ELECTROFORESIS DE ADN (POLYQUETOS Y BACTERIAS)

1. UNIVERSIDAD NACIONAL DE MOQUEGUA ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA Y ARQUITECTURA AMBIENTAL “ELECTROFORESIS DE ADN (POLYQUETOS Y BACTERIAS)” CURSO : BIOTECNOLOGIA DOCENTE :Dr. SOTO GONZALES, HEBERT HERNAN PRESENTADO POR: •Ramos Arohuanca, Jhon Brayan ILO-PERU 2024

2. INDICE INTRODUCCION............................................................................. 3 I. II.OBJETIVO GENERAL ................................................................... 3 OBJETIVO ESPECIFICO ........................................................... 3 III. MATERIALES Y METODOS ..................................................... 4 IV. PROCEDIMIENTO .......................................................................... 6 V. RESULTADOS .............................................................................. 7 VI. CONCLUSIONES ......................................................................... 7 VII. VIII.BIBLIOGRAFIA ........................................................................... 7 2

3. I. INTRODUCCION La electroforesis de ADN es una técnica fundamental en la biología molecular que permite la separación y el análisis de fragmentos de ADN en función de su tamaño y carga eléctrica. Esta técnica se basa en la migración de moléculas de ADN a través de un gel de agarosa o poliacrilamida bajo la influencia de un campo eléctrico, permitiendo visualizar y comparar patrones de bandas que representan diferentes fragmentos de ADN. Los poliquetos, un grupo diverso de anélidos marinos, y las bacterias, organismos unicelulares ubicuos, son modelos biológicos importantes en estudios ecológicos, evolutivos y biotecnológicos. La comparación del ADN entre estos organismos puede proporcionar información valiosa sobre sus relaciones filogenéticas, mecanismos de adaptación y diversidad genética. En este informe, se realizará la extracción y análisis de ADN de muestras de poliquetos y bacterias mediante la técnica de electroforesis. Este proceso incluye la extracción del material genético, la preparación del gel de agarosa, la carga y separación de los fragmentos de ADN y la visualización de los resultados bajo luz UV. La electroforesis permitirá evaluar la calidad y pureza del ADN extraído, así como comparar los perfiles de bandas entre los dos tipos de organismos. II. OBJETIVO GENERAL Determinar la presencia y/o diferencias de ADN en poliquetos y bacterias mediante electroforesis. III. OBJETIVO ESPECIFICO •Extraer ADN de poliquetos y bacterias. •Realizar la electroforesis para separar las bandas de ADN. •Analizar los resultados obtenidos. 3

4. IV. MATERIALES Y METODOS La práctica se desarrolló en el laboratorio de Biotecnología en la universidad nacional de Moquegua. Figura 1: Laboratorio de Biotecnología – UNAM MICROPIPETAS MOLDE AGAROSA SOLUCION TAE 50X 4

5. PAPEL FILM BALANZA CENTRIFUGA PROBETA AGUA TIPO II FUENTE ELECTROFORESIS HORIZONTAL SOLUCION COLORANTE MICROONDAS GEL AGAROSA 1% 5

6. V. PROCEDIMIENTO ✓Para preparar la solución, primero vertemos 980 ml de agua desionizada en una probeta de 1000 ml. ✓A continuación, añadimos 20 ml de TAE buffer a la probeta. ✓Cubrimos la probeta con papel film para agitar la solución y obtener una concentración 1x. ✓Para el armado, colocamos el molde, los metales y el peine dentro de la caja. ✓Luego, taramos la balanza para pesar 1 g de agarosa. ✓Añadimos el agarosa pesada (1 g) al gel de agarosa al 1%. ✓Llevamos el gel de agarosa al 1% al microondas por 2 minutos y 30 segundos, hasta que se vuelva transparente. ✓Dejamos enfriar el gel de agarosa a temperatura ambiente. ✓Colocamos el gel de agarosa en el peine para que se solidifique. ✓Preparamos las muestras de ADN de poliquetos (gusanos marinos) y bacterias. ✓Para ello, añadimos colorante con glicerol a las muestras, mezclando 6 microlitros de ADN con 6 microlitros de colorante usando una micropipeta. ✓Usamos una micropipeta de 20 microlitros para succionar los 12 microlitros de las muestras. ✓Una vez que la agarosa se ha solidificado, retiramos el peine y los metales, y vertemos el tampón 1x sobre el soporte hasta cubrir la agarosa. ✓Se visualizarán pequeños agujeros donde incorporamos los 12 microlitros de muestra con la micropipeta. ✓Tras colocar las 7 muestras (3 de bacterias, 3 de poliquetos y 1 blanco), conectamos los cables rojo y negro en sus respectivos lugares. ✓Finalmente, dejamos actuar durante 3 horas para obtener la lectura final. 6

7. VI. RESULTADOS Visualización y captura de la imagen del gel de agarosa después de la electroforesis. Bandas de ADN VII. CONCLUSIONES ✓El fotodocumentador de geles se utilizó para visualizar y capturar imágenes del gel de agarosa después de la electroforesis. Las bandas de ADN observadas en la imagen del gel confirman que la electroforesis se realizó con éxito, separando eficazmente los fragmentos de ADN de las muestras de poliquetos y bacterias, los cuales mostraron distintos tamaños de fragmentos. ✓En las muestras de poliquetos y bacterias, se identificaron múltiples bandas, lo que indica la presencia de diversos fragmentos de ADN de diferentes tamaños. La ausencia de bandas difusas sugiere que las muestras de ADN estaban libres de contaminantes, asegurando la pureza y calidad del ADN extraído. ✓La precisión y claridad de las bandas también demuestran la efectividad del procedimiento de extracción y preparación del ADN, así como la adecuada ejecución de la electroforesis. VIII. BIBLIOGRAFIA Electroforesis. (n.d.). National Human Genome Research Institute. Retrieved July 17, 2024, from https://www.genome.gov/es/genetics-glossary/Electroforesis 7