-G EF-G saistības vieta
Translācijas terminācija polipeptīda atbrīvošana R-faktora piesaistīšanās A centrā terminācija
Beznozīmes (nonsense) mutāciju supresija gēna mutācija, satur nonsense kodonu tirozīna tRNS kodējošais gēns a DNS transkripcija mutanta mRNS izraisa priekšlaicīgu translācijas termināciju un nepabeigta proteīna sintēzi tirozīna tRNS atpazīst tirozīna kodonus UAC un UAU mRNS gēna mutācija, satur nonsense kodonu mutācija tirozīna tRNS antikodonā b G→C transkripcija mutētā tRNS atpazīst nonsense kodonu UAG nonsense kodons tiek supresēts – atpazīts kā tirozīna kodons, ieslēdzas proteīnā un novērš translācijas termināciju
Proteīnu modifikācija pēc sintēzes un sintēzes laikā augoša vai nobeigta proteīna ķēde salocīšanās (folding) un saistīšanās ar kofaktoriem kovalenta modifikācija – glikozilēšana, fosforilēšana uc. saistīšanās ar citiem proteīniem funkcionāli aktīvs proteīns
Proteīnu telpiskā struktūra veidojas jau sintēzes laikā salocīšanās pabeigšana pēc proteīna atbrīvošanās C-gala domēna salocīšanās N-gala domēna salocīšanās augošā polipeptīda ķēde
Proteīnu telpiskās struktūras veidošanās proteīna molekulas pašsalocīšanās proteīnu telpiskās struktūras korekcija “izkusušas globulas” stāvoklis kļūdaino proteīnu degradācija čaperoni proteolīze čaperoni pareizi salocīts proteīns
Molekulārie čaperoni – hsp70 piemērs hsp70 pareizi salocīta proteīna molekula hsp70 ribosoma kļūdaini salocīta proteīna molekula
Molekulārie čaperoni – hsp60 piemērs hidrofobās proteīna saistības vietas GroES kļūdaini salocīts proteīns hsk60 tipa proteīna komplekss GroES pareizi salocīts proteīns &