1 / 27

İnsan Primer Bronş Epitel ve Akciğer Hücre Dizi Kültürlerinin In Vitro Ortamda Elde Edilmesi*

İnsan Primer Bronş Epitel ve Akciğer Hücre Dizi Kültürlerinin In Vitro Ortamda Elde Edilmesi*. Hasan Bayram 1,2 , Bülent Göğebakan 2 , Öner Dikensoy 1 , Erhan Ekinci 1 . Gaziantep Üniversitesi Tıp Fakültesi, Göğüs Hastalıkları AD 1 ,

wilda
Download Presentation

İnsan Primer Bronş Epitel ve Akciğer Hücre Dizi Kültürlerinin In Vitro Ortamda Elde Edilmesi*

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. İnsan Primer Bronş Epitel ve Akciğer Hücre Dizi Kültürlerinin In Vitro Ortamda Elde Edilmesi* Hasan Bayram1,2, Bülent Göğebakan2, Öner Dikensoy1, Erhan Ekinci1. Gaziantep Üniversitesi Tıp Fakültesi, Göğüs Hastalıkları AD1, Gaziantep Üniversitesi Tıp Fakültesi, Hücre Kültürü Laboratuarı2. *Gaziantep Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Yönetim Birimi tarafından desteklenmiştir.

  2. Giriş-1 • Hücre dizileri ve primer hücre kültürleri hücrenin morfolojik, fizyolojik ve biyokimyasal özelliklerinin anlaşılmasında • Hastalıkların patogenezlerinin araştırılması, terapötik girişimlerin etkilerinin değerlendirilmesinde yararlı bir model oluşturmaktadırlar

  3. Giriş-2 • Hücre dizileri ve primer hücre kültürleri deneysel çalışmalarda dünyada yaygın olarak kullanılmaktadır • Türkiye’de hücre kültürlerinin üretimi ve araştırmalarda kullanımı sınırlıdır

  4. Giriş-3 • Akciğer hücre dizilerinin (A549) kültürü sadece birkaç merkezde yapılabilmektedir • Akciğerin primer hücre kültürleri ülkemizde henüz yapılmamaktadır.

  5. Amaç • Çeşitli nedenler ile pnömonektomi veya lobektomi yapılan hastaların akciğer eksplantlarından veya bronş biyopsilerinden primer bronş epitel hücre kültürü elde etmek. • Alveoler epitel hücre dizi (A549) kültürleri elde etmek.

  6. Metod • İnsan primer bronş epitel hücre kültürlerinin kütür kaplarında üretilmesinde Devalia ve ark.’nın metodu ve bu yöntemin biyopsiler için uyarlanmış şekli kullanıldı. (Devalia JL et al, RespirMed 1990) (Bayram H et al, J Allergy Clin Immunol 1998) • A549 hücre dizilerinin ‘flask’ ve 12 kuyucuklu kültür ‘plate’ lerinde üretiminde daha önce uyguladığımız metod kullanıldı (Bayram H et al, Eur Respir J 2006)

  7. Primer Bronş EpitelHücre Kültürleri

  8. Kültür Kap ve ‘Plate’ leri Hücre Kültür Kapları (BD Primaria™) 24-kuyucuklu ‘plate’ (BD Primaria™)

  9. ‘Medium 199’ Foetal bovine serum/Nu Serum4 (2.5ml) (2.5ml)/1ml bovine pancreatic insulin (2.5 g/ml) 1ml human transferrin (2.5 g/ml) 1ml epidermal growth factor (20g/ml) 1ml hydrocortisone (0.36 g/ml) 1ml L-glutamine (0.02mg/ml) 1ml antibiyotik/antimikotik solüsyon 100ml tamamlanır ve 0.2m por çap filtreden geçirilir Kültür Vasatı

  10. Doku Diseksiyon Materyalinin Yıkanması

  11. Bronş Biyopsi/Eksplantlarının Diseksiyonu

  12. Eksplantların kültür kaplarına transferi

  13. Eksplantlar kültür kaplarında

  14. Kültür ortamında 3. gün (Hoffman Modulation Contrast Işık Mikroskopu, x100)

  15. Kültür ortamında 8. gün (Hoffman Modulation Contrast Işık Mikroskopu, x200)

  16. Kültür ortamında 22. gün (eksplant alınmış) (Hoffman Modulation Contrast Işık Mikroskopu, x200)

  17. 24-kuyucuklu Plate’e Transfer

  18. Alveol Epitel Hücre Dizileri (A549)

  19. Kültür Flask ve ‘Plate’ leri Hücre Kültür Flask ve 12-Kuyucuklu ‘plate’ (Sigma, Corning™)

  20. DMEM %10 Foetal bovine serum L-Glutamine Kültür Vasatı

  21. A549- Flask içinde

  22. A549-1.gün A549 Kültür ortamında 1. gün (Hoffman Modulation Contrast Işık Mikroskopu, x300)

  23. A549 Kültür ortamında 5. gün (Hoffman Modulation Contrast Işık Mikroskopu, x300)

  24. 12-Kuyucuklu ‘Plate’e Transfer

  25. Özet • Primer bronş epitel hücre kültürleri Türkiye’de ilk kez biyopsi eksplantı ve akciğer rezeksiyon materyalinden üretildiler • Bu kültür modelinde primer hücreler ilk kez 24-kuyucuklu ‘plate’e transfer edilip üretildiler • Alveol epitel hücre dizi (A549) kültürleri ülkemizde bir göğüs hastalıkları laboratuarında ilk kez yapıldı

  26. Sabrınız İçin Teşekkür Ederim

More Related