1 / 21

Bioaktív komponensek kimutatása növényi mintákból

Bioaktív komponensek kimutatása növényi mintákból. Dr. Remenyik Judit PhD (Kertészettudományi és Növényi biotechnológia Tanszék Biokémiai és molekuláris diagnosztikai laboratórium). Mérés menete. Mintavétel Minta tárolás Minta előkészítés Mérés. Mintavétel.

sol
Download Presentation

Bioaktív komponensek kimutatása növényi mintákból

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Bioaktív komponensek kimutatása növényi mintákból Dr. Remenyik Judit PhD (Kertészettudományi és Növényi biotechnológia Tanszék Biokémiai és molekuláris diagnosztikai laboratórium)

  2. Mérés menete • Mintavétel • Minta tárolás • Minta előkészítés • Mérés

  3. Mintavétel • Adott fajra, fajtára jellemző legyen • Adott termőhelyre jellemző legyen • Nagy számú/ nagy tömegű egyed gyűjtése • Homogenizálás • A minta tárolása • A minta szállítása

  4. A minta tárolása Minden esetben a mérendő komponenstől függ! • +8 °C • -20°C • Liophilizálás • - 70 °C

  5. A minta előkészítése • Homogenizálás • Feltárás • Kioldás • Szűrés , tisztítás

  6. Bioaktív komponensek • Cukor tartalom- egyszerű cukrok (glükóz, fruktóz szacharóz ) • Savtartalom (almasav, citromsav) • Fehérje tartalom • Rost tartalom (oldhatatlan, oldható) • Szárazanyag • Nitrát tartalom

  7. Bioaktív komponensek • Antioxidáns sűrűség meghatározás Vízoldékony- és zsíroldékony antioxidánsok • Vízoldékony antioxidánsok: • C-vitamin • Antioxidáns fehérjék (enzimek) • Vízoldékony színanyagok (antocianinok, flavonoidok) • B-vitaminok • Galluszsav

  8. Bioaktív komponensek 2. Zsíroldékony antioxidánsok • Karotinoidok • Tokoferolok • Szabad zsírsavak d. Izoprén származékok e. Klorofollok • Polifenolok • A-vitamin

  9. Laboratoriumunkban vizsgált komponensek

  10. Laboratoriumunkban vizsgált komponensek

  11. Laboratoriumunkban vizsgált komponensek

  12. Laboratoriumunkban vizsgált komponensek α-tokoferol: R1,R2,R3=CH3 ß-tokoferol: R1,R3=CH3; R2=H γ-tokoferol: R2,R3=CH3; R1=H δ-tokoferol:R3=CH3; R1,R2=H

  13. Antioxidáns kapacitás mérése kemiluminométerrel

  14. A mérés elve 1.A fotoérzékeny vegyületet hν energiával besugározzuk. S+ hv→ S.+ + O2.- A O2.- reagálnak a minta antioxidáns anyagaival. 2.A detektor vegyület lép ezután reakcióba a maradék O2.- . O2.- + D → hv 3. A kisugárzott energiát méri a detektor.

  15. Minták adatanalízise (ACW)

  16. Minták adatanalízise (ACL)

  17. Spektrofotometria A fényintenzitás változását mérjük. Az UV-VIS tartományban az anyagok szelektíven adszorbeálják a fényt. A= ε*c*l A mérést minden estben az adszorpciós maximumon mérjük. Hibalehetőségek: Fényszóródás, oldószerpárolgás A ε nem helyes meghatározása .

  18. Mérés 1.C-vitamin tartalom meghatározása • 3.4. A C-vitamin (L-aszkorbinsav)

  19. A mérés alapja • Erősen redukáló hatású Fe3+ → Fe2+ Fe2+ színes komplexet képeznek az α,α, dipiridil reagenssel Fotometriás meghatározás • Látszólagos C-vitamin tartalom • Reduktonok • Valódi C-vitamin tartalom

  20. NAGYHATÉKONYSÁGÚ FOLYADÉKKROMATOGRÁFIAMŰSZER oszlop: (kolonna)  felépítése: minta  töltet: szilikagél (módosított), adszorbens, ioncserélő, gél,… szűrő előkolonna:  hőfok: szobahőmérséklet (!) 25 °C mozgófázis:  oldószerek, oldószer-keverékek folyadék főkolonna HPLC-készülék felépítése: 4. oszlop detektor 2. pumpa 1. eluens (mozgófázis) 6. rekorder 3. mintaadagoló (minta) 5. detektor  nagy nyomás biztosításához pumpa:  „pulzálás-mentes” (több pumpa)  fecskendő  szelepes megoldás mintabevitel:  UV spektrofotometriás, fluoreszcencia, vezetőképességi, tömegspektrometriás,.. detektor: UV-detektor I. oszlopkromatográfia: 1. klasszikus, 2. GC, 3. HPLC, 4. ionkr. II. rétegkromatográfia : 1. papírkr. 2. vékonyrétegkr.

  21. A kromatogram értékelése

More Related