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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIHUAHUA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS. CINÉTICA DE CRECIMIENTO DE Saccharomyces cerevisiae Microbiología de alimentos Dr. Iván Salmerón I.Q . Edmundo Juárez Enríquez 213548 Q.B.P. Carolina Nájera Domínguez 207445 I.Q. Ana Herrera Ponce 207531 23/03/2011 .
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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIHUAHUAFACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS CINÉTICA DE CRECIMIENTO DE Saccharomycescerevisiae Microbiología de alimentosDr. Iván Salmerón I.Q. Edmundo Juárez Enríquez 213548Q.B.P. Carolina Nájera Domínguez 207445 I.Q. Ana Herrera Ponce 20753123/03/2011
Saccharomyces cerevisiae Clase: Hemiascomycetes Orden Saccharomycetales Familia: Sacchacromycetaceae Biomasa Tamaño: 5-10 micras Reproducción: gemación Etanol
Introducción En el transcurso de la fermentación hay 4 fases de crecimiento: • 1) lag o de adaptación • 2) exponencial o log • 3) estacionaria • 4) mortalidad
Introducción C6H1206 —» 2 CH3CH2OH + 2 CO2
OBJETIVO Monitorear el crecimiento de Saccharomyses cerevisiae, con el fin de medir el cambio de diferentes parámetros, como pH, consumo de azúcar, acidez y unidades formadoras de colonias, así como la duración de cada etapa del crecimiento
Microbiología III • Alimentos I
Preparación del Caldo de Crecimiento • Glucosa 5 g/L • Extracto de Malta 5% • Solución M9 • Inóculo 1% Inoculado el 15 de Marzo
Acidez y pH • Muestra directa en potenciómetro Hanna Instruments Hi225 • Acidez: valoración de la muestra con NaOH 0.1 N • % de ácido acético
Cuantificación de consumo de sustrato • Dubois y col. (1956) 1 mL muestra o estándar 0.6 mL Fenol 5% 3.6 mL H2S ג 492 nm
Al momento de realizar la cinética de crecimiento, se separó 1 mL de la muestra • Se centrifugó a 1500 rpm por 5 min • El sobrenadante se guardó en refrigeración para su análisis al día siguiente
D.O. • Determinar la D.O. a 600 nm (Durango, 2007) • Espectrofotómetro PerkinElmer Lambda 25
UFC • Milles y Misra “ Método de la Gota” 1 mL PDA X 2 1 mL 10-3 10-1 10-2 10-4 37° C 12 horas
Cinética de Crecimiento Microlector • Blanco: caldo de crecimiento • Cinética: caldo de crecimiento inoculado con Saccharomyces cerevisiae 25 °C 24 horas D.O. 595 nm BioTek Gen 5