Aluno: Leandro Ucela Alves Orientador: Profa. Dra. Adriana Madeira Alvares da Silva

1. AVALIAÇÃO DA EXPRESSÃO DO RECEPTOR DE LEPTINA COMO CANDIDATO A MARCADOR DE AGRESSIVIDADE TUMORAL EM PACIENTES COM CARCINOMA EPIDEMÓIDE DE BOCA E OROFARINGE Aluno: Leandro Ucela Alves Orientador: Profa. Dra. Adriana Madeira Alvares da Silva Co-orientador: Profa. Ms. Ana Maria da Cunha Mercante 2009

2. INTRODUÇÃO CARCINOMA EPIDERMÓIDE DE BOCA E OROFARINGE • Representa 90% dos tumores das vias aerodigestivas superiores. • Considerado o 6º tipo de câncer mais frequente no mundo. • Com média anual de 540.000 casos e 271.000 mortes. • Forte relação com o etilismo e tabagismo. • Atualmente foi descrito relação com o vírus HPV.

3. INTRODUÇÃO LEPTINA (Lep) E RECEPTOR DE LEPTINA (Lepr) • A Leptina (Lep) é produzida predominantemente pelo tecido adiposo branco. • Sempre atua através de seu receptor (Lepr) • A ligação entre a proteína e seu receptor no hipotálamo, sinaliza as condições de reserva de gordura corporal. • Por mecanismos de feedback, essa ligação controla a ingestão de alimentos e o peso corporal, estimulando a saciedade

4. INTRODUÇÃO LEPTINA (Lep) E RECEPTOR DE LEPTINA (Lepr) Estão associados também aos processos de: • Crescimento e mitogênese • Angiogênese • Resposta imunológica e inflamatória • Reprodução • Formação dos tornos musculares • Hematopoiese • Formação dos ossos • Cicatrização

5. INTRODUÇÃO VIAS DE SINALIZAÇÃO DA LEPTINA

6. INTRODUÇÃO LEPTINA E TECIDOS NORMAIS E NEOPLÁSICOS • Atua no crescimento, ploriferação e migração das células endoteliais. • Estimula genes responsáveis pela promoção da angeogênese, aumentando a vascularização endotelial. • Associada a diversas neoplasias como o câncer de mama, colo, fígado e próstota.

7. OBJETIVOS • Avaliar a expressão do gene LEPR através da técnica de imunohistoquímica em carcinoma epidermóide de boca e orofaringe. • Relacionar a expressão do gene LEPR com a agressividade tumoral medida pelo TNM e histologia. • Relacionar a expressão do gene LEPR com a sobrevida global e livre de doença nos pacientes com carcinoma epidermóide de boca e orofaringe.

8. LOCAL DE ESTUDO E PACIENTES • O trabalho foi desenvolvido no Laboratório de Biologia Molecular em parceria com o Serviço de Patologia, ambos do Hospital Heliópolis. • Foram estudados 85 pacientes com carcinoma epidermóide de boca e orofaringe, sem tratamento prévio, tratados no Serviço de Cirurgia de Cabeça e Pescoço do Hospital Heliópolis.

9. EPIDEMIOLOGIA Dados Epidemiológico dos 85 pacientes diagnosticados com carcinoma epidemóide de boca e orofaringe

10. MATERIAIS E MÉTODOS HISTOLOGIA • Pelo método de coloração de hematoxilina-eosina (HE) as lâminas foram analisadas, avaliando suas características histológicas como: • Grau de diferenciação • Desmoplasia • Intensidade de inflamação • Invasão vascular linfática • Invasão vascular sanguínea • Invasão perineural • Necrose

11. Foto de lâmina em H&E no aumento de 100 x demonstrando um carcinoma bem diferenciado segundo a sua atipia nuclear e queratinização celular.

12. Foto de lâmina em H&E no aumento de 400 x demonstrando uma desmoplasia leve.

13. Foto de lâmina em H&E no aumento de 100 x mostrando um infiltrado inflamatório moderado.

14. Foto de lâmina em H&E no aumento de 100 x mostrando uma invasão vascular linfática do carcinoma epidermóide.

15. Foto de lâmina em H&E no aumento de 100 x mostrando uma invasão vascular sanguínea do carcinoma epidermóide.

16. Foto de lâmina em H&E no aumento de 400 x mostrando uma invasão perineural

17. MATERIAIS E MÉTODOS IMUNOHISTOQUÍMICA • Pelo método de imunohistoquímica (anticorpo anti-Obr) os materiais foram avaliadas segundo a intensidade da marcação, classificadas segundo: • Intensidade de marcação. • Frequência de células tumorais. • A lâmina com os materiais dos pacientes foi confeccionada pela técnica de tissue microarray

18. Foto da lâmina da reação do Lepr, contra-corada com hematoxilina no aumento de 100 x, mostrando uma marcação de leve intensidade (marrom).

19. Foto da lâmina de reação do Lepr, contra-corada com hematoxilina no aumento de 100x, mostrando uma marcação de forte intensidade (marrom).

20. RESULTADOS Expressão do anticorpo anti-Lepr (n=85)

21. RESULTADOS Categorização do Lep-R: positivo x negativo

22. RESULTADOS Categorização do Lep-R: positivo x negativo

23. RESULTADOS Categorização do Lep-R: forte x fraco

24. RESULTADOS Categorização do Lep-R: forte x fraco

25. RESULTADOS Análise da sobrevida global para os pacientes com expressão positiva (verde) e negativa (vermelho) do gene LEP-R, considerando um período de 48 meses (Wilcoxon p = 0,787).

26. RESULTADOS Análise da sobrevida global para os pacientes com expressão positiva fraca (verde) e forte (vermelho) do gene LEP-R, considerando um período de 48 meses (Wilcoxon p = 0,406).

27. RESULTADOS Análise da sobrevida livre de doença para os pacientes com expressão positiva (verde) e negativa (vermelho) do gene LEP-R, considerando um período de 48 meses (Wilcoxon p = 0,617).

28. RESULTADOS Análise da sobrevida livre de doença para os pacientes com expressão positiva forte (verde) e fraca (vermelho) do gene LEP-R, considerando um período de 48 meses (Wilcoxon p = 0,871).

29. CONSIDERAÇÕES FINAIS • Não foi detectado associação entre a expressão do receptor de Leptina e o carcinoma epidermóide de boca e orofaringe. • Também não se encontrou associação entre a presença do receptor nas sélulas neoplásicas com a sobrevida global e livre de doença dos pacientes • Novos resultados podem ser obtidos se estudos posteriores analisar as margem tumoral. • O número de casos também pode influenciar esses resultados.

30. Hospital Heliópolis Biologia Molecular AGRADECIMENTOS