1 / 25

Sampel

Sampel. Pengotor. Analit. Endogen. Eksogen. Sensitivitas & Selektivitas. PENANGANAN SAMPEL. Pemurnian sampel. Pemurnian awal. Presipitasi / denaturasi protein .... (1). Protein  pengotor endogen : Mengikat obat  hasil analisis tidak valid Merusak alat (kolom HPLC)

rinah-hicks
Download Presentation

Sampel

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Sampel Pengotor Analit Endogen Eksogen Sensitivitas & Selektivitas PENANGANAN SAMPEL

  2. Pemurnian sampel

  3. Pemurnian awal

  4. Presipitasi / denaturasi protein .... (1) • Protein  pengotor endogen : • Mengikat obat  hasil analisis tidak valid • Merusak alat (kolom HPLC) • Presipitasi / denaturasi protein Perusakan ikatan antara protein dg obat / metabolitnya

  5. Presipitasi / denaturasi protein .... (1)

  6. Sampel Metanol Asetonitril Sentrifuge Endapan Supernatan Pemanasan Sentrifuge Endapan Supernatan Presipitasi / denaturasi protein .... (1)

  7. Atur pH Obat terionisasi Ekstraksi dg pelarut organik Fase organik / hidrofobik : hidrokarbon Fase hidrofilik : Obat terionisasi Ekstraksi pelarut untuk menghilangkan seny hidrokarbon

  8. Liofilisasi ... (1) • Alasan pemilihan liofilisasi : • Air sangat banyak, analit sangat larut air shg tidak dapat dipisahkan secara ekstraksi pelarut • Analit mudah menguap & rusak oleh pemanasan • Contoh : • Feses  mengandung mikroflora yang merusak analit pada suhu kamar • Feses  liofilisasi  serbuk  larutkan dengan pelarut yg sesuai  ekstraksi

  9. Sampel dibekukan Lyophilizer Uap air divacum Padatan kering Sublimasi Larutkan dg pelarut yg sesuai Liofilisasi ... (2)

  10. Hidrolisis konjugat • Hidrolisis dengan penambahan enzim

  11. Homogenisasi

  12. Derivatisasi kimia • Obat / metabolit  ekstraksi  rusak • Derivat obat / metabolit  ekstraksi  tidak rusak • Hidralazin  ekstraksi pelarut organik (pH basa)  rusak • Hidralazin + NaNO3 (pada pH asam)  tetrazolo (1,5a) phthalazin  ekstraksi pelarut organik (pH basa)  tidak rusak

  13. Ekstraksi • Pemisahan senyawa berdasarkan perbedaan kelarutan • Ekstraksi padat – cair • Pemisahan senyawa menggunakan kolom kromatografi. • Pemisahan didasarkan perbedaan kelarutan dalam fase gerak (pelarut) • Parameter : konstanta distribusi (KD) • Ekstraksi cair – cair

  14. Konstanta Distribusi (KD) • KD = [Vlarutan x Wsolutdalam fase diam] [Wfasediam x Wsolutdalam larutan] • Nilai KD dipengaruhi oleh : • Polaritas pelarut • Kecepatan aliran larutan • Kontak larutan dengan fase diam

  15. Ekstraksi cair – cair ... (1) • Pemisahan didasarkan perbedaan kelarutan senyawa pada pelarut organik & air. • Parameter : koefisien partisi (P) • P = Corganik / Cair • Faktor yang mempengaruhi P • Pelarut yang digunakan • pH • Derajat ionisasi

  16. Darah utuh Sentrifuge serum protein CHCl3 analit protein CHCl3 uapkan analit Ekstraksi cair – cair ... (2)

  17. Solid Phase Extraction (SPE) • Teknik SPE digunakanuntukpra-perlakuansampelatau clean-up sampel-sampel yang kotorsepertisampeldengankandunganmatriks yang tinggisepertigaram-garam, protein, polimer, resin dll. • Efisiensi SPE dapatmemperoleh recovery yang tinggi (>99 %).

  18. Tahapan SPE

  19. KLT • Fase diam : padat • Fase gerak : cair • Pemisahan senyawa • Analisis kualitatif & kuantitatif (kurang sensitiv)

  20. GC • Fase diam : padat / cair • Fase gerak : gas inert • Analisis kualitatif & kuantitatif • Untuk pemeriksaan zat yang volatil & tahan panas

  21. HPLC • Fase diam : padat • Fase gerak : cair • Analisis kualitatif & kuantitatif • Untuk pemeriksaan zat yang tidak tahan panas & tidak volatil

  22. Gel Permeation Chromatography (GPC) • Pemisahan berdasar perbedaan ukuran partikel • Fase diam : gel • Gel berupa butiran – butiran berpori (dekstran, poliakrilamid, polistiren) • Fase gerak : cair • Contoh : pemisahan makromolekul (lemak, protein, garam) dari sampel

  23. TUGAS KELOMPOK PEKAN DEPAN • Buatlah presentsi kelompok (@ ±5 orang) dengan durasi 15 menit mengenai prosedur ekstraksi untuk obat dan atau metabolitnya dalam sampel biologis beserta contoh penerapannya. • Sub tema pilihan : • Metode ekstraksi padat-cair • Metode ekstraksi cair-cair • Metode kromatografi • Metode radiokimia • Metode spektroskopi

  24. HATUR NUHUN PISAN .... Jangan lupa untuk mencari tambahan informasi dari berbagai sumber lainnya...

More Related