Isolatie van DNA uit kiwi

1. Isolatie van DNA uit kiwi • Hak kiwi fijn in een bekerglas. • Voeg 3 g keukenzout toe en 10 ml detergent. • Voeg al roerend 100 ml water toe. • Detergent vormt een complex met membraanfosfolipiden. • Na+-ionen van het keukenzout binden met de negatief • geladen fosfaatgroepen van het DNA.

2. Isolatie van DNA uit kiwi • Zet het mengsel 15 min in een waterbad van 60 °C. • De hoge temperatuur denatureert de DNAse enzymen die normaal het DNA zouden knippen.

3. Isolatie van DNA uit kiwi • Koel 5 min af in en ijswaterbad. • Afkoelen in een ijswaterbad voor 5 min vertraagt de afbraak van het DNA. • Mix alles krachtig gedurende 5 s. • Kort mixen doet de celwanden en het celmembraan verder afbreken waardoor het DNA vrijkomt zonder zelf af te breken.

4. Isolatie van DNA uit kiwi • Giet het mengsel door een filter in een reageerbuis. Let er op dat er geen schuim meekomt. • Druppel voorzichtig 9 ml ijsgekoelde alcohol langs de wand van de reageerbuis.

5. Isolatie van DNA uit kiwi • Er verschijnen witte draden op de grenslaag tussen alcohol en het mengsel. DNA is onoplosbaar in ijskoude ethanol. Dus deze draden zijn DNA moleculen • Zuig met een pipet de witte dradige massa op en laat ze uitvlokken in een 4 % zoutoplossing. Er ontstaat een wit neerslag.

6. Isolatie van DNA uit kiwi • Breng met een pasteurpipet wat van de neerslag op een wit papiertje en voeg er universeel indicator aan toe. DNA is een zuur!

7. a ~ F mw totale massa = massa wagentje + aandrijfmassa totale massa blijft constant ma versnelling van het wagentje ~ aandrijfkracht a = ma.g/ (mw + ma)

8. a ~ 1/m mw totale massa = massa wagentje + aandrijfmassa De aandrijfkracht blijft constant ma versnelling van het wagentje ~ 1/massa a = ma.g/ (mw + ma)

9. Tweede beginsel van Newton a ~ F a ~ 1/m a = k.F/m k = 1 F = m.a