260 likes | 442 Views
Metody pro monitorování terapie. Drahomíra Bezdíčková ÚKB VFN a 1.LFUK U Nemocnice 2 Praha 2. Terapeutické monitorování léčiv (TDM). je součástí farmakologie Farmakologie je vědní obor studující účinky látek (farmak) na živé organismy a jejich osudem v organismu
E N D
Metody pro monitorování terapie Drahomíra Bezdíčková ÚKB VFN a 1.LFUK U Nemocnice 2 Praha 2
Terapeutické monitorování léčiv (TDM) je součástí farmakologie Farmakologie je vědní obor studující • účinky látek (farmak) na živé organismy a jejich osudem v organismu • interakci látek a organismu na všech úrovních složitosti ( molekulární, buněčné, orgánové, celého organismu)
Klinická farmakologie • Farmakokinetika - zabývá se osudem léčiv v organismu a jejich účinkem z hlediska časového průběhu – vliv organismu na léčivo • Farmakodynamika - nauka o mechanismu účinku léčiv – vliv léčiva na organismus
Farmakoepidemiologie - sleduje chování léku ve společnosti a epidemiologickými metodami zjišťuje rizika a prospěšnost terapie. • vedle faktorů jako je chemická podstata léčiva a interakce léčiva se somatickými strukturami, je nutné brát v úvahu i faktory vnějšího prostředí jako je chování zdravotníka, chování samotného pacienta - compliance a chování společnosti k léku - marketing, konkurence, způsob úhrady
Farmakologie jako předpoklad racionální farmakoterapie • Racionální FT = správný lék, správnému pacientovi, ve správné dávce a formě, ve vhodnou dobu, za rozumnou cenu
Podávané léčivo • znalost • mechanismus účinku ( !! duplicita) • farmakokinetika (lékové interakce) • nežádoucí účinky • NÚ léčiv jsou příčinou 6,5% hospitalizací (minimálně třetině lze předejít) • účinnost • cena (nákladová efektivita)
Rozdělení vyšetřovacích metod • Orientační • testovací proužky, kazety, nádobky pro moč • zvláštní kazety pro sliny • Semikvantitativní • některá imunochemická stanovení např.návykových látek • Rutinní stanovení • automatické analyzátory, CLIA, FPIA • Konfirmační • GC/MS, náročné a drahé
Testovací proužky • Rychlá detekce pro • Amphetaminy • Benzodiazepiny • Kokain • Konopí • Opiáty
Test v odběrové nádobce • Detekce následujících drog • Amphetaminy • Barbituráty • Benzodiazepiny • Kokain • Morfin • PCP • THC
Monotesty • jednoduché provedení • možnost uchování výsledku • nutnost číst dobře návod
Vyšetření ve slinách • Stanovení alkoholu ve slinách • Citlivost od 0,02% alkoholu v krvi
Imunochemické stanovení na automatickém analyzátoru • FPIA - fluorescenční polarizační imunoanalýza • provádí 60 vyšetření za hodinu • pracuje po pacientech
FPIA • kompetitivní imunoanalýza + fluorescenční polarizace • rychlost rotace molekul v roztoku je závislá na jejich velikosti • polarizované světlo emituje fluorescenční světlo, které je také polarizované a jeho intenzita odpovídá rotaci molekul Vysoká konc.léku Polarizované světlo Nízká polarizace Nízký stupeň vazby znač. antig Nízká konc.léku Polarizované světlo Vysoká polarizace Vysoký stupeň vazby znač. antig
Výsledky imunoanalytických vyšetření • Hladina léku • terapeutické rozmezí • program TDM • Hladina návykové látky v moči • nekoreluje s její hladinou v krevním oběhu, ani se stupněm odbourávání. • indikuje požití drogy v nedávné minulosti • výsledek určený pro soudní účely potvrdit konfirmační analýzou v toxikologické laboratoři
Chromatografie • kvantitativní informace • s příslušnou koncovkou i kvalitativní informace • distribuce složek směsi mezi mobilní a stacionární fází • doba zdržení složky závisí na velikosti její interakce se stacionární fází • základní dělení podle mobilní fáze: plynová (GC) kapalinová (LC)
Dělení chromatografie podle uspořádání CHROMATOGRAFIE V PLOŠNÉM USPOŘÁDÁNÍ • sorbent v tenké vrstvě • papírová chromatografie (PC) • chromatografie na tenké vrstvě (TLC) • detekce složek – často specifické barevné reakce • základní údaje – vzdálenost skvrny od startu a vzdálenost mobilní fáze od startu • možná další analýza skvrn
Dělení chromatografie podle uspořádání SLOUPCOVÁ CHROMATOGRAFIE • stacionární fáze v koloně • za kolonou detektor (spektrofotometr, refraktometr, vodivostní detektor, ...) • základní údaje – doba zdržení v koloně (retenční čas) a intenzita signálu • vysokovýkonná kapalinová chromatografie (HPLC) zavedení nových sorbentů s menšími částicemi a vyšší mechanickou odolností + práce za zvýšeného tlaku
Chromatogram • B – Amphetamine • D – Extáze • E – EDDP • (metabolite of methadone) • F – Methadone • G – Cocaine • H – Cocaethylene • L – THC • B – Amphetamine • D – Extasy • E – EDDP • (metabolite of methadone) • F – Methadone • G – Cocaine • H – Cocaethylene • L – THC
Typy MS • GC-MS - Gas Chromatography MS • rozdělení těkavých látek v plynovém chrom. a identifikace podle hmotnosti • LC-MS - Liquid Chromatography MS • oddělení nestabilních látek v HPLC koloněa identifikace podle hmotnosti • MS-MS - Tandem Mass Spectrometry • oddělení složek v magnetickém polia identifikace podle hmotnosti
Typické hmotnostní spektrum aspirin
Konfirmační metoda • GC/MS • rozlišení i derivátů a degradačních produktů • HPLC - REMEDI • automat. HPLC systém