VITEK 2, Norden och EUCAST Jonas Rubensson Nordic Brand Manager, Clinical

1. VITEK 2, Norden och EUCAST Jonas Rubensson Nordic Brand Manager, Clinical

2. Automatiserad art- och resistensbestämning

3. VITEK 2 användare i Norden • Sverige: 13 av 29 lab (45%) • Danmark: 13 av 14 lab (93%) • Norge: 12 av 20 lab (60%) • Finland 9 av 27 lab (33%) • Norden 47 av 90 lab (52%)

4. VITEK 2 – resistensbestämning Princip • Snabbmetod för MIC-bestämning • Ett kliniskt relevant koncentrationsintervall analyseras • Validerad mot buljongsspädnings- metoden för MIC-bestämning (referensmetod) • Godkänd av Food and Drug Administration (FDA) och andra regulatoriska myndigheter • Baseras på ”Interpretive reading of in-vitro antibiotic susceptibility tests” av Patrice Courvalin (CMI Dec96)

5. VITEK 2 – resistensbestämning Princip • Transmittansavläsning vid 660 nm • Tillväxtkinetiken analyseras var 15:e minut • Transmittansvärdet för varje brunn jämförs mot kontrollbrunnen (utan antibiotika) • För varje antibiotika omvandlar en specifik algoritm rådata till ett kinetiskt MIC-värde • Expertsystemet analyserar och tolkar det erhållna antibiogrammet (tolkande avläsning)

6. Koncentrationer på testkort • VITEK 2 AST – C1, C2, C3 C1 C2 C3 PC

7. Tillväxten i brunnarna övervakas C1 C2 C3 50% 10% 75% VITEK 2 analyserar rådata per brunn < < Genomgång av databasen

8. 0% 10% 0% 2 50% 10% 0% 4 75% 50% 10% 8 25% 100% 100% 16 50% 100% 100% 32 100% 75% 100% 64 Tillväxtmönster i databasen C1 MIC < < C2 C3

9. 0% 75% 50% 10% Stämmer ej 50% 10% 0% 75% 50% 10% 25% 100% 100% 50% 100% 100% 100% 75% 100% Tillväxtmönster i databasen C1 MIC < < C2 C3 0% 10% 2 4 8 16 32 64

10. 0% 75% 50% 10% Stämmer ej 50% 10% 0% 75% 50% 10% 25% 100% 100% 50% 100% 100% 100% 75% 100% Tillväxtmönster i databasen C1 MIC < < C2 C3 0% 10% 2 4 8 16 32 64

11. 0% 75% 50% 10% Stämmer! 50% 10% 0% 75% 50% 10% 25% 100% 100% 50% 100% 100% 100% 75% 100% Tillväxtmönster i databasen C1 MIC < < C2 C3 0% 10% 2 4 MIC = 8 8 16 32 64

12. VITEK 2 – resistensbestämning

13. VITEK 2 – resistensbestämning

14. VITEK 2 – resistensbestämning • De koncentrationer som testas på korten har valts för att ge den bästa separationen av MIC värden inom det intervall som svaras ut (“Calling range”). • MIC värden rapporteras som S-I-R enligt de inlagda brytpunkterna. • Koncentrationsintervallet (“Calling range”) ska täcka in den lägsta koncentrationen av kliniskt intresse och den högsta brytpunkten. • Flera publicerade utvärderingar visar på större noggrannhet och reproducerbarhet jämfört med diskdiffusionsmetoden.

15. VITEK 2 – resistensbestämning • Genomsnittstider vid resistensbestämning • Enterobacteriaceae 6,5 timmar • Icke-Enterobacteriaceae 11,6 timmar • Stafylokocker 6,7 timmar • Enterokocker 9,4 timmar • S. agalactiae 7,1 timmar • S. pneumoniae 8,1 timmar • Candida spp. 16,0 timmar • Flera olika alternativ finns för kapacitet

16. VITEK 2 – resistensbestämning • Antal antibiotika/antimykotika som för närvarande är utvecklade för resistensbestämning: • Gramnegativa stavar63 st • Grampositiva kocker 78 st • Jästsvamp 4 st • Ca 20 antibiotika ryms på ett testkort. • Ett stort antal testkort med olika sammansättning finns att välja bland. • De flesta länder har tagit fram egna VITEK 2-kort, t.ex. Sverige, Norge och Finland.

17. VITEK 2 – resistensbestämning Exempel på testkort för resistensbestämning

18. VITEK 2 – resistensbestämning • Expertsystemet i VITEK 2 är precis som alla andra expertsystem, på papper eller datoriserade, beroende av markörer för resistensmekanismer. • Exempel: Om man bara vill ha med en karbapenem på ett testkort för gramnegativer rekommenderas Ertapenem för bästa känslighet för påvisa karbapenemresistens. • bioMérieux har också tagit fram nya konfirmerande tester för att påvisa resistensmekanismer, t.ex. • ESBL-test • ICR-test

19. Implementering av EUCAST brytpunkter • Mjukvaruversion PC 4.01 (Q2, 2009) • Tolkningsstandarden CA-CFM kommer att uppdateras med alla EUCAST-brytpunkter som införts av CA-SFM 2007 och som validerats för VITEK 2. Övriga brytpunkter kan ändras manuellt i enlighet med EUCAST. • Mjukvaruversion PC 4.02 (Q3, 2009) • Tolkningsstandarden CA-SFM blir tolknings- • standarden EUCAST. Där det inte finns några EUCAST- • brytpunkter kommer brytpunkter från CA-SFM att • finnas. Dessa kan vid behov ändras manuellt till egna • lokala brytpunkter.

20. Expertsystemet (AES) • De vildtypsdistributioner som har tagits fram av EUCAST har utvecklats på ett liknande sätt som de som finns i AES. • En grundlig genomgång av vildtypsdistributionerna i AES har gjorts för att bedöma överensstämmelse med EUCAST kliniska brytpunkter. • Där diskrepans har påträffats kommer vildtyps-distributionerna i AES att modifieras för att motsvara EUCAST kliniska brytpunkter.

21. Expertsystemet (AES)

22. Expertregler

23. Expertregler • EUCAST har utformat expertregler som täcker in naturlig resistens, exceptionella fenotyper och tolkningsregler. • Vår analys har inte påvisat några betydande skillnader mellan EUCAST expertregler och AES. • EUCAST tolkningsregler motsvarar inställningen ”Phenotypic Interpretations” i AES – vilket är den tolkningsstandard som används i Sverige. • Kommer att implementeras fullt ut i version 4.02.

24. Anpassning till EUCAST • bioMérieux arbetar intensivt på att anpassa resistensbestämning med VITEK 2 till EUCAST riktlinjer. • Det största arbetet är redan utfört. • Tills det finns en färdig tolkningsstandard som heter EUCAST skapas en anpassad standard. • Detta har och kommer att kommuniceras till våra användare världen över.

25. Tack för er uppmärksamhet!