Medición de Productos de Microorganismos

1. Medición de Productos de Microorganismos • Microbiología de los Alimentos • Jesús Ignacio Tanino Gutiérrez • Sergio Díaz Almanza

2. A diferencia de la microbiología general y de alimentos, la microbiología industrial estudia las aplicaciones positivas de los microorganismos. Servicios, eliminación de residuos. Producción de sustancias con interés económico (metabolitos primarios y secundarios) Análisis, desarrollo de biosensores Microbiología Industrial

3. Metabolitos primarios Metabolitos secundarios

4. Bebidas alcohólicas: Saccharomyces Ácido láctico y productos lácticos: Lactobacillus Ácido acético: Acetobacter Aminoácidos: Conybacterium Depuración de aguas residuales: Bacterias aerobeas Biosensores(análisis de glucosa): Aspergillus Hormonas (insulina humana): Escherichia Aplicaciones de los microorganismos en la Industria

5. Afectan la calidad del alimento Productos deseables Afectan Características organolépticas Maximizar su producción Controlar concentraciones Productos indeseables Afectan Características organolépticas Causantes de enfermedades Evitar su producción Importancia • El sabor avinagrado indica mala calidad, límites de 14% en vinos

6. Titulación Cromatografía Líquida de Alta eficacia Espectroscopia de masas Electroforesis Cromatografía de capa fina Cromatografía de gases Técnicas para la medición de los productos derivados de microorganismos

7. TITULACIÓN

8. Análisis volumétrico Conocer concentración de reactivos conocidos Reactivo titulador de concentración conocida Indicador

9. Productos cuantificables: Peróxidos Acido acético Acetaldehído Fenoles Ácido glutámico Ácido Láctico Aminas Ácido cítrico TITULACIÓN • Rancidez alimentos altos en grasas • Sabor avinagrado • Olores desagradables • Antioxidante • Aminoacido esencial • Sabor en fermentación láctica

10. Cromatografía líquida de alta eficacia HPLC

11. Productos: Indol Riboflavina Lisina Sorbosa Aflatoxinas Fumonisina HPLC • Olores desagradables • Vitamina benéfica para la piel y la vista • Aminoácido esencial • Micotoxinas

12. ESPECTROSCOPIA DE MASAS

13. Glicerol En análisis rutinarios es utilizado el método fluorimétrico Espectroscopia de masas • Subproducto en la fermentación alcohólica • Indicador de adulteración

14. Gay-Lussac Etanol Para determinar el momento de la fermentación en que se encuentra el vino Densímetro

15. Técnica separación moléculas dado por su movilidad en un campo eléctrico utilizando un medio gelatinoso. Utiliza: Identificación y cuantificación ADN, aminoácidos, proteínas, vitaminas. Ejemplos microorganismos: Lactobacillus, Propionibacterium, Pseudomonas Es una técnica sensible, se debe tener cuidado con la temperatura, la corrida de gel, preparación de muestras. Electroforesis

16. Electroforesis

17. Se utiliza una placa de cromatográfica inmersa verticalmente en un solvente apolar. La placa de cromatografía consiste en una fase estacionaria polar (sílica gel) adherida a una superficie solida con algún agente cementante. Identificación por cambio de color de la placa de cromatografía y ascendencia por capilaridad. Identificación y aislamiento de péptidos y aminoácidos, asi como metabolitos primarios. Ejemplos microorganismos: Streptomyces sp. ,Bacillus sp., Aspergillus niger. Se debe tomar en cuenta que agente apolar se utilizara, por su precio y toxicidad. Cromatografía capa fina

18. Cromatografía capa fina

19. La muestra que se va a analizar se volatiza para después inyectarse en “la cabeza” de una columnade cromatografía. El gas inerte dentro de la columna cumple su función de mover la muestra volatizada alrededor de la columna para ser identificada y cuantificada. Es importante elegir el gas inerte por su pureza, costo, disponibilidad y adecuado para el detector que se utilizara. Identificación y cuantificación de etanol, ácidos orgánicos, sistemas bioquímicos. Ejemplos microorganismos: Pseudomonas sp., Saccharomyces sp., Zymomonas sp., y Lactobacillus sp. Cromatografía de gases

20. Cromatografía de gases

21. Combina las técnicas de electroforesis capilar con HPLC. Logran separaciones efectivas utilizando microvolúmenes. No es necesario las altas presiones de bombeo que requiere HPLC. Separa especies con carga y sin carga. También se forman micelas por tensoactivos (dodecil sulfato de sodio), que atrapan a los compuestos hidrofilicos(afuera de la micela) y compuestos hidrofoboficos(dentro de la micela). La cuantificación e identificación se determina por la velocidad de migración y los picos de limite de detección. Cuantificación e identificación aminoácidos, vitaminas, fármacos. Cromatografía capilar electrocinética micelar

22. Cromatografía capilar electrocinética micelar

23. Gabriel Hancu et al. (2012) Simultaneous separation of ciprofloxacin, norfloxacin and ofloxacin by micellar electrokinetic chromatography Journal Brazilian Chemical Society. University of Medicine and Pharmacy, Faculty of Pharmacy, Department of Pharmaceutical Chemistry http://www.scielo.br/scielo.php?pid=S010350532012001000018&script=sci_arttext fecha de consulta(10/03/2013) Hernandez M (2011) DESARROLLODEUN MÉTODO MEKC PARA LADETERMINACIÓN DE 5‐NITROIMIDAZOLES ENAGUASDE RÍO. Universidad de Granada. http://digibug.ugr.es/bitstream/10481/18247/1/MHM_2011.pdf fecha de consulta (10/03/2013) Skoog D (2008) Principios de Analisis Instrumental. 6° Edición. Cengage Learning Editores. México. J. Muntané Relat (2010) Introducción a la Investigación Básica. Liver Research Unit. Hospital Universitario Reina Sofía. Vol. 33 N° 3 http://www.sapd.es/revista/article.php?file=vol33_n3/03 fecha de consulta (10/03/2013) Bibliografía