110 likes | 248 Views
Ścieżka Mos/MAPK jako regulator rozmiaru i procesu degeneracji pierwszego ciałka kierunkowego podczas dojrzewania mysich oocytów. Protoonkogen mos koduje kinazę serynowo-treoninową a Mos jest eksprymowany w dużych ilościach w oocytach podlegających dojrzewaniu mejotycznemu.
E N D
Ścieżka Mos/MAPK jako regulator rozmiaru i procesu degeneracji pierwszego ciałka kierunkowego podczas dojrzewania mysich oocytów
Protoonkogen mos koduje kinazę serynowo-treoninową a Mos jest eksprymowany w dużych ilościach w oocytach podlegających dojrzewaniu mejotycznemu • W oocytach Xenopus Mos : • jest inicjatorem mejozy • jest zaangażowany w aktywację i stabilizację MPF • aktywuje MAPK • to aktywny składnik kompleksu CSF • udowodniono również wzajemną zależność między szlakiem Mos/MAPK a MPF
Schemat potencjalnego działania czynnika cytostatycznego (CSF) MOS cdc2 MEK1 Cyklina B Kinaza MAP CSF cdk2 cdc2 Cyklina E Cykli na B
U homozygotycznych mutantów MOS-/-: • Dojrzewanie oocytów nie ulega zahamowaniu na etapie metafazy II • ale są pobudzane do partenogenezy • MAPK nie jest aktywna podczas dojrzewania oocytów • aktywność MPF utrzymuje się na prawidłowym poziomie, aż do przejścia metafaza-anafaza, kiedy to jest on inaktywowany i degradowany • pierwsze ciałko kierunkowe jest nieprawidłowo duże i czasem przechodzi dodatkowy podział (przypominający mitozę) zamiast zostać zdegradowane
Materiał i metody • Otrzymanie myszy pozbawionych obu prawidłowych alleli genu mos (MOS-/-) za pomocą metody gene knockout • Otrzymanie i hodowla oocytów • sprawdzenie in vitro aktywności kinazowej MAPK i histonu H1 • wykorzystanie metody immunocytochemicznej w celu wizualizacji wrzeciona kariokinetycznego podczas I podziału mejotycznego
Wyniki i wnioski • MAPK nie wykazuje aktywności w dojrzewających oocytach myszy MOS-/- • Aktywacja MAPK podczas dojrzewania oocytów zależy od obecności aktywnego czynnika Mos • W przeciwieństwie do Xenopus, aktywacja MPF i regulacja jego aktywności wydają się być niezależne od obecności Mos i/lub MAPK • Pierwsze ciałko kierunkowe tworzy się w sposób nieprawidłowy • Przy braku aktywacji szlaku Mos/MAPK wrzeciono kariokinetyczne nie może się ustawić w prawidłowej pozycji podczas podziału komórki jajowej • Zatem szlak Mos/MAPK bierze udział w pozycjonowaniu wrzeciona podziałowego
Wyniki i wnioski c.d. • Występuje brak zaniku pierwszego ciałka kierunkowego w oocytach MOS-/- • U MOS-/- pierwsze ciałko kierunkowe utrzymuje się 11 godzin (w normalnym oocycie do 7 godzin); ponadto niekiedy ulega wydłużeniu i może przechodzić dodatkowy podział • Tak długie utrzymywanie się pierwszego ciałka kierunkowego może wynikać z faktu, iż proces jego degeneracji może być regulowany przez działanie szlaku Mos/MAPK