ANALISIS SPERMA

1. ANALISIS SPERMA Oleh ARNI AMIR

2. I. Pemeriksaan Semen • Prosedur Standar • Penampungan dan pengiriman sampel • Sebaiknya subyek dibekali dengan lembaran instruksi tertulis yang jelas berhubungan dengan cara koleksi dan transportasi semen. • Sebaiknya sampel dikeluarkan dan ditampung setelah abstinensi seksual (puasa berhubungan suami istri) sedikitnya 48 jam dan paling lama 7 hari. • Untuk evaluasi awal sedikitnya diperlukan dua kali pemeriksaan • Sebaiknya sampel dikumpulkan diruang khusus didekat laboratorium • Sampel didapat dengan cara masturbasi

3. Lanjutan ……… • Kondom yang terdapat dipasaran tidak bole digunakan karena dapat menyebabkan kematian spermatozoa (berisi spermisid) • Sample harus dilindungi terhadap perubahan temperatur yang ekstrim (kurang dari 200C atau lebih dari 400C) • Botol harus diberi label nama, tanggal dan waktu p engeluaran, serta lama abstinensi • Keamanan dalam penanganan sampel • Teknisi laboratorium harus hati – hati terhadap sampel semen yang mungkin mengandung virus – virus yang berbahaya (HIV, Hepatitis dan Herpes)

4. Lanjutan ……… • Pemeriksaan Makroskopis • Pemeriksaan awal melalui pengamatan fisik sampel • Pengamatan dilakukan pada suhu kamar, dimana dinilai warna, bau, koagulasi dan likuefaksi, volume, konsistensi dan pH • Warna Sperma • Warna sperma yang “normal” (mengandung spermatozoa) adalah putih keabuan/ putih mutiara • Pada keadaan Azoospermia atau ekstrim olipozoospermia akan berwarna putih jernih • Bau Sperma • Khas, seperti bunga akasia. • Bau – bau lain seperti amis, busuk dapat dicurigai adanya lokosit (infeksi) atau sebab – sebab lain (parasit)

5. Lanjutan ……… • Koagulasi dan Likuefaksi • Setelah dikeluarkan, semen akan mengalami proses koagulasi (terbentuknya koagulum yang disebabkan oleh protein – protein yang dihasilkan oleh kelenjar vesika seminalis • Selanjutnya akan mengalami pencairan (likuefaksi), menjadi homogen dalam waktu 60 menit • Volume • Data diukur dengan gelas ukura atau dengan pipet khusus • Konsistensi • Dulu digunakan istilah Viskositas • Pengukuran konsistensi dikerjakan dengan menekan keluar sampel lewat Jarum 21G • Observasi bentuk yang keluar, berupa tetesan, atau benang yang keluar dari ujung jarum.

6. Lanjutan ……… • Cara pengukuran konsistensi : • Semen dihisap sampai tanda 0,1 ml, ujung B ditutup dengan jari telunju, dipegang tegak lurus. • Tangan kiri memegang stopwatch. Bersamaan dengan dibukanya tutup ujung jari, stopwatch ditekan. • HItung waktu jatuhnya tetesan pertama, normal 2 detik • Cara lain dengan menggunakan batang pengaduk gelas • Celupkan batang pengaduk kedalam semen, angkat dan perhatikan tetesan/ benang cairan yang terjadi • Normal tetesan/ benang yang terjadi tidak melebihi 2 cm

7. Lanjutan ……… • pH sperma • Teteskan 1 tetes semen keatas kertas pH ( 6,4 – 8,0). • Setelah 30 detik bandingkan dengan warna standar • pH harus diperiksa dalam waktu 1 jam setelah semen dikeluarkan • Nilai normal : >7.2 (WHO 92;7.2 -8.0) (WHO 87 :7.2 -7-8)

8. Lanjutan ……… • Pemeriksaan Mikroskopis • Pemeriksaan mikroskopis semen dilakukan dengan preparat basah dan preparat hapus. • Pada pemeriksaan preparat basah, penilaian meliputi : motilitas spermatozoa perkiraan konsentrasi (memperkirakan jumlah spermatozoa per lapang pandang besar (400 x), adanya sel – sel lain (epitel, sel bulat, parasit, bakteri, kristal dan sebagainya dan ada/ tidaknya aglutinasi • Perkiraan Konsentrasi Spermatozoa • Perkiraan konsentrasi spermatozoa secara kasar ini dilakukan dengan memperkirakan/ menghitung jumlah rata – rata spermatozoa pada beberapa lapang pandang (400x) danhasilnya dikalikan dengan 105 • Misalnya didapatkan jumlah rata – rata spermatozoa 40/LPB, maka perkiraan konsentrasi : 40 x 105 = 4.106/ml

9. Lanjutan ……… • Pemeriksaan Motilitas Spermatoza • Persiapan • Satu tetes semen (10 – 15 L) diteteskan dengan mikropipet atau melalui jarum 21G pada kaca objek dan ditutup dengan kaca penutup ukuran 22 c22 mm • Preparat diperiksadibawah mikroskop pada pembesaran 400 x • Penilaian • Pemeriksaan perlu dilakukan pada beberapa lapang pandang ( 4 -6 LPB). Pergerakan spermatozoa dapat diklasifikasikan dalam 4 golongan : a, b, c dan d a : gerak spermatozoa maju kedepan, cepat dan lurus b : gerak spermatozoa maju, lambat atau berkelok c : tidak ada gerak maju kedepan, bergetar ditempat, gerak melingkar d : tidak bergerak sama sekali

10. Lanjutan ……… • Perhitungan gerak spermatozoa dinyatakan dalam persentase a = …..% b = …..% c = …..% dan d = …..% • Pemeriksaan Mikroskopis Lanjutan • Pemeriksaan Vitalis Spermatozoa • Pewarnaan vital • Pada sel yang mati akan terjadi kerusakan membran plasma dan selanjtunya akan menyerap zat warna • Sedikit dihitung 100 spermatozoa yang menyerap zat warna (mati) dan yang tidak menyerap warna (hiduo) • Teknik ini dapat dibedakan berapa persen spermatozoa immotil yang hidup dan mati

11. Lanjutan ……… • Uji Pembengkakan hipoosmotik (UPHO) • Dasar dari UPHO ini adala membran yang semi permiabel pada sel akan menyerap air dan menyebabkan terjadinya pembengkakan sel (drevius & Eriksson, 1966) • UPHO pertama kali diperkenalkan oleh Jeyendran dkk (1984) • Spermatozoa yang utuh (hidup) dalam cairan hipoosmotik akan mengalami pembengakan dan ini jelas terlihat pada ekornya • Pembengkan ini menyebabkan ekor berbentuk koil • Penghitungan jumlah spermatozoa • Konsentrasi spermatozoa (jumlah spermatozoa (ml), ditentukan dengan menggunakan hemositometer. • Sampel harus trecampur merata sebelum dilakukan penghitungan. • Pengenceran dapat dilakukan 1/10, 1/20/, 1/100, 1/200 tergantung dari jumlah spermatozoa pada pemeriksaan awal

12. Lanjutan ……… • Pemeriksaan Morfologi Spermatozoa • Klasifikasi morfologi spermatozoa manusia • Kategori kelainan yang perlu dihitung • Kepala • Leher dan Midpiece • Kelainan ekor • Butir sitoplasma