370 likes | 1.47k Views
ANTICORPII MONOCLONALI. SISTEMUL IMUNITAR. Immunis = scutit Sistemul imunitar = totalitatea proceselor biologice, a organelor, a celulelor, a produsilor celulari care asigura protectia impotriva infectiilor Imunitatea Nespecifica Specifica. ANATOMIA SISTEMULUI IMUNITAR.
E N D
SISTEMUL IMUNITAR • Immunis = scutit • Sistemul imunitar = totalitatea proceselor biologice, a organelor, a celulelor, a produsilor celulari care asigura protectia impotriva infectiilor • Imunitatea • Nespecifica • Specifica
ANATOMIA SISTEMULUI IMUNITAR Amigdale si adenoide Ganglioni limfatici Vase limfatice Timus Ganglioni limfatici Splina Placi Peyer Apendice Maduva hematogena
CELULELE SISTEMULUI IMUNITAR Macrofag Mastocit PMN eozinofil Eritrocite Maduva PMN bazofil Monocit Megacariocit Os Celula stem hematopoetica Celula stem multipotenta Celula progenitoare mieloida PMN neutrofil Plachete Celula progenitoare limfoida Celula dendritica Limfocit T Celula NK Limfocit B
ACTIVAREA LB SI PRODUCEREA DE ANTICORPI Anticorp circulant Antigen Rec. de Ag specific LB HLA clasa II si Ag procesat sunt expuse Celula prezentatoare de Ag Procesarea Ag Antigen HLA clasa II LB Limfokine Anticorpi Celula prezentatoare de Ag Th activat Plasmocit
ANTICORPII Lanturi grele Lanturi usoare Paratop Regiune constanta
ANTICORPII IgA, IgD, IgE, IgG IgA IgM
PRODUCEREA ANTICORPILOR MONOCLONALI Antigen Fuzionarea celulelor HIBRIDOM Mielom Plasmocite producatoare de Ac Testarea clonelor Cultivarea hibridoamelor Clonele dorite se cultiva sau se congeleaza Hibridoamele se separa si se cultiva Mentinerea hibridoamelor in soareci Anticorpii monoclonali sunt purificati
PRODUCEREA ANTICORPILOR MONOCLONALI • Antigenul (celule, componente ale membranei celulare, microorganisme, etc.) se injecteaza soarecelui • Cand titrul de anticorpi serici a crescut corespunzator, se realizeaza splenectomia si se colecteaza LB • Se obtine hibridomul prin fuzionarea LB murine cu celule provenite din mielom • Se cultiva hibridoamele si se colecteaza anticorpii
PROBLEME • HAMA = human anti-mouse antibodies • Dupa 10-14 zile • Eruptie cutanata (urticarie) • Bronhospasm • Hipotensiune • Soc anafilactic
TEHNICI DE INGINERIE GENETICA • Soareci transgenici (gene pentru Ig umane) • Mab himerici = • Regiuni variabile murine • Regiuni constante umane • Mab umanizati = • Regiuni hipervariabile murine • 95% umani • Bacteriofagi/plasmide
APLICATIILE ANTICORPILOR MONOCLONALI • Diagnostic • Terapie • Cercetare
APLICATIILE ANTICORPILOR MONOCLONALI • Diagnostic • Imunohistochimie • Imunofluorescenta • Radioimunodetectie (RIA) • Medicamente • Hormoni • Proteine • Toxine • Droguri • Imunodetectie enzimatica (ELISA)
APLICATIILE ANTICORPILOR MONOCLONALI • Terapie • Infliximab –TNFα • Abciximab – GpIIb/IIIa • Omalizumab – IgE • Rituximab – CD20 • Alemtuzumab – CD52 • Trastuzumab – HER2 • Bevacizumab – VEGF
IMUNOTERAPIE Radioizotop Herceptin Factor de crestere Herceptin blocheaza receptorul Anticorp Antigen Celula tumorala mamara Distrugerea celulei tumorale Cresterea se opreste
APLICATIILE ANTICORPILOR MONOCLONALI • Cercetare • Imunohistochimie • Identificarea unor molecule • Purificarea unor structuri