HUELLA DACTILAR DEL DQF-COSY

1. PÉPTIDO PROBLEMA: K1 T2 L3 T4 L5 E6 A7 A8 L9 R10 N11 A12 W13 L14 R15 E16 V17 G18 L19 K20 HUELLA DACTILAR DEL DQF-COSY L5 G18 E1 V17 A2 U1 E2 L1 U3 U2 A3 A1 L4 W13 T4 T2 L2 L3 N11 Picos de cruce: 20 Picos de cruce esperados: ¿?

2. FUENTES DE INFORMACIÓN PARA IDENTIFICACIÓN DE SISTEMAS DE SPIN • Patrones típicos de picos de cruce en TOCSY y COSY para cada sistema de spin. • Forma de las señales COSY (constantes de acoplamiento). • Desplazamientos químicos típicos. • Intensidad de los picos de cruce. GRUPOS DE SISTEMA DE SPIN PARA IDENTIFICACIÓN: • Gly (1 Gly) • Ala, Thr (3 Ala, 2 Thr) • Val, Leu, Ile (5 Leu, 1 Val) • Tipo J: Ser, Asp, Asn, Cys, Trp, Phe, Tyr, His (1 Asn, 1 Trp) • Tipo U: Lys, Arg, Met, Gln, Glu, Pro (Leu) (2 Lys, 2 Arg, 2 Glu) • Aromáticos. (1 Trp) • Tipo X.

3. H N 1 H C CH3 2 C O PÉPTIDO PROBLEMA: ESPECTRO COSY. Identificación de sistemas de spin de alanina, treonina y glicina. H H N H N 1 3 1 C2H3 H C C H C H 2 NOE3 2 C O1H C O O Treonina Alanina Glicina G18 A2 A1 A3 T2 T4

4. TOCSY. Identificación de sistemas de spin de alanina y treonina. G18 A2 A3 A1 T2 T4

5. H N C2H3 H 1 3 2 4 H C H C C H N C2H3 2 3 4 1 3 H C C1H3 H H C C O 2 3 C C1H3 O PÉPTIDO PROBLEMA: ESPECTRO COSY. Identificación de los sistemas de spin de valina y leucinas. Leucina Valina V17 L1

6. TOCSY. SISTEMAS DE SPIN COMPLETOS DE VALINA Y LEUCINA G18 V17 L1 A2 A3 A1 T2 T4

7. TOCSY. OTRA LEUCINA Y SISTEMAS TIPO J Leu? G18 V17 L1 A2 A3 A1 T4 T2 W13 L2 N11

8. TOCSY. SISTEMAS DE SPIN COMPLETOS DE TIPO U E1 G18 V17 U1 E2 L1 A2 U2 A3 U3 A1 T4 T2 W13 L2 N11

9. H N H 1 2 … H C C 2 H C O PICOS DE CRUCE COSY PARA SISTEMAS DE SPIN DE TIPO U 1 2 1 1 2 2 1 2 2 1

10. TOCSY. LEUCINAS RESTANTES L5 E1 G18 V17 U1 E2 L1 A2 U2 A3 U3 A1 T4 L4 T2 W13 L2 L3 N11

11. PARTE DE OTROS SISTEMAS DE SPIN DE LEUCINAS L5

12. TOCSY: identificación de sistemas de spin completa V17 V17 V17 V17 V17 L2 L1 L1 L2 L1 L5 L5 L2 L3 L4 L3 L4 L4 L3 T2 T2 T4 L5 L5 L5 U3 U3 L1 A2 T4 L5 A2 U3 U4 L1 L2 A3 U3 A1 L1 L1 A3 U4 L4 U2 U2 U4 U4 U2 A1 L3 L2 L2 L4 L4 L4 U4 U1 U3 U1 U1 U2 U3 U1 L1 U4 V17 V17 U1 L3 L3 L1 L1 U1 U1 U2 U2 U2 U2 V17 U2 U3 L1 L5 U4 L5 E1 E1 U4 E2 U1 U4 U4 L5 U1 L5 E1 E2 E2 E1 E1 E1 E2 E2 E2 E2 N11 N11 N11 U3 U4 U3 U4 N11 U1 U3 U1 U1 U1 U4 U4 W13 U2 U2 U2 U2 W13 W13 W13 L5 L5 E1 E1 E1 G18 G18 V17 L5 V17 V17 U1 A2 E2 U1 L1 U1 A3 L1 L1 L1 A2 L4 L4 T2 T2 G18 U2 E2 W13 A3 U3 A1 T4 L4 U4 A1 U2 T2 U2 T2 U3 U3 W13 N11 T2 L2 T4 T4 L2 T4 L2 L3 L3 L3 N11

13. COSY: identificación de sistemas de spin V17 L1 L2 L5 L3 L4 L5 U3 L1 U4 L2 L4 U2 U1 U3 V17 L3 U4 L1 U1 L1 E1 U2 L5 L5 E1 L5 E1 E1 G18 G18 L5 V17 V17 U1 A2 A2 E2 U1 A3 L1 A1 L1 L4 G18 T2 U2 E2 U3 A3 U4 A1 L4 T2 T4 U3 T4 U2 T2 T2 W13 N11 T4 L3 L2 L2 T4 L3

14. H3 1 2 H3 C3 H2 C2 C3 NOE4 3 C2 C2 C2 CH2 C H2 C1 N1 NOE1 NOE3 4 H1 H1 NOE2 SISTEMA DE SPIN DE ANILLO AROMÁTICO DE W13 H1 H2 H3 H2 H3 1 2 3

15. H3 CONEXIÓN SISTEMA TIPO J CON ANILLO EN W13 Y GRUPO AMIDA EN N11. NOESY NOE4 W13 1 2 H3 C3 H2 C2 C3 NOE4 NOE2 H1 3 C2 C2 C2 CH2 C H2 H2 NOE1 C1 N1 H1 NOE1 NOE3 NOE 6 4 H1 H1 NOE2 NOE 5 H N H O1 C H C C N2 H H C H NOE 6 NOE 5 O N11

16. V17 V17 V17 L2 L1 L1 L2 L1 L5 L2 L5 L4 L3 L3 L4 L4 L3 T2 T2 T4 L5 L5 L5 L1 A2 T4 A2 L5 U3 L2 A3 U3 A1 L1 L1 L1 A3 U4 L4 U2 U2 U4 U2 A1 L2 L2 L4 L4 U1 U3 U1 U1 L1 U4 V17 L3 U1 V17 L3 L1 U1 U1 U2 U2 U2 U2 V17 U3 U2 L1 L5 L1 L5 L5 E1 E2 U4 E1 U1 U1 L5 E1 E2 E2 E1 E1 E1 E2 E2 E2 E2 N11 N11 U3 N11 U3 U4 N11 U1 U3 U1 U1 U4 U4 W13 U2 U2 U2 W13 W13 W13 L5 L5 E1 E1 L5 E1 G18 V17 V17 V17 U1 A2 E2 L1 U1 A3 L1 L1 L1 A2 L4 L4 E2 U2 G18 W13 T2 U3 A1 A3 U4 A1 L4 W13 T2 U2 U3 U3 N11 L2 T4 T4 T2 L2 L2 L3 L3 L3 N11

17. W13 L5 E1 G18 V17 E2 U1 L1 U2 A2 T2 U3 A3 A1 L4 W13 T2 L2 T4 L3 N11