Katarína Koňariková Plzeň 2013

1. Porovnanie molekulového mechanizmu N-salicylidénglutamátomeďnatých komplexov na ľudskú nádorovú líniu hrubého čreva Katarína Koňariková Plzeň 2013 Univerzita Komenského Lekárska fakulta Ústav lekárskej chémie, biochémie a klinickej biochémie

2. Význam medi a meďnatých komplexov

3. 2400 p.n.l. – sterilizačný prostriedok • 1500 p.n.l. – pri bolestiach hlavy, popáleninách • 400 p.n.l. – liečba vredov, kŕčových žíl • 25 – 50 n.l. – syntetizované prvé deriváty medi • 23 – 79 n.l. – lieky obsahujúce meď

4. 1867 – prvé záznamy o význame medi pre imunitný systém • 1885 – použitie acetátu medi • 1895 - organické komplexy medi vyvinuté firmou Bayer • 20. stor. • protinádorové účinky • ochorenia srdca • artritída • žalúdočné vredy • protizápalové účinky

6. Molekulový mechanizmus bunkovej smrti

12. Ciele Vplyv meďnatých komplexov na nádorovú líniu hrubého čreva HT-29: • Cytotoxický účinok 2. Spôsob bunkovej smrti 3. Molekulový mechanizmus bunkovej smrti

13. Materiál a metódy

14. Meďnaté komplexy

15. Použitý bunkový model Ľudské nádorové bunky hrubého čreva HT-29

16. Použité metódy Určenie cytotoxického účinku MTT test Určenie typu bunkovej smrti Gélová elektroforéza Molekulový mechanizmus bunkovej smrti Stanovenie aktivity kaspáz 8, 9 luminometricky

17. Výsledky1. Cytotoxický účinok

18. Cytotoxický účinok ZK1 na HT-29

19. Cytotoxický účinok MK0 na HT-29

20. Cytotoxický účinok MK1 na HT-29

22. Výsledky2. Typ bunkovej smrti

23. Určenie typu bunkovej smrti ZK1 –––––––24h–––––– –––––––48h––––– –––––––72h–––––– PK K  1 10 50  100 1 10 50  100 1 10 50 100 µmol/L

24. Určenie typu bunkovej smrtiMK0, MK1 –––––––24h–––––– –––––––48h––––– –––––––72h–––––– PK K  1 10 50  100 1 10 50  100 1 10 50 100 µmol/L

25. Výsledky3. Molekulový mechanizmus bunkovej smrti

26. Aktivity kaspázy 8 a 9ZK1

27. Aktivity kaspázy 8 a 9MK0

28. Aktivity kaspázy 8 a 9MK1

29. Meďnaté komplexy ZK1, MK0 a MK1 vykazovali na ľudskú nádorovú líniu hrubého čreva HT-29: • 1) Cytotoxický účinok Záver • závislý od použitej koncentrácie a času pôsobenia • najvyšší cytotoxický účinok – komplex MK0s izochinolínovým ligandom po 72 h pôsobenia

30. 2. Apoptotickú smrť HT-29 buniek pri koncentráciách • komplexu 1-100 µmol/L: • ZK1 po 48h pôsobenia • MK0 a MK 1 po 72h pôsobenia Záver

31. Záver 3. Komplex ZK1 - [Cu(N-sal-L-glu)(H20)2].H20

32. Záver 4. Komplex MK0 - [Cu2 (N-sal-D,L-glu)2(izochinolín)2]. H20

33. Záver 5. Komplex MK1 - [Cu(N-sal-5-met-L- glu)(H20)].H20

34. Poďakovanie Doc. Ing. Ingrid Žitňanová, PhD. Prof. Ing. Zdeňka Ďuračková, PhD. RNDr. Lucia Andrezálová, PhD. MSc. Georgios Perdikaris Kolektív Ústavu lekárskej chémie, biochémie a klinickej biochémie Vega grant 1/0752/13

35. Ďakujem za pozornosť