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Electroforesis capilar

Electroforesis capilar. Ventajas de la electroforesis capilar. Alta resolución (10 5 a 10 6 platos teóricos ) -HPCE Requiere pequeño volumen de muestra (1-10 nl) Rápida separa ció n (1 a 45 min.) Aplicable a todo tipo de sustancias Automatización Cuantificación (lineal)

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Electroforesis capilar

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Presentation Transcript

  1. Electroforesis capilar

  2. Ventajas de la electroforesis capilar • Alta resolución (105a 106platos teóricos)-HPCE • Requiere pequeño volumen de muestra (1-10 nl) • Rápida separación (1 a 45 min.) • Aplicable a todo tipo de sustancias • Automatización • Cuantificación (lineal) • Reproducibilidad • Puede acoplarse a espectrometría de masa • Datos fundamentales

  3. Esquema de equipo de CE

  4. Tipos de moléculas que pueden ser separadas por CE • Proteínas • Péptidos • Amino ácidos • Ácidos nucleicos • Ionesinorgánicos • Bases orgánicas • Ácidos orgánicos

  5. Condiciones de CE • Se utilizan altos voltajes 10-30kV.(>500V/cm; 10-20 mA) • Moléculas positivas, negativas o neutras puede separarse. • La separación se realiza en un tubo capilar de sílica fundida cubierta con poliamida para darle flexibilidad. • El tubo capilar tiene 30-100cm. De longitud y 25-100m de diámetro interno. • Los grupos hidroxilos de la sílica se disocian dejando el tubo con una carga negativa.

  6. Tubo capilar de sílica con grupos OH expuestos

  7. Flujo electroendosmótico

  8. Migración

  9. Movilidad en CE m = v/E = Q/ 6prh

  10. Surfactantes en MECC

  11. Inyección de la muestra

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