F. Parant 1 , M.A. Piens 2 , H. Raberin 3 , J. Perry 4 , A.M. Freydière 1

1. Laboratoire C Microbiology Department, Freeman HospitalNewcastle upon Tyne, UK Laboratoire B Laboratoire de Parasitologie Mycologie Médicale Hôpital Nord, St Etienne Laboratoire A Laboratoire de Parasitologie Mycologie Médicale Lyon Identification conventionnelle :ID 32C Identification conventionnelle :ID 32C Identification conventionnelle :ID 32C Prélèvements ensemencés : Prélèvements ensemencés : Prélèvements ensemencés : Milieu :Candida ID (bioMérieux) Souches testées : Milieu :CHROMagar Candida (Becton Dickinson) Souches testées : Milieu :Albicans ID2 (bioMérieux) Souches testées : * 1 C. rugosa, 1 C. holmii, 1 C. lypolitica, 1 C. norvegensis, 1 Lyposaccharomyces Test Tréhalose-Maltose Test positif (+) Test négatif (-) ouininterprétable (I) Témoin - Tréhalose + Maltose - Témoin + Tréhalose +/- Maltose +/- Identification Candida glabrata Identification par méthode conventionelle Témoin - Tréhalose + Maltose + Société Française de Mycologie Médicale, 15-17 Mai 2002, Lyon, France E-mail : am.freydiere@chu-lyon.fr Utilisation du test tréhalose-maltose pour l’identification de Candida glabrata dans 3 laboratoires de diagnostic F. Parant1, M.A. Piens2, H. Raberin3, J. Perry4, A.M. Freydière1 1Laboratoire de Microbiologie, Hôpital Debrousse, Lyon, 2Laboratoire de Parasitologie Mycologie Médicale, Lyon, France 3 Laboratoire de Parasitologie Mycologie, Hôpital Nord, St Etienne, France, 4Microbiology Department, Freeman Hospital, Newcastle upon Tyne, UK. Introduction Candida glabrata, une des espèces de Candida parmi les plus fréquemment isolées, a souvent une sensibilité diminuée au fluconazole. L’identification rapide de cette espèce par le laboratoire permet au clinicien une adaptation plus rapide de l’antifongithérapie. Un test tréhalose-maltose sur bandelettes, basé sur l’hydrolyse rapide du tréhalose et l’absence d’hydrolyse du maltose, ne nécessitant aucune incubation préalable et utilisant seulement 2 à 3 colonies de levures, a été décrit récemment par Parant et al.(5). Evalué avec plus de 400 souches de collection, ce test a montré des résultats de sensibilité et de spécificité supérieurs à 95 % quelque soit le milieu de subculture (Parant et al. Poster congrès SFMM 2001 à Amiens, 3). Le but de cette étude est d’évaluer ce test tréhalose-maltose dans les conditions réelles d’utilisation en routine de trois laboratoires de diagnostic. Matériels et méthodes Résultats - Discussion • Tableau 1 : Comparaison des résultats d’identification conventionnelle et du test tréhalose-maltose pratiqué avec des isolats subcultivés sur des milieux chromogènes différents dans 3 laboratoires. a 2 souches de C. parapsilosis, 1 de C. tropicalis et 1 de C. kefyr, b 1 souche de C. parapsilosis Le test tréhalose-maltose effectué par des personnes différentes, dans 3 laboratoires différents, sur des isolats d’origines diverses et cultivés sur des milieux chromogéniques différents, montre des résultats de sensibilité supérieure à 94 % et une spécificité supérieure à 95 %. Ces résultats obtenus avec des isolats provenant pour la plupart d’un primo-isolement sont très proches de ceux obtenus précédemment avec des souches de collection (3, 5). Comparativement aux galeries d’identification biochimiques classiques telles que API20C AUX, Vitek YBC (2),etaux méthodes génétiques (1), le test au tréhalose-maltose permet l’identification de C. glabrata de façon fiable (spécificité comparable aux autres techniques) avec un délai de réponse plus court (quelques minutes) et un coût moindre. L’association du test tréhalose-maltose aux milieux chromogéniques Candida ID ou Albicans ID2 permet l’identification très rapide de 80 % des levures isolées au laboratoire. Seules 20 % des levures nécessitent alors une galerie d’identification biochimique. Dans des études précédentes (Parant et al. Poster congrès SFMM 2001 à Amiens, 5), le test tréhalose-maltose effectué avec les souches cultivées sur CHROMagar Candida de CHROMagar Microbiology donnaient des résultats de sensibilité et de spécificité faibles. Par contre, dans cette étude, le test tréhalose-maltose effectué avec des souches cultivées sur le milieu CHROMagar Candida de Becton Dickinson modifié selon Jabra-Rizk et al.(4) donne de bons résultats à condition d’utiliser des cultures de 48 h. • Conclusion • Avec ce test,le laboratoire de diagnostic peut identifier Candida glabrata:de façon fiable, simple, économique en deux minutes directement à partir du primo-isolement • ce qui permet l’instauration rapide d’un traitement adapté. Références 1- Chang, H.C., S.N. Leaw, A.H. Huang, T.L. Wu, and T.C. Chang. 2001. Rapid identification of yeasts in positive blood cultures by a multiplex PCR method. J. Clin. Microbio. 39:3466-3471. 2- Freydiere, A. M., R. Guinet, and P. Boiron. 2001. Yeast identification in the clinical microbiology laboratory: phenotypical methods. Med. Mycol. 39:9-33. 3- Freydière A.M.,F. Parant, F. Noel-Baron, M. Crepy, A. Treny, H. Raberin, A. Davidson, F.C. Odds. 2002. Identification of Candida glabrata by a 30-second trehalase test. J. Clin. Microbiol. (In press) 4- Jabra-Rizk, M. A., T. M. Brenner, M. Romagnoli, A. A. M. A. Baqui, W. G. Merz, W. A. Falkler, and T. F. Meiller.2001. Evaluation of a reformulated CHROMagar Candida. J. Clin. Microbiol. 39:2015-2016. 5- Parant, F., A. M. Freydiere, Y. Gille, P. Boiron, and F. C. Odds. 2001. A 'one minute' trehalase detection test for the identification of Candida glabrata. J. Mycol. Med. 11:26-31. Nous remercions les techniciens des 3 laboratoires pour leur assistance, Bayer Diagnostics et Eurobio pour la fourniture gratuite des réactifs, ICN Pharmaceuticals France pour son soutien à la réalisation du poster et A. Frangin pour sa collaboration.