1 / 32

PENGANTAR KROMATOGRAFI

PENGANTAR KROMATOGRAFI. Oleh: Purwadi, M.Si. UNIVERSITAS TULANG BAWANG, 2009. Purwadi, S.Si. M.Si. abuaidhan@yahoo.com. Graduated from: Master of Science with Cume Laude , School of Pharmacy - Institut Tecnology of Bandung, 2007

pekelo
Download Presentation

PENGANTAR KROMATOGRAFI

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. PENGANTAR KROMATOGRAFI Oleh: Purwadi, M.Si. UNIVERSITAS TULANG BAWANG, 2009

  2. Purwadi, S.Si. M.Si. abuaidhan@yahoo.com Graduated from: Master of Science with Cume Laude, School of Pharmacy - Institut Tecnology of Bandung, 2007 Bachelor of Science in Chemistry, University of Lampung, 1999 Office: NQCLDF in Bandar Lampung, Deputy of Technical Manager - Testing Laboratoria for Therapeutics, Narcotics, Traditional Drugs, and Complement Product Supervisor for Cosmetic and Forensic testing Laboratory

  3. Competence for: Gas Chromatography High Performance Liquid Chromatograpy UV/Vis Spectrophotometry Spectrophotodensitometry Spectrofluorometry Validation of Analysis Method ISO/IEC 17025-2005: Management & Technical Prerequirement for Testing Labotorium

  4. Materi : 14 kali Ujian : 2 kali (UTS & UAS) Total : 16 kali • Metode Belajar: Ceramah • Diskusi • Tugas Kehadiran mahasiswa minimum 75% Keterlambatan maximum 15 menit Mahasiwa diharap aktif mencari literatur,bertanya dan diskusi

  5. Metode Pemisahan Ilmu Pemisahan (Sparation Science): Ilmu yang mempelajari gejala fisika dan kimia yang terlibat dalam proses /pencapaian pemisahan, pengembangan & penggunaan berbagai proses pemisahan. Definisi Pemisahan menurut Karger: Cara kerja / pengerjaan sehingga suatu campuran dibagi menjadi sekurang-kurangnya 2 fraksi yang berbeda susunannya.

  6. Definisi Pemisahan menurut Rony: Kondisi hipotetik di mana setiap komponen kimia terisolasi sempurna dalam daerah makroskopik yang terpisah Hipotetik karena tidak mungkin mengisolasi komponen suatu campuran secara sempurna.

  7. Teknik Pemisahan • Ekstraksi Pelarut • Pengendapan • Kopresipitasi • Elektrodeposisi • Pertukaran ion • Adsorbsi/desorbsi • Volatilisasi (destilasi, sublimasi, dll) • Absorbsi

  8. i. Kromatografi, mekanisme: • > adsorbsi • > Partisi • > pertukaran ion • > eksklusi • > pengayakan molekul • > afinitas • Dialisis • Elektroforesis • ultrasentrifugasi 10000 15000 20000

  9. Cara memilih Teknik pemisahan • Pilih langkah terbesar pada step pertama jika mungkin termurah. Misal ekstraksi pelarut • Pilih proses pemisahan yang didasarkan pada perbedaan sifat fisika. Misal muatan (pertukaran ion), ukuran (filtrasi gel, sentrifugasi) • Pilih proses dimana mengeksploitasi perbedaan terbesar sifat fisika antara analit/produk dengan matriks/pengotor • Pilih langkah termahal pada saat terakhir, misal hplc

  10. Tujuan Pemisahan kimia: 1. Telaah Fitokimia -struktur Bahan alam simplisia Penapisan fitokimia Ekstraksi Ekstrak Fraksinasi Fraksi Pemisahan/ pemurnian Isolat Karakterisasi & Identifikasi Struktur kimia

  11. 2. Isolasi Senyawa Model /Lead Compound • - biasanya punya efek • - tidak harus dominan • Bahan Baku sediaan • Hasil ekstrak dapat digunakan untuk membuat sediaan • 4. Uji farmakologi  pada hewan coba

  12. Bahan alam Simplisia Ekstrak Uji efek Fraksi Fraksi Sub-fraksi Sub-fraksi Sub-fraksi Sub-fraksi Uji efek Isolat Isolat Isolat Isolat Uji efek

  13. Dalam teknik pemisahan, selalu terdapat fase-fase : • Fase 1 • Fase 2 Kecuali : elektroforesis dan ultrasentrifugasi hanya melibatkan satu fase.

  14. Nama fase dalam beberapa metode pemisahan Metode Fase 1 Fase 2 Kromatografi Diam Gerak Eksraksi Cair-Cair Rafinat Ekstraktan (yang sudah ada) (yang ditambahkan) Dialisis Retentat Difusat/dialisat (di tabung) (yang didialisa)

  15. Penggolongan Metode Pemisahan A. Berdasarkan Wujud Fase

  16. dengan Fase 1: fase awal /mengandung cuplikan sendiri Fase 2: fase yang ditambahkan / yang terbentuk

  17. B. Berdasarkan asal Fase 2

  18. C. Berdasarkan lama fase berkontak

  19. D. Berdasarkan arah fase berkontak diam Lawan arus: pada kenyataannya fase yang satu tidak bergerak, fase yang lain bergerak  lebih tepat disebut lawan arus semu (Pseudo counter current)

  20. E. Berdasarkan jenis proses

  21. Kromatografi • Merupakan salah satu teknik pemisahan kimia • Berkembang pesat => penemuan perangkat alat baru dan aplikasi baru • 3. Dikembangkan untuk analisis kualitatif, kuantitatif, dan preparatif

  22. Definisi Kromatografi • Menurut STAHL:Metode fisikokimia untuk memisahkan campuran zat berdasarkan perbedaan waktu huni (residence time) masing-masing zat dalam fase gerak-fase diam • Senyawa A lebih dulu keluar karena waktu huni < senyawa B Menurut Martin: Metode Fisikokimia yang memisahkan suatu campuran berdasarkan perbedaan perpindahan linarut dalam fase gerak-fase diam => Senyawa A lebih dulu keluar karena bergerak lebih cepat dari senyawa B

  23. Sejarah kromatografi

  24. Pemakaian Kromatografi: • Analitik: = Kualitatif: Mengetahui identitatas suatu analit = kuantitatif : menentukan kadar analit • Preparatif: = untuk mendapatkan komponen murni

  25. Penggolongan kromatografi: • Berdasarkan fase gerak • => kromatografi cair: KLT, KK, KKt, KCKT • => Kromatografi gas: KGC, KGP • b. Berdasarkan fase diam • => kromatografi Cair-Cair: KKt, KCKT • => Kromatografi Cair-Padat: KLT, KK, KCKT

  26. c. Berdasarkan penampang fase diam: => kromatografi datar / planar: KLT, KKt => kromatografi kolom: KK, KGC, KGP, KCKT

  27. d. Kromatografi berdasarkan proses/mekanisme yang terjadi => Partisi => Adsorbsi => Pasangan Ion => Kromatografi Penukar Ion => size eksklusi => Permeasi gel => Filtrasi gel => afinitas biologi

  28. Teori Kromatografi • Pemisahan dalam kromatografi terjadi karena • Perbedaan kecepatan migrasi dari berbagai komponen dalam campuran • Dengan kata lain, pemisahan terjadi karena perbedaan waktu tambat masing-masing analit dalam fase diam • Penyebaran komponen campuran sepanjang fase diam

  29. Sampel campuran Arah aliran fase gerak Kolom / fase diam Analit dengan migrasi paling cepat

  30. Mengapa terjadi Perbedaan kecepatan migrasi ? Dalam sistem kromatografi masing-masing analit akan terdistribusi antara fase diam dan fase gerak sehingga membentuk kesetimbangan. Jumlah distribusi analit di antara 2 fase ditentukan oleh konsntanta distribusi (Kd): Kd A = [A]d / [A]g [A]d = konsentrasi analit A dalam fase diam [A]g = konsentrasi analit A dalam fase gerak

  31. Jika Kd besar konsentrasi analit dalam fase diam lebih besar dari pada dalam fase gerak • Senyawa A lebih lama tinggal dalam fase diam KD kecil KD besar

  32. Ada pertanyaan???

More Related