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„Multiple Nuclear Factors Interact with the Immunogloblin Enhancer Sequences“ Autoren: Sen & Baltimore (1986). Bachelor-Fachmodul in Molekularer Immunologie Erlangen WS 10/11. - 1. März 2011 -. Referent: Kristina Scheibe. Überblick. Hypothese Vorarbeit Methoden Ergebnisse
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„Multiple Nuclear Factors Interact with the Immunogloblin Enhancer Sequences“ Autoren: Sen & Baltimore (1986) Bachelor-Fachmodul in Molekularer Immunologie Erlangen WS 10/11 - 1. März 2011 - Referent: Kristina Scheibe
Überblick • Hypothese • Vorarbeit • Methoden • Ergebnisse • Zusammenfassung • Aktueller Kenntnisstand Quelle: Knippers, R. (2006). Molekulare Genetik. Georg Thieme Verlag. S. 379
Es gibt Gewebe-spezifische Transkriptionsfaktoren, die mit den cis-Elementen der Immunglobulin-Loci interagieren. Hypothese DNA
Vorarbeit • Verfügbare Zellextrakte von • Transformierten Pro- und Prä-B-Zelllinien • Lymphom-, Myelom-, Carzinomzelllinien aus dem Menschen, Mäusen, Affen • Lokalisierung der Enhancer-Sequenzen der Geneloci für die schwere und k-leichte Kette des BCRs bzw. des Antikörpers
Methoden • Electrophoretic mobility shift assay (EMSA) Quelle: Knippers, R. (2006). Molekulare Genetik. Georg Thieme Verlag. S. 342
Ergebnisse • Eingrenzen der Protein-DNA-Bindestelle
Ergebnisse • Eingrenzen der Protein-DNA-Bindestelle
Ergebnisse • Kompetitionsversuche → Spezifität des bindenden Proteins Hemmstoff: Poly d(IC) = Oligonukleotide
Ergebnisse • Identifizieren des k-Enhancers → NF-kB: nuclear factor kappa B
Ergebnisse • Definieren der Gewebespezifität des Faktors → kein Vorkommen in nicht-lymphoiden Zelllinen Nicht-lymphoide Zelllinien
Ergebnisse • Eingrenzen der Spezifität auf ein Differenzierungsstadium Quelle: Konzepte-Vorlesung
Zusammenfassung • Exakte Bindungsstelle des k-Enhancers • spezifisch im Entwicklungsstadium der Prä-B-Zellen und Plasmazellen • Korrelation zwischen NF-kB und der Genexpression der k-leichten Kette
Aktueller Kenntnisstand • Dreidimensionale Struktur und Funktionsweise Quelle: Knippers, R. (2006). Molekulare Genetik. Georg Thieme Verlag. S. 379
Aktueller Kenntnisstand • Dreidimensionale Struktur und Funktionsweise • Signaltransduktion und Rezeptoren • etc.
Referenzen • Murphy, K., Travers, P., Walport, M. und Seidler, L. (2009). Janeway Immunbiologie. Spektrum Akademischer Verlag. Auflage 7. • Knippers, R. (2006). Molekulare Genetik. Georg Thieme Verlag. Auflage 9. • Vorlesung Konzepte der Immunologie • Purves, W.K. et al (2006). Biologie. Spektrum Akademischer Verlag. Auflage 7.