1 / 15

Sledování vlivů prostředí na modelové kultury mikroorganismů pomocí optických metod

VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE. Sledování vlivů prostředí na modelové kultury mikroorganismů pomocí optických metod. Ing. Ondřej Podrazký Školitel: Doc. Ing. Jiří Burkhard, CSc. Školitel-specialista: Ing. Gabriela Kuncová CSc. Princip fluorescence. Fluorescenční spektroskopie.

anthea
Download Presentation

Sledování vlivů prostředí na modelové kultury mikroorganismů pomocí optických metod

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE Sledování vlivů prostředí na modelové kultury mikroorganismů pomocí optických metod Ing. Ondřej Podrazký Školitel: Doc. Ing. Jiří Burkhard, CSc. Školitel-specialista: Ing. Gabriela Kuncová CSc.

  2. Princip fluorescence

  3. Fluorescenční spektroskopie krátká doba měření velice dobrá citlivost prakticky neinvazívní možnost měření on-line intenzita a poloha píků je ovlivněna pH a polaritou rozpouštědla, teplotou, atd. efekt zhášení (quenching) (O2, FeII+,atd.) efekt vnitřního filtru (inner filter effect)

  4. 2-D fluorescenční spektroskopie možnost sledování více fluoroforů současně možnost eliminace některých vlivů prostředí(pH, polarita, fluorescence pozadí, atd.) delší doba měření v porovnání s klasickou fl.sp. náročnější instrumentace

  5. (2-D) fluorescenční spektrofotometr

  6. Některé typické biogenní fluorofory aminokyseliny: L-Tryptofan L-Tyrosin L- Fenylalanin Koenzymy: Vitamíny: NADH Pyridoxin Riboflavin

  7. Biogenní fluorofory ve 2-D fluorescenčním spektru - riboflavin, FAD, FMN - NAD(P)H - pyridoxin, pyridoxamin, pyridoxal-5’-fosfát - tryptofan - tyrosin - fenylalanin

  8. Maxima píků fluoroforů ve 2-D fluorescenčním spektru Fluorofor maximum (EX/EM nm) Tyrosin 270/300, 230/300Tryptofan 270/350Fenylalanin 260/280 Pyridoxin 320/390, 250/390Pyridoxamin 320/390, 250/390 NADH 370/470, 310/470 Riboflavin 450/530, 370/530, 270/530FMN 450/530, 370/530, 270/530FAD 500/530, 400/530, 320/530

  9. Geometrické uspořádání měřicích metod čtvercová kyveta optická vlákna průtočná kyveta

  10. Porovnání měřicích metod optická vlákna • zcela neinvazívní- možnost měřit „on-line“- lze měřit i vzorky se zákalem • velký útlum záření ve vláknech průtočná kyveta • možnost měřit „on-line“- lze měřit i vzorky se zákalem • menší citlivost než u čtvercové kyvety, ale větší než u vláken • možnost změn podmínek v měřicí smyčce (obsah O2, teplota) čtvercová kyveta • vysoká citlivost- vhodné pouze pro transparentní vzorky- není možno měřit „on-line“

  11. Porovnání citlivosti měřicích metod (salicylan sodný, 1 mg.L-1, EX=295 nm)

  12. Příklad odečítání 2-D fluorescenčních spekter po 26 h kultivace = – médium

  13. Růstové křivky Saccharomyces Cerevisiaezískané z 2-D fluorescencenčních spekter

  14. Růstové křivky Pseudomonas sp2 degradujících PCB získané z 2-D fluorescencenčních spekter

  15. Problémy najít vhodné médium identifikovat jednotlivé píky ve spektrech interpretace spekter

More Related