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Estudio de Caso. Selection and characterization of BCR-ABL positive cell lines with differential sensitivity to the tyrosine kinase inhibitor STI571: diverse mechanisms of resistance BLOOD, 1 AUGUST 2000 • VOLUME 96, NUMBER 3. Leucemia Mieloide Cr ónica. Translocaci ón t(9;22)(q34;q11).
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Estudio de Caso Selection and characterization of BCR-ABL positive cell lines with differential sensitivity to the tyrosine kinase inhibitor STI571: diverse mechanisms of resistance BLOOD, 1 AUGUST 2000 • VOLUME 96, NUMBER 3
LeucemiaMieloideCrónica • Translocaciónt(9;22)(q34;q11)
LeucemiaMieloideCrónica Resultado: Gen BCR ABL
Gen BCR – ABL • La translocación genera unaproteínaquimérica (de la unificación del gen BCR y ABL), la cualocasionaunaproteína con actividadtirosinquinasadesregulada.
Desarrollo de medicamento • STI571, inhibidor de la tirosinquinasa, derivado del 2 –fenilaminopirimidina. Estainhibecompletamente el enlace entre el ATP y el dominio ABL en concentracionesmicromolares. Inhibetambién la mayoría de laslíneascelularescromosomafiladelfiapositivas. • Sin embargo, algunascolonias de sangreperiférica o médulaóseasobreviven a la presencia del compuesto.
Objetivo del Estudio • Investigar el mecanismo de resistencia a STI571 mediante la generación de sublineascelulares, resistentes y sensibles en diferenteslíneasfiladelfiapositivas. • Se observaráque se presentaunasobreexpresiónsignificativa del gen en variaslíneascelulares.
Metodología 1: Southern Blot • Presencia del Gen
Metodología 2: Northern blot • Expresión del gen: cADN o ARN.