390 likes | 684 Views
Sakupljanje krvotvornih matičnih stanica iz periferne krvi Zavod za kliničku transfuziologiju KBC Zagreb. Ines Bojanić. Sakupljanje i transplantacija KMS iz periferne krvi. PREDNOSTI jednostavniji postupak sakupljanja nije potreban operativni zahvat i anestezija
E N D
Sakupljanje krvotvornih matičnih stanica iz periferne krviZavod za kliničku transfuziologijuKBC Zagreb Ines Bojanić
Sakupljanje i transplantacija KMS iz periferne krvi PREDNOSTI • jednostavniji postupak sakupljanja • nije potreban operativni zahvat i anestezija • sigurniji postupak za davatelje s kroničnim bolestima • manje neugodnosti i brži oporavak davatelja iza zahvata • brži hematološki oporavak nakon transplantacije zbog različitog sastava stanica NEDOSTATCI • primjena citokina u zdravih davatelja • jači kronični GVHD • mogućnost neuspješnog sakupljanja
Davatelji i leukafereze učinjene u Zavodu za kliničku transfuziologiju (1994.-2004.)
Sakupljanje autolognih KMSiz periferne krvi u Zavodu za kliničku transfuziologiju
Obilježja bolesnika/davatelja autolognih KMS (N = 576) • SPOL M/Ž 312 (54,2%) / 264 (45,8%) • DOB god 44 (3 – 68) • DIJAGNOZA • NHL 160 (27,7%) • Mb Hodgkin 80 (13,9%) • Multipli mijelom 131 (22,8%) • AML 137 (23,8%) • ALL 41 (7,1%) • Solidni tumori 27 (4,7%)
Mobilizacija autolognih KMS • Kemoterapija + G-CSF • Samo G-CSF (5-10 μg/kgTT) Kada početi sakupljanje? • CD34+>10 x 106/L Cilj • CD34+ >3,5 x 106/kgTT
Sakupljanje autolognih KMS Stanični separator • COBE Spectra (MNC procedure) • Fenwal CS 3000 Venski pristup • centralni venski kateter (v. subclavia, v.femoralis, v. jugularis) • periferne vene
Obilježja autolognih leukafereza N = 1572median(raspon) 2 (1-5) • Ulazni protok krvi (mL/min) 82 (16-135) • Trajanje sakupljanja (min) 240 (80-324) • Volumen utrošenog ACD-A (mL) 921 (133-1827) • Ukupno procesiran volumen krvi(mL) 1900 (2700-38221) • Procesiran ukupan volumen krvi (x) 3,56 (0,86-6,30) • Volumen pripravka (mL) 227 (87 – 335)
Rezultati sakupljanja autolognih stanica • MNC x 108/kg TT 4,76 (0,69-12,7) • CD34+ x 106/kg TT 4,49 (0,03-42,64) • CFU-GM x 104/kg TT 54,4 (2-3916) • Sakupljen transplantat (%) 483 / 576 (83,8%)
Broj CD34+ stanica u produktu s obzirom na broj leukocita u perifernoj krvi r=-0.04 n=112
Broj CD34+ stanica u produktu s obzirom na broj CD34+ stanica u perifernoj krvi r=0.98n=61
Poboljšanje sakupljanja KMS iz periferne krvi • povećanje doze citokina • različite vrste kemoterapije + citokini • sinergističke kombinacije citokina • povećanje učinkovitosti leukafereze • procesiranje većeg volumena krvi tijekom afereze: leukafereze velikog volumena (LVV)
ako je broj CD34+ stanica u perifernoj krvi <10 x 106/L odgoditi aferezu 10-20 x 106/L razmotriti leukaferezu velikog volumena (LVV) >20 x 106/L leukafereza standardnog volumena (LSV) Planiranje početka leukafereze
Leukafereza velikog volumena (LVL) StandardnaLVV Volumen krvi 2-3 x TBV 3-6 x TBV Antikagulans ACD ACD/Heparin Inlet:AC Ratio 12:1 24:1 Inlet Pump Flow Rate2 x veći Collect Pump Flow Rate1.0 ml/min
LSV (N=166) vs. LVV (N=155) LSVLVV trajanje (min) 240 (150-284) 240 (80-322) procesiranTBV (x) 2,2 (1,8-2,5) 4,7 (3,7-6,3) procesirano L 12,3 (7-18,2) 23,5 (9,4-38,2) ulazni protok (mL/min)51,8 (35-66) 98,6(42-121) LSV LVV TNC x 108/kgTT 3,07(0,55-9,84) 3,28(0,71-11,71 NS MNC x 108/kgTT 1,63(0,51-4,72) 2,15(0,56-6,12)0,00001 CD34+ x 106/kgTT 2,11(0,09-19,03) 2,73(0,09-26,65)0,01
Leukafereze velikog volumena krvi • Prednosti • manji broj postupaka leukafereze • pogodnije za davatelja/bolesnika • manji troškovi • Nedostatci • potreban visok protok krvi • metaboličke komplikacije (hipokalcemija) • veći gubitak drugih krvnih stanica: trombocitopenia
Komplikacije leukafereze • hemodinamske promjene • vaskularni pristup • reakcije na antikoagulans i druge otopine • gubitak ostalih krvnih stanica • infekcije • greška u radu staničnog separatora
Nuspojave tijekom leukafereza • 762 autologne leukafereze / 235 hematološko-onkoloških bolesnika • mobilizacija: • kemoterapija + G-CSF • samo G-CSF • stanični separatori: • COBE Spectra (MNC procedure) • Fenwal-CS 3000
Vrste nuspojava UKUPNO 137/762 18,0% • hipokalcemija101(73,8%) (fascikulacije mišića lica, mišični tremor, grčevi prstiju) • vazovagalne reakcije 24 (17,5%) BLAGE, SREDNJE TEŠKE (mučnina, povraćanje, hiperventilacija) 22 TEŠKE (hipotenzija, kolaps sinkopa)2 • hemoragička dijateza(petehije, epistaksa)2 (1,4%) • alergijska reakcija (urtike) 1 (0,7%) • komplikacije venskog pristupa 9 (6,6%) CENTRALNI KATETER (krvarenja, ugrušci)7 PERIFERNE VENE (hematomi) 2
Nuspojave zbog kojih su prekinute leukafereze UKUPNO 4/762 0,57% • vazovagalne reakcije 2 (hipotenzija 1; prekordijalna bol bez EKG znakova ishemije miokarda 1) • smetnje perifernog venskog pristupa 2 (bolni hematomi)
Učestalost nuspojava ovisno o vrsti separatora, spolu, dobi i tjelesnoj težini bolesnika Nuspojave N(%) p • Separator COBE Spectra 125 (17.8%) Fenwal CS3000 12 (20.3%) 0.6231 • Spol muški 44 (13,1%) ženski 93 (21.9%) 0.0006 • Dob 20 god 14 (18.2%) >20 god 123 (18.0%) 0.9610 • Težina <50 god 15 (26.8%) 50 god 122 (17.32%) 0.0746
Obilježja pedijatrijskih bolesnika (N=25) • SPOL (m/ž) 10/15 • DOB god 15 (3-18) • TEŽINA kg 51 (16-67) • TBV mL 3483 (1135-4831) • DIJAGNOZE Neuroblastom 8 Mb. Hodgkin 7 Akutne leukemije 6 NHL 1 Ganglioneuroblastom 1 Ewingov sarkom 1 Meduloblastom 1
Obilježja leukafereza u pedijatrijskih bolesnika • Vrsta mobilizacije • kemoterapija + G-CSF 20 (80%) • samo G-CSF 5 (20%) • Venski pristup dvoluminalni centralni venski kateter • v. subclavia 10 • v. jugularis 2 • v. femoralis 13 • Ukupan broj leukafereza 73 • median (raspon) 2 (1-6)
Obilježja leukafereza u pedijatrijskih bolesnika • COBE Spectra (MNC procedure): LVL • antikoagulans: ACD-A + heparin • grijač za krv Specra-THERM • volumen krvi u ekstrakorporalnoj cirkulaciji: 284 mL • bolesnici TT <25 kg: N=8 • “primig” separatora s ozračenim koncentratom eritrocita sa smanjenim brojem leukocita • trajno praćenje vitalnih funkcija (RR, puls, EKG) • nakoknada kalcija u infuziji
Rezultati sakupljanja autolognih stanica u pedijatrijskih bolesnika • MNC x 108/kg TT 6,01 (0,97-12,73) • CD34+ x 106/kg TT 3,5 (0,19-28,01) • CFU-GM x 104/kg TT 66,31(3,6-180,7) • Sakupljen presadak (%) 21 / 25 (84,0%)
Nuspojave tijekom pedijatrijskih afereza • simptomi hipokalcemije uzrokovani citratom (perioralne ili periferne parestezije) 4 • problemi s centralnim venskim kateterom (krvarenje, smetnje protoka) 2 • Ukupno 6/73 (8,21%)
Sakupljanje alogenih KMSiz periferne krvi u Zavodu za kliničku transfuziologiju
Obilježja primatelja alogenih KMS (N = 31) • SPOL M/Ž 17 (54,8%) / 14 (45,2%) • DOB god 29 (0 – 53) • TJELESNA TEŽINA kg 56 (8 – 100) • DIJAGNOZA • ALL 10 • AML 6 • CLL 2 • CML 5 • NHL 2 • Mb Hodgkin 1 • Ca renis 1 • Aplastična anemija 3 • SCID 1
Obilježja srodnih davatelja alogenih KMS (N 31) • SPOL M/Ž 13(41,9%) / 18(58,1%) • DOBgod 42 (11 - 77) • TJELESNA TEŽINAkg72 (35 - 108) • SRODSTVO brat 11 (35,5%) sestra 10 (32,3%) majka 8 (25,7%) otac 2 (6,5%) • HLA PODUDARNOST identični 27 (87,1%) haploidentični 4 (12,9%)
Mobilizacija i sakupljanje alogenih KMS • G-CSF (5-10 μg/kgTT) 4-5 dana Cilj • “standardni” transplantat • CD34+ >3 x 106/kgTT primatelja • “mini transplant” • CD34+ >5 x 106/kgTT primatelja • haploidentični davatelj (CD34 selekcija transplantata) • “megadoze” CD34+ >10 x 106/kgTT primatelja
Obilježja sakupljanja Venski pristup • periferne vene (100%) Stanični separator • COBE Spectra (MNC procedure) • LVV • kontinuirano praćenje vitalnih funkcija (EKG, RR) u koronarnoj jedinici: davateljica 76 god.
Obilježja leukafereza N = 88median(raspon): 3 (1-5) • Ulazni protok krvi (mL/min) 63 (33-110) • Trajanje sakupljanja (min) 240 (106-300) • Volumen utrošenog ACD-A (mL) 868 (847-1208) • Ukupno procesiran volumen krvi(mL) 12509(4643-23782) • Procesiran ukupan volumen krvi (x) 3,08 (0,86-5,18) • Volumen pripravka (mL) 266 (97 – 496)
Rezultat sakupljanja alogenih stanica • TNC x 108/kg TT 21,66 (7,06-190,72) • MNC x 108/kg TT 20,23 (7,25-190,72) • CD34+ x 106/kg TT 5,11 (1,36 – 37,09) • Sakupljen transplantat 29/31 (93,5%)
Laboratorijske vrijednosti prije i nakon leukafereze Parametar prije nakon • Hb (mg/L) 128 (110-161) 125(103-148) NS • L (x 109/L) 40 (10-76) 26,4 (10,9-54,4) 0,0001 • Tr (x 109/L) 141 (98-311) 88 (67-187) 0,0001 • Ca (mmol/L) 2,39 (2,07-3,99) 2,39 (2-2,66) NS
Nuspojave tijekom leukafereze UKUPNO 14 / 88 (15,9%) • komplikacije venskog pristupa • bolovi u rukama, pucanje vena i smetnje protoka 8 • glavobolja 3 • hipokalcemija fascikulacije mišića lica, grčevi prstiju 2 • alergijska reakcija urtike 1 Nuspojave zbog kojih su prekinute leukafereze UKUPNO 3 / 88 (3,4%) • bolovi u rukama 1 • pucanje vena i nemogućnost održavanja protoka 2
Regenereacija tkiva Genska terapija Transplantacija Stanična terapija Vakcine Matična stanica