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ELECTROFORESIS. Tema 08 del Programa Por apuntes. © Sánchez Moreno, A. Hematología. IES Miguel de Cervantes. Murcia. FUNDAMENTO DE LA ELECTROFORESIS. Estudia la migración de las particulas coloidales en el seno de un campo eléctrico. SEPARACIÓN DE LOS ELEMENTOS DE UNA MEZCLA.
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ELECTROFORESIS Tema 08 del Programa Por apuntes © Sánchez Moreno, A. Hematología. IES Miguel de Cervantes. Murcia
FUNDAMENTO DE LA ELECTROFORESIS • Estudia la migración de las particulas coloidales en el seno de un campo eléctrico
SEPARACIÓN DE LOS ELEMENTOS DE UNA MEZCLA • Separa los diferentes elementos que componen una mezcla compleja en función de la carga eléctrica de los mismos
MIGRACIÓN ELECTROFORÉTICA • Es la movilidad de la molécula por unidad de campo eléctrico - + Aplicación
VELOCIDAD DE LAS PARTICULAS Depende de ... • La carga de las mismas • La intensidad del campo eléctrico y • Del coeficiente de fricción de las moléculas con el medio
TIPOS DE ELECTROFORESIS Libre Tipos de electroforesis Papel Sobre soporte Acetato de celulosa Almidón Poliacrilamida Agar Gel
Fraccionamiento de las hemoglobinas Diferenciación de la hemoglobina fetal Diagnóstico de talasemias, anemias falciformes, etc Proteínas séricas Proteínas urinarias Lipoproteínas Ácidos nucleicos Enzimas Inmunoelectroforesis Etc. APLICACIÓN DE LA ELECTROFORESIS
EQUIPO DE ELECTROFORESIS • Fuente de alimentación • Soporte para las tiras de acetato de celulosa • Aplicador • Cubetas • Puente • Reactivos
FUENTE DE ALIMENTACIÓN • 150-400 voltios • 1,25 miliAmperios • Temporalizador • Inversor de corriente • Varias tomas • Cable rojo y negro
CUBETA Y PUENTE • Las tiras sobre el puente y en la cubeta • Con tampón • Con la tapadera para crear una atmósfera saturada • Con los cables para conectar a la fuente
APLICADOR • Macro • Semi micro y • Micro
LOS REACTIVOS • Solución tampón • Colorante • Decolorante • Solución trasparentadora
PREPARACIÓN DEL HEMOLIZADO • Antes determinar la hemoglobina • Cloroformo, agua destilada y sangre • Guardar el sobrenadante
MIGRACIÓN • Aplicar el protocolo de la técnica para la migración • Colorear • Decolorar • Transparentar