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Trabajo Práctico Sistema Reproductor en Mamíferos. Cambios en la Fisiología Ovárica-Uterina durante el ciclo estral. Ciclos Reproductivos.
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Trabajo PrácticoSistema Reproductor en Mamíferos Cambios en la Fisiología Ovárica-Uterina durante el ciclo estral
Ciclos Reproductivos Sucesión periódica de ciertos procesos o etapas de la fisiología ovárica que se dan comoconsecuencia de variacioneshormonales y se manifiestan en cambios morfo-funcionales en los órganos reproductivos femeninos (vagina, útero, oviductos).
Tipos de ciclos en mamíferos Menstrual Estral • En la mayoría de los mamíferos • La hembra sólo es receptiva durante un período del ciclo (celo o estro). • No hay necrosis del endometrio. En primates La hembra es receptiva durante todo el ciclo. Finaliza con la necrosisdelendometrio
Clasificación de las Especies según su ciclo estral Especies Monoéstricas: 1 ciclo por año con una fase de anestro prolongada. Ej: perra. Especies Poliéstricas: 2 o + ciclos por año. Continuas: Ciclos estrales durante todo el año. Ej: vaca, cerda, rata, ratona. Estacionales: Ciclos sólo se producen en una estación determinada del año. Ej: oveja, cabra, yegua.
Etapas del Ciclo Estral Cambios conductuales aumentan posibilidad de apareo Manifestación externa CELO Proestro: periodo de crecimiento folicular que se inicia con la regresión del cuerpo lúteo y culmina con la aparición del estro (FSH) Estro: periodo de receptividad sexual, al final del cual se produce la ovulación (LH ) Metaestro: periodo de desarrollo inicial del cuerpo lúteo que comienza al final del estro (PG) Diestro: periodo de actividad del cuerpo lúteo maduro posterior a la ovulación y finaliza con la lúteolisis (PG y E)
Ciclo Ovárico en Roedores Duración total del ciclo estral en ratón: 4-5 días
Factores que modifican el ciclo estral • Estado hormonal/hormonas exógenas • Disruptores endocrinos • Contaminantes • Tóxicos (pesticidas, herbicidas) • Drogas de uso y abuso (psicofármacos, alcohol, cocaína) • Estado Nutricional • Estrés • Cambios ambientales (temperatura, fotoperíodo) • Intervenciones quirúrgicas de órganos reproductores
Objetivos del TP Observar e interpretar los cambios en el ciclo estraly en el aparato ovárico- uterino-vaginal durante el ciclo estral Conocer el ciclo estral en mamíferos usando un modelo experimental de hembras de ratón
Estudios y Procedimientos del Trabajo Práctico Primer Paso: Pesar los animales (peso corporal total en mg)
Estudio del Ciclo estral del ratón por la técnica de Citología Vaginal: • Extracción del Frotis Vaginal • Fijación y Coloración • Observación al Microscopio • Determinación del estado del ciclo por cuantificación de los tipos celulares: • Identificar y esquematizar los tipos celulares según sus características morfológicas • calcular %
Fijación y coloración 1) Fijación en metanol 1 min. (campana) 2) Pasaje por alcohol 50% 1 min. 3) Lavado con agua destilada 1 min. 4) Coloración con hematoxilina 10 min. 5) Lavado con agua corriente 30 seg. 6) Pasaje por agua destilada 1 min. 7) Pasaje por alcohol 70% 1 min. 8) Coloración con Orange G 6 min. 9) Pasaje por alcohol 70% 1 min. 10) Coloración con Eosina 30 seg. 11) Pasaje por alcohol 70% 1 min.
Principales células reconocibles en un Frotis Vaginal Intermedias Parabasales Leucocitos Queratinizadas Superficiales
PROESTRO PB IN + Células epiteliales parabasales (PB) e intermedias (IN) Eritrocitos y neutrófilos (+)
ESTRO SP Q Celulas Superficiales (SP) y Queratinizadas (Q).
DIESTRO + PB IN Células epiteliales parabasales (PB) e intermedias (IN) y neutrófilos (+)
Tabla por grupo Tabla general
Útero Bicorneo Estudio sobre Ovario y Útero • Disección del aparato genital femenino.
Ovario Oviductos útero Ayuda experimental: Eliminar toda la grasa del útero, cortar el cervix al ras del útero y separar los ovarios, poner el útero sobre un papel para facilitar la eliminación de la grasa. Pasar a papel de aluminio y pesar. Luego poner en una caja de Petri con solución fisiológica y observar a la lupa. • Reconocimiento y observación de las partes bajo lupa: • Ovarios • Oviducto • Cuernos uterinos • Cérvix • Separación de ovarios, oviducto y útero
IUS = peso útero/ peso corporal x 100 Estudio del estado Uterino • Pesado del útero (mg) • Observar y describir aspecto general: color, irrigación, volumen, grosor y tamaño. • Calcular Índice Útero Somático (IUS)
Ayuda experimental: Eliminar la mayor cantidad de grasa posible de los ovarios para favorecer su visualización. Colocar el ovario en una caja de Petri con solución fisiológica y observar bajo la lupa. Estudio del estado Ovárico • Observar cuerpos lúteos (CL) y folículos (FL) • Cuantificar presencia de CL.